【正文】 。答：細菌轉(zhuǎn)化實驗； 噬菌體侵染實驗； 煙草花葉病毒的拆合實驗、非組蛋白的特點。答：組蛋白是一類堿性蛋白質(zhì)，進化上的極端保守性、無組織特異性、肽鏈上氨基酸分布的不對稱性、組蛋白的修飾作用。非組蛋白:非組蛋白是一類酸性蛋白質(zhì)，富含天冬氨酸和谷氨酸，帶負電荷。具有多樣性，組織專一性和種屬多樣性。答：原核生物相同RNA聚合酶催化三種RNA的合成：信使RNA（mRNA）、核糖體RNA（rRNA）及轉(zhuǎn)運RNA（tRNA）。真核生物RNA聚合酶：RNA聚合酶Ｉ，合成核糖體RNA（rRNA）前體45S，當成熟后會成為28S、18S及5,8S核糖體RNA，是將來核糖體的主要RNA部份。RNA聚合酶Ⅱ，合成信使RNA（mRNA）的前體及大部份小核RNA（snRNA）以及微型RNA（microRNA）。RNA聚合酶Ⅲ，合成轉(zhuǎn)運RNA（tRNAs）、rRNA 5S及其他可以在細胞核及原生質(zhì)找到的細小的RNA。?答：首先啟動， RNA聚合酶正確識別DNA模板上的啟動子并形成二元閉合復合物，隨即DNA構象發(fā)生重大變化，結合區(qū)雙鏈解開，最初兩個NTP結合并在這兩個核苷酸之間形成磷酸兒酯鍵，即形成RNA聚合酶、DNA和新生RNA的三元復合物，轉(zhuǎn)錄即自此開始。對于真核生物，除了RNA聚合酶外，還有至少7種輔助因子參與。答：維持DNA復制高度忠實性有四個方面:(1)DNA聚合酶的選擇作用；(2)DNA聚合酶的校正作用；(3)RNA引物的合成與切除是提高DNA復制準確性的重要因素；(4)DNA復制后錯配堿基的修正（光復活修復、剪切修復、重組修復、SOS）。答:（1）乳糖操縱子的組成:大腸桿菌乳糖操縱子含Z,Y,A三個結構基因,分別編碼半乳糖苷酶,透酶和半乳糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶,此外還有一個操縱序列O,一個啟動子P和一個調(diào)節(jié)基因I.（2）阻遏蛋白的負性調(diào)節(jié):沒有乳糖存在時,I基因編碼的阻遏蛋白結合于操縱序列O處,乳糖操縱子處于阻遏狀態(tài),不能合成分解乳糖的三種酶。有乳糖存在時,乳糖作為誘導物誘導阻遏蛋白變構,不能結合于操縱序列,乳糖操縱子的這種調(diào)控機制為可誘導的負調(diào)控.（3）CAP的正性調(diào)節(jié):在啟動子上游有CAP結合位點,當大腸桿菌從以葡萄糖為碳源的環(huán)境轉(zhuǎn)變?yōu)橐匀樘菫樘荚吹沫h(huán)境時,cAMP濃度升高,與CAP結合,使CAP發(fā)生變構,CAP結合于乳糖操縱子啟動序列附近的CAP結合位點,激活RNA聚合酶活性,促進結構基因轉(zhuǎn)錄,調(diào)節(jié)蛋白結合于操縱子后促進結構基因的轉(zhuǎn)錄,對乳糖操縱子實行正調(diào)控,加速合成分解乳糖的三種酶.（4）協(xié)調(diào)調(diào)節(jié):乳糖操縱子中的I基因編碼的阻遏蛋白的負調(diào)控與CAP的正調(diào)控兩種機制,互相協(xié)調(diào),互相制約.。答：核小體是染色體的基本結構單位，由DNA和組蛋白(histone)構成，是染色質(zhì)（染色體）的基本結構單位。由4種組蛋白H2A、H2B、H3和H4， 每一種組蛋白各二個分子，形成一個組蛋白八聚體，約200 bp的DNA分子盤繞在組蛋白八聚體構成的核心結構外面，形成了一個核小體。?它們具有什么功能?答：①mRNA：蛋白質(zhì)合成的模板；②tRNA：蛋白質(zhì)合成的氨基酸運載工具；③核糖體：蛋白質(zhì)合成的場所；④輔助因子：(a)起始因子—參與蛋白質(zhì)合成起始復合物形成；(b)延長因子—肽鏈的延伸作用；(c)釋放因子一終止肽鏈合成并從核糖體上釋放出來。24．簡述細菌染色體基因組結構的一般特點。答：（1）細菌的染色體基因組通常僅由一條環(huán)狀雙鏈DNA分子組成細菌的染色體相對聚集在一起，形成一個較為致密的區(qū)域，稱為類核（nucleoid）。（2）具有操縱子結構，其中的結構基因為多順反子，受同一個調(diào)節(jié)區(qū)的調(diào)節(jié)。數(shù)個操縱子還可以由一個共同的調(diào)節(jié)基因（regulatorygene）即調(diào)節(jié)子（regulon）所調(diào)控。（3）在大多數(shù)情況下，結構基因在細菌染色體基因組中都是單拷貝，但是編碼rRNA的基因往往是多拷貝的。（4）和病毒的基因組相似，不編碼的DNA部份所占比例比真核細胞基因組少得多。（5）具有編碼同工酶的同基因（isogene）（6）在細菌基因組中編碼順序一般不會重疊，即不會出現(xiàn)基因重疊現(xiàn)象。（7）在DNA分子中具有各種功能的識別區(qū)域，這些區(qū)域往往具有特殊的順序，并且含有反向重復順序。（8）在基因或操縱子的終末往往具有特殊的終止順序,它可使轉(zhuǎn)錄終止和RNA聚合酶從DNA鏈上脫落。答：蛋白質(zhì)合成可分四個步驟，以大腸桿菌為例：(1)氨基酸的活化：游離的氨基酸必須經(jīng)過活化以獲得能量才能參與蛋白質(zhì)合成，由氨酰tRNA合成酶催化，消耗1分子ATP，形成氨酰tRNA。(2)肽鏈合成的起始：由起始因子參與，mRNA與30S小亞基、50S大亞基及起始甲酰甲硫氨酰tRNA(fMettRNAt)形成70S起始復合物，整個過程需GTP水解提供能量。(3)肽鏈的延長：起始復合物形成后肽鏈即開始延長。首先氨酰tRNA結合到核糖體的A位，然后，由肽酰轉(zhuǎn)移酶催化與P位的起始氨基酸或肽酰基形成肽鍵，tRNAf或空載tRNA仍留在P位．最后核糖體沿mRNA5’→3’方向移動一個密碼子距離，A位上的延長一個氨基酸單位的肽酰tRNA轉(zhuǎn)移到P位，全部過程需延伸因子EFTu、EFTs，能量由GTP提供。(4)肽鏈合成終止，當核糖體移至終止密碼UAA、UAG或UGA時，終止因子RFRF2識別終止密碼，并使肽酰轉(zhuǎn)移酶活性轉(zhuǎn)為水解作用，將P位肽酰tRNA水解，釋放肽鏈，合成終止。，其基因表達如何變化？答：細胞基因特異性表達是細胞適應環(huán)境變化的重要方式，且轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控是重要一環(huán)。在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控中，一種方式就是不同δ因子的表達和大量使用。大腸桿菌從37度轉(zhuǎn)移到42度時，其基因表達變化為：δ因子表達發(fā)生變化，細胞大量表達δ32，而δ32與δ70識別啟動子序列不同，因而RNApol選擇轉(zhuǎn)錄的基因發(fā)生變化。答：真核基因表達調(diào)控特點：⑴RNA聚合酶有三種，分別負責三種RNA轉(zhuǎn)錄，每種RNA聚合酶由約10個亞基組成；⑵活性染色質(zhì)結構發(fā)生變化；⑶正性調(diào)節(jié)占主導；⑷轉(zhuǎn)錄和翻譯分隔進行；⑸轉(zhuǎn)錄后修飾、加工過程較復雜；⑹轉(zhuǎn)錄起始是基因表達調(diào)控的關鍵環(huán)節(jié)。答：原核生物和真生物mRNA的差別在于可翻譯順反子的數(shù)目，真核生物的mRNA是單個順子。而且，真核生物的mRNA在其3′端有多聚腺嘌呤尾巴poly(A)，而5′端有7甲基鳥嘌呤帽子。真核生物的mRNA尾部區(qū)域有時會攜帶特定的去穩(wěn)定因子。(1)它是DNA還是RNA?(2)它是單鏈還是雙鏈？。答：后續(xù)AAtRNA在EFTu及GTP作用下結合到核糖體A位點；在肽基轉(zhuǎn)移酶催化下,A位點AAtRNA與P位點（n1）肽酰tRNA（n1）生成肽鍵，形成n肽酰tRNAn核糖體向mRNA3‘端移動一個密碼子，將n肽酰tRNAn從A位點進位到P位點，去AAtRNA被擠入E位點，空出A位點，開始新一輪循環(huán)。答：原核生物中，具有特異識別能力的σ亞基識別轉(zhuǎn)錄起始點上游的啟動字同源序列，這樣可以使全酶與啟動子序列結合力增加，形成閉合的二元起始復合物。關鍵的作用時RNA聚合酶與DNA的相互作用。真核生物中，當含TBP的轉(zhuǎn)錄因子與DNA相互作用時，其它轉(zhuǎn)錄因子也結合上來，形成起始復合體，這一復合物在于RNA聚合酶結合，因此主要是RNA與蛋白質(zhì)之間的作用。答：原核生物轉(zhuǎn)錄的終止有兩種機制。一是需要蛋白質(zhì)因子ρ（Rho）的參與，ρ因子能與轉(zhuǎn)錄中的RNA結合，啟動ρ因子ATP酶活性，并向RNA的3’端滑動，劃至RNA附近時，RNA聚合酶暫停聚合活動，使RNA:DNA解鏈分離轉(zhuǎn)錄的RNA釋放種植轉(zhuǎn)錄。另一是在立體系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)的，純化的的RNA聚合酶不需要其他蛋白質(zhì)因子的參與，可使轉(zhuǎn)錄終止，即不依賴ρ因子的轉(zhuǎn)錄終止機制，模板DAN在轉(zhuǎn)錄終止點附近有特殊核苷酸序列可以形成頸環(huán)結構影響RNA聚合酶的構象使轉(zhuǎn)錄暫停，DAN與RNA雙鏈不穩(wěn)定分離，轉(zhuǎn)錄終止?！鏃l件下用如下濃度的Dnase I：0， mg／m1，對雞紅細胞細胞核的染色質(zhì)進行酶切20分鐘。將這些樣品與分子量標記一起上樣于6%變性聚丙烯酰胺凝膠，下圖是凝膠電泳的結果。但由于你混淆了樣品，因此弄不清每個泳道對應的樣品是什么。惟一可以確信的是分子量標記上樣子左邊的泳道，但忘記了各帶對應的分子員大小(圖)。(1)請回憶起在各泳通分別使用的是哪一濃度的Dnase I。(2)請指出分子量標記泳道(用M表示)各帶的大約分子量。(3)描述各泳道所顯示的染色質(zhì)結構特征，證實所記憶的數(shù)字是正確的。（15分）。（15分）。（15分）16 / 16