章dna的復(fù)制和修復(fù)(2)-資料下載頁
2025-04-30 04:27本頁面
【正文】 cDNA： 反義 DNA 幾乎所有真核生物 mRNA分子的 3’ 末端都有一段 polyA,當(dāng)加入寡聚 dT作為引物時， mRNA就可作為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶催化下在體外合成與該 mRNA互補(bǔ)的 DNA， 稱為 cDNA。 不能把 “ 中心法則 ” 絕對化，遺傳信息也可以從 RNA傳遞到 DNA。 促進(jìn)了分子生物學(xué)、生物化學(xué)和病毒學(xué)的研究，為腫瘤的防治提供了新的線索。目前逆轉(zhuǎn)錄酶已經(jīng)成為研究這些學(xué)科的工具。 1983年 ,發(fā)現(xiàn)人類免疫缺陷病毒 (human immune deficience virus,HIV),感染 T淋巴細(xì)胞后即殺死細(xì)胞 ,造成宿主機(jī)體免疫系統(tǒng)損傷 ,引起艾滋病 (acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)， 該病毒為 逆轉(zhuǎn)錄病毒。 逆轉(zhuǎn)錄酶發(fā)現(xiàn)的理論與實(shí)踐意義： 第三節(jié) DNA損傷與修復(fù) DNA在復(fù)制時產(chǎn)生錯配，病毒基因整合，某些物化因子如紫外光、電離輻射和化學(xué)誘變等，都可能使 DNA的結(jié)構(gòu)及功能發(fā)生改變 。從而引起生物突變，甚至導(dǎo)致死亡。 ? DNA的損傷 基因修復(fù) “工程隊(duì)” 錯配修復(fù) 直接修復(fù) 切除修復(fù) 重組修復(fù) SOS修復(fù) 錯配修復(fù) 通過一個酶系統(tǒng)修復(fù) DNA錯配的堿基根據(jù)復(fù)制叉上DNA甲基化程度，切除尚未甲基化的子代鏈上的錯配堿基 參與錯配修復(fù)的酶與蛋白質(zhì) Dam甲基化酶 。 MutH、 MutL、 MutS蛋白 。 解螺旋酶 Ⅱ 。 DNA聚合酶 Ⅲ 。 外切酶 Ⅰ 、 Ⅹ 、 Ⅶ ； DNA連接酶 ； SSB 甲基化指導(dǎo)的錯配修復(fù) 甲基化指導(dǎo)的錯配修復(fù) (二 ) 堿基的切除修復(fù) （ 1） 堿基切除修復(fù) (Base Excision Repair BER) DNA糖苷酶 (glycosylase)識別損傷堿基并切開糖苷鍵 Ap內(nèi)切酶切開 Ap位點(diǎn)附近的磷酸二酯鍵 DNA PolI除去 DNA鏈的損傷部分 (5’ 3’外切 )并合成 連接酶封閉 （ 2）核苷酸切除修復(fù) (Nucleotide Excision Repair NER) uvrABC核酸酶切下含有損傷部位的一段 DNA片段 (約 12Nt)， DNA PolI填補(bǔ)缺口，連接酶封閉切口 切除修復(fù)對多種 DNA損傷包括堿基脫落形成的無堿基位點(diǎn) 、 嘧啶二聚體 、 堿基烷基化 、 單鏈斷裂等都能起修復(fù)作用 。 DNA解螺旋酶 （三）直接修復(fù) （四）重組修復(fù)(rebinational repair) 重組修復(fù)不能完全去除損傷 ， 損傷的DNA段落仍然保留在親代 DNA鏈上 ， 只是重組修復(fù)后合成的 DNA分子是不帶有損傷的 ，但經(jīng)多次復(fù)制后 ， 損傷就被 “ 沖淡 ” 了 ， 在子代細(xì)胞中只有一個細(xì)胞是帶有損傷 DNA的 。 （六） SOS反應(yīng)和誘導(dǎo)修復(fù)（易錯修復(fù)） ? SOS反應(yīng)： 細(xì)胞 DNA受到嚴(yán)重?fù)p傷或 DNA復(fù)制系統(tǒng)受到抑制的緊急狀態(tài)下，為求生存而出現(xiàn)的應(yīng)急反應(yīng)。 ? SOS反應(yīng)包括 : 避免差錯的修復(fù)能力增強(qiáng) 誘導(dǎo)產(chǎn)生無校正功能的 DNA聚合酶合成 抑制細(xì)胞分裂 ? SOS反應(yīng)是生物 在不利環(huán)境中求得生存 的一種基本功能。對原核生物它產(chǎn)生高變異，對高等動物則是致癌的。 第四節(jié) DNA復(fù)制的精確性（高保真復(fù)制） 堿基的配對規(guī)律： 摸板鏈與新生鏈之間的堿基配對保證堿基配錯幾率約為 1/104～ 1/105。 DNA聚合酶的 3’ →5 ’ 外切酶活性的校對功能， 使堿基的錯配幾率又降低 100～ 1000倍。 DNA的損傷修復(fù)系統(tǒng)。 DNA復(fù)制必須具有 高度精確性 ，在大腸桿菌的細(xì)胞DNA復(fù)制中其 錯誤率約為 1/109～ 1/1010， 即每 109～1010個核苷酸才出現(xiàn)一個錯誤，也就是大腸桿菌染色體 DNA復(fù)制 1000～ 10000次才出現(xiàn)一個核苷酸的錯誤。這么高的精確性的保證主要與下列因素有關(guān)： （一）名詞解釋 ； ； (二 )、單選題 1． DNA復(fù)制時，下列哪一種酶是不需要的 A． DNA指導(dǎo)的 DNA聚合酶 B． DNA連接酶 C．拓樸異構(gòu)酶 D．解鏈酶 E．限制性內(nèi)切酶 ，子鏈的合成是 5′→ 3′，另一條鏈 3′→ 5′ B．兩條鏈均為 3′→ 5′ C．兩條鏈均為 5′→ 3′ D．兩條鏈均為連續(xù)合成 E．兩條鏈均為不連續(xù)合成 DNA聚合酶 Ⅰ 的作用主要是 A. DNA復(fù)制 B. C. 切除 RNA引物 D. 岡崎片段的連接
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