【正文】 與釋放 2質粒（plasmid）；質粒的檢測方法（211）質粒是一種獨立于染色體外，能進行自主復制的細胞質的遺傳因子，主要存在于各種微生物細胞中。檢測方法：超離心或瓊脂糖凝膠電泳。致育因子(Fertility factor，F(xiàn)因子，附加體)（212）F因子能以游離狀態(tài)和與染色體相結合的狀態(tài)（Hfr）存在于細胞中。F質粒在大腸桿菌的接合作用中起作用，當Hfr菌株上的F因子通過重組回復成自主狀態(tài)時有時可將其相鄰的染色體基因一起切割下來，成為攜帶某一染色體基因的F因子?？剐再|粒（抗性因子、R質粒）（212）帶有R質粒的細菌對集中抗生素或其他藥物（氯霉素、鏈霉素、磺胺、氨芐青霉素、卡那霉素）呈抗性。許多R質粒能使宿主細胞對許多金屬離子呈現(xiàn)抗性（砷、銀、鈷、汞等）代謝質粒（Metabolic plasmid）（213）代謝質粒上攜帶能降解某些基質的酶的基因，含有這類質粒的細菌（假單胞菌）能將復雜的有機化合物（尤其是有毒化合物）降解成能被其作為碳源和能源利用的簡單形式，也成為降解質粒。2基因突變一個基因內(nèi)部遺傳結構或DNA序列的任何改變，包括一對或少數(shù)幾對堿基的缺失、插入或置換，而導致的遺傳變化。（215）2營養(yǎng)缺陷型是微生物遺傳學研究中重要的選擇標記和育種的重要手段，在選擇培養(yǎng)基（一般為基本培養(yǎng)基）上不生長，是一種負選擇標記營養(yǎng)缺陷型實驗步驟（219）①將待分離突變株的原始菌株以合適的稀釋度涂布到野生型菌株和突變株均能生長的主平板上，經(jīng)培養(yǎng)后形成單菌落② 經(jīng)過一消毒的“印章”講平板的菌落分別原位轉移到與院平板相同營養(yǎng)成分的平板a以及不含缺陷型所需要的營養(yǎng)因子的平板b③ 經(jīng)培養(yǎng)后對照觀察兩平板上形成的菌落，如果在a上生長在b上不長，則為所需分離的突變型④在a上挑取b上不長的相應位置的單菌落，并進一步在完全培養(yǎng)基上劃線分離純化。營養(yǎng)缺陷型的表示方法（218）它的基因型常用所需要營養(yǎng)物的前三個英文小寫斜體字母表示，例如hisC、lacZ其中的C、Z表示同一表型中不同基因的突變。形影的表型則用HisC和LacZ表示。2細菌素和抗生素的區(qū)別（213） 細菌素 抗生素 1抑制或殺死近緣甚至同種不同株的細菌 較廣的抗菌譜 2通過核糖體合成多肽 一般是次級代謝物 3結構基因或相關基因一般位于質?；蜣D座子上 一般無直接結構基因相關酶的基因多在染色體上2抗藥性突變型特點、表示方法（219）抗藥性突變是由于基因突變使菌株對某種或某幾種藥物，特別是抗生素，產(chǎn)生抗性的一種突變型。這類突變類型常用所抗藥物的前三個小寫斜體英文字母加上“r”表示，如strr和strs分別表示對鏈霉素的抗性和敏感性。再加有相應抗生素的平板上，只有抗性突變才能生長。所以很容易分離的到。試述用Ames法檢驗致癌劑的理論依據(jù)、方法概要和優(yōu)點（222）許多化學誘變劑能夠引起動物和人的癌癥，利用細菌突變能檢測環(huán)境鎮(zhèn)南關存在的致癌物質是一種簡便、快速、靈敏的方法。利用書傷寒沙門氏菌的組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株的回復突變性能來進行實驗，它在不含組氨酸的培養(yǎng)基中不能（或極少）生長，如果回復突變率因某種化學誘變劑的作用而增加，則這種化學藥物具有致癌性。Ames試驗的準確率達80%~90%3回復突變突變體失去的野生型性狀，可以通過第二次突變得到恢復（222）3細菌的三種水平基因轉移形式（224） 細菌的接合作用：通過細胞的直接接觸而產(chǎn)生的遺傳信息的轉移和重組過程（225）細菌的轉導：由病毒介導的細胞間進行遺傳交換的一種方式（227）遺傳轉化：同源或異源的游離DNA分子（質粒和染色體DNA）被自然或人工感受態(tài)細胞攝取，并得到表達的水平方向的基因轉移過程。3局限性轉導與普遍性轉導的主要區(qū)別（229）①被轉導的基因共價地與噬菌體DNA連接，與噬菌體DNA一起進行復制、包裝以及被導入受體細胞中。②局限性轉導顆粒攜帶特殊的染色體片段并將固定的個別基因導入受體，故稱為局限性轉導。3自然轉化必要條件（229）：受體細胞處于感受態(tài)、外源DNA人工轉化手段（231）：CaCl2 、電穿孔法轉導模型（228）3感受態(tài)細胞（283）理化方法誘導細胞，使其處于最適攝取和容納外來DNA的生理狀態(tài)。3基因組測序（234）測定待測生物基因的所有堿基排列順序，并對遺傳信息進行研究分析3PCR的原理、方法、用途（270）PCR是一種體外快速擴增特定DNA序列的技術 原理： 需要一對寡聚核苷酸作為引物，把各自所要擴增靶DNA片段兩條鏈的末端互補。一個循環(huán)后，新合成的DNA又可作為下一個循環(huán)的模板進行復制，重復下三個動作，DNA片段呈指數(shù)增長。方法：變性 ，高溫變性，雙鏈被解成單鏈 退火，反應系統(tǒng)降溫使引物與模板DNA兩端的堿基配對 延伸，DNA聚合酶使引物3ˊ端向前延伸，合成與模板互補的DNA新鏈用途：1基因的擴增、制備DNA探針、定為誘變、DNA測序 2臨床醫(yī)學 傳染病的檢測、遺傳病的診斷、對癌基因的分析3在法醫(yī)上 鑒別個體、判定親緣關系3什么叫基因工程？試圖示并簡述其基本過程（265）定義： 把分離到的或合成的基因經(jīng)過改造，插入到載體中，然后導入宿主細胞內(nèi)，使其擴增和表達，從而獲得大量基因產(chǎn)物或產(chǎn)生生物新的性狀過程：1基因的分離與合成2 外源基因與載體DNA的體外重組3 重組DNA導入受體細胞4 目的克隆的篩選與鑒定5 控制外源基因的表達附加題一、發(fā)酵工業(yè)中微生物受到噬菌體污染后會出現(xiàn)哪些現(xiàn)象？防治噬菌體的污染有哪些措施？附加題二、什么是效價？什么叫噬菌斑？簡述測定噬菌體效價的雙層平板法？（P71，周德慶）效價：每毫升試樣中所含有的具侵染性的噬菌體粒子數(shù)，又稱噬菌斑形成單位數(shù)或感染中心數(shù)。噬菌斑：在涂布有敏感宿主細胞的固體培養(yǎng)基表面，若接種上相應噬菌體的稀釋液，其中每一噬菌體粒子由于先侵染和裂解一個細胞，然后以此為中心，再反復侵染和裂解周圍大量的細胞，就在菌苔上形成一個具有一定形狀、大小、邊緣和透明度的噬菌斑，可用于純種分離和計數(shù)。雙層平板法：底層平板—（~2%瓊脂培養(yǎng)基7~8mL） ] [上層培養(yǎng)基（~1%瓊脂培養(yǎng)基3mL）] ]37℃，10余h,計數(shù)噬菌斑上層平板—[宿主菌懸液（） ] 混勻 ] [噬菌體試樣（） ]預先分別配制含2%和1%瓊脂的底層培養(yǎng)基和上層培養(yǎng)基。先用底層…在培養(yǎng)皿上澆一層平板，凝固后，把預先融化冰冷卻到45176。C以下，加有較濃的敏感宿主和一定體積待測噬菌體樣品的上層培養(yǎng)基，搖勻，立即倒在底層…上鋪平待凝，37℃下保溫。經(jīng)10余h后即可對噬菌斑計數(shù)、思考題一、請設計一實驗來決定在一種特定的細菌中發(fā)生的遺傳轉移過程是轉化、轉導還是接合？說明每一種的預期結果246設想有下列條件和材料可以利用：⑴合適的突變株和選擇培養(yǎng)基；⑵DNas（一種降解裸露DNA分子的酶）；⑶2種濾板：一種能夠持留細菌和細菌病毒，但不能持留游離的DNA分子；另一種濾板只能持留細菌；⑷一種可以插入濾板使其分隔成2個空間的玻璃容器思考題二、根據(jù)突變的光復活修復作用、原理，你認為在進行紫外線誘變處理時，應注意什么？為了使被誘變的細胞能均勻地受到紫外線照射，你講如何做？