dna復制-dna-replica(編輯修改稿)
2025-02-08 08:01 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 3)DNA聚合酶的 539?！?39。 外切核酸酶活性 這種酶活性是從 DNA鏈的 5’端向 3’末端水解已配對的核苷酸，本質(zhì)是切斷磷酸二酯鍵，每次能切除 10個核苷酸。因此，這種酶活性在 DNA損傷的修復中可能起重要作用，對完成的 DNA片段去除 5’端的 RNA引物也是必須的。 DNA polⅠ 的 539?！?39。 聚合活性和 539?！?39。 外切酶活性協(xié)同作用，可以使 DNA一條鏈上的切口從 539?！?39。方向移動，這種反應叫做缺刻平移 (nick translation) 2. DNA Polymerase III (DNA聚合酶 III） DNA聚合酶 III由 10個不同的亞基構成 。 其中 α 、 ε和 θ 亞基構成核心酶 。 α 亞基具有 539。→ 339。 聚合酶活性 ， ε 亞基具有 339?！?539。外切活性 ， θ 亞基功能尚不清楚 ， 可能僅僅起結構上的作用 ， 使兩個核心亞基以及其他各輔助亞基裝備在一起 。 DNA聚合酶 III具有兩個拷貝的核心酶 。 兩個拷貝的 β 亞基圍繞 DNA雙螺旋形成一個環(huán)狀的二聚體 。 一旦 β 亞基二聚體與 DNA緊密結合 ， 它的作用就像一個 “ 滑動夾子 ” (sliding clamp)攜帶著核心聚合酶沿著 DNA鏈自由滑動 。 Beta forms a donut shaped ring around the DNA and helps to anchor the holoenzyme to the DNA during replication . By acting as a sliding clamp, beta helps the holoenzyme to replicate long stretches of DNA without falling off the strand (this is called processivity). 聚合酶的第 3個組成部分是由 5個亞基構成的一個所謂的 γ 復合體。 γ 復合體又稱夾子裝載因子（ clamp loader），催化滑動夾打開，并將其結合在引物－模板上。介導 β 亞基與模板－引物雙螺旋的結合。最后，兩個拷貝的 τ 亞基使核心聚合酶形成二聚體。 3．在復制叉處先導鏈和后隨鏈的合成同時進行 RNA引物合成以后 ， DNA的延伸過程便開始了 。 先導鏈被連續(xù)合成 ， 而后隨鏈是不連續(xù)合成的 。 在復制叉上 ， DNA解旋酶在后隨鏈模板上沿著 539?！?339。運動 。DNA聚合酶 III全酶通過 τ 亞基和解旋酶相互作用 ，兩個 τ 亞基分別與一個核心酶結合 ， 其中一個核心酶復制前導鏈 ， 另一個核心酶復制后隨鏈 。 DNA引物酶周期性地與 DNA解旋酶結合 ， 并在后隨鏈模板上合成新的引物 。 當負責后隨鏈合成的核心酶完成一個岡崎片段的合成后 ， 即從滑動夾和 DNA上脫落下來 。 隨后 ， DNA聚合酶 III的滑動夾裝載因子在新形成的模板接頭位置上 ， 組裝新的滑動夾 。 新組裝的滑動夾與核心酶結合 ， 起始下一個岡崎片段的合成 。 新合成的岡崎片段與上一個岡崎片段被一切口分開。岡崎片段的 RNA引物長約 5個核苷酸，而它的 DNA部分長約 1 000～ 2 000 bp。 DNA聚合酶 I與切口結合，并利用其 539。→339。 外切酶活性切去下游岡崎片斷的 RNA部分，與此同時上游的岡崎片斷，這一過程相當于切口平移。當 RNA引物被切除后，由 DNA連接酶催化磷酸二酯鍵的形成，從而把岡崎片斷連接起來形成連續(xù)的不含 RNA序列的后隨鏈。 三、 Termination and segregation 細菌基因組的復制是從單一位點雙向進行的 。 大腸桿菌的復制終止區(qū)域位于
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