章dna的復(fù)制和修復(fù)(2)(編輯修改稿)
2025-05-27 04:27 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 5‘ → 3’ 外切酶活性在 DNA損傷的修復(fù)中可能起著重要作用 。 對岡崎片段 5‘ 末端RNA引物的去除依賴此種外切酶活性 。 DNA聚合酶 Ⅰ 的功能 DNA聚合酶 Ⅱ ： 多亞基酶，聚合作用，聚合活力比 DNA聚合酶 Ⅰ 高；持續(xù)合成 DNA的能力差。該酶缺失時大腸桿菌仍具有 DNA合成能力，推測該酶仍然不是真正的 DNA聚合酶。該酶 具有3’ ? 5’ 外切酶活性 。其功能可能在 修復(fù)紫外光引起的 DNA損傷 中起作用。 DNA聚合酶 Ⅲ 多亞基酶，含 十種亞基 :（ αβγθτδδ ’χΨε ） ， 其中（ αεθ ） 稱為 核心酶 ， β 2稱為夾子，（ γ 2δδ ’χΨ ） 組成 γ復(fù)合物 ，其主要功能是幫助 β 亞基夾住 DNA， 故稱為 夾子裝配器 ，該酶 DNA合成的 持續(xù)能力強 ，主要與該結(jié)構(gòu)有關(guān)。另外，該酶合成 速度大，活性高，缺失時大腸桿菌因 DNA復(fù)制抑制而致死。因此認(rèn)為該酶 DNA的真正復(fù)制酶 。 DNA聚合酶 Ⅰ DNA聚合酶 Ⅱ DNA聚合酶 Ⅲ 結(jié)構(gòu)基因 ＊ 不同種類的亞基數(shù)目 相對分子質(zhì)量 3’ → 5’ 外切酶 5’ → 3’ 外切酶 聚合速度（核苷酸 /分） 持續(xù)合成能力 功能 Pol A 1 103,000 ＋ ＋ 1,0001,200 3200 切除引物，修復(fù) Pol B ≥7 88,000 ＋ － 2,400 1,500 修復(fù) Pol C ≥10 830,000 ＋ － 15,00060,000 ≥500,000 復(fù)制 大腸桿菌三種 DNA聚合酶比較 (三） DNA連接酶：連接 DNA雙鏈中的單鏈切口 作用特點： ? 大腸桿菌和其它細(xì)菌的 DNA連接酶 要求NAD+提供能量；在高等生物和噬菌體中，則要求 ATP提供能量。 T4噬菌體的 DNA連接酶不僅能連接雙鏈 DNA上的粘性切口，而且能連接無粘性末端的平頭雙鏈 DNA。 ? DNA連接酶在 DNA復(fù)制、損傷修復(fù)、重組 等過程中起重要作用。 拓?fù)洚悩?gòu)酶 拓?fù)洚悩?gòu)酶： 催化 DNA的拓?fù)溥B環(huán)數(shù)發(fā)生變化的酶，在 DNA重組修復(fù)和其它轉(zhuǎn)變方面起重要作用。 除連環(huán)數(shù)不同外其它性質(zhì)均相同的 DNA分子稱為 拓?fù)洚悩?gòu)體 ，引起拓?fù)洚悩?gòu)體反應(yīng)的酶稱為 拓?fù)洚悩?gòu)酶 。 (四 )與 DNA合成有關(guān)的其它蛋白因子 (大腸桿菌中 ) 兩類拓?fù)洚悩?gòu)酶作用特點 : 口 解螺旋酶 （解鏈酶） 通過水解 ATP將 DNA兩條鏈打開。 中的 rep蛋白就是解螺旋酶，還有解螺旋酶 I、II、 III。 每解開一對堿基需要水解 2個 ATP分子。 穩(wěn)定 DNA解開的單鏈，防止復(fù)性和保護單鏈部分不被核酸酶水解。 單鏈結(jié)合蛋白： 引發(fā)體可以沿模板鏈 5’ ? 3’ 方向移動 ,具有 識別合成起始位點 的功能，移動到一定位置上即可引發(fā) RNA引物的合成。移動和引發(fā)均需要 ATP提供能量， n’蛋白具有 ATP酶的活力。引發(fā)體的移動與復(fù)制叉移動的方向相同，與 岡崎片段 的合成方向相反。 引物合成酶與引發(fā)前體 ? 引物合成酶： 催化引物 RNA的生成 ? 引發(fā)前體 :它由多種蛋白質(zhì) dnaA、 dnaB、 dnaC、n、 n’、 n’’和 i組成。引發(fā)前體再與引發(fā)酶結(jié)合組裝成引發(fā)體。 蛋白質(zhì) 功能 相對分子量（ 103） 分子 /細(xì)胞 DNA旋轉(zhuǎn)酶（或拓?fù)洚悩?gòu)酶） DNA解鏈酶 單鏈結(jié)合蛋白 引物合成酶 引入或松開超螺旋 使雙鏈 DNA 解鏈 穩(wěn)定單鏈區(qū) 合成 RNA引物 400 65 74 60 50 300 100 （五）、參與 DNA復(fù)制的酶與蛋白因子總覽圖 四、 DNA的復(fù)制過程 復(fù)制的起點與方向 （一）復(fù)制的起始 ? 大腸桿菌雙鏈 環(huán)狀 DNA的復(fù)制（ 一個 復(fù)制起點，雙向復(fù)制） 3? ? 真核細(xì)胞 線狀染色體 DNA的復(fù)制方式（ 多個 復(fù)制起點，雙向復(fù)制） ? 單向 滾環(huán)式 復(fù)制（噬菌體 ?X174DNA— 單鏈環(huán)狀） ? 從復(fù)制原點到終點，組成一個 復(fù)制單位 ，叫 復(fù)制子（基因組獨立進行復(fù)制的單位）。 ? DNA的復(fù)制有特定的起始位點，叫做 復(fù)制原點 。常用ori C(或 o） 表示。大腸桿菌的復(fù)制原點 ori C由 245個 bp構(gòu)成，關(guān)鍵序列含兩組保守的重復(fù)序列：三個 13bp的序列（富含 A、 T的序列）和四個 9bp的序列；許多生物的復(fù)制原點也都是 富含 A、 T的區(qū)段 。 ?復(fù)制原點 由 DnaA蛋白識別， 在原點由 DnaB蛋白（解螺旋酶
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