微生物學(xué)復(fù)習(xí)資料整理匯總-資料下載頁(yè)
2025-04-16 23:19本頁(yè)面
【正文】 與釋放 2質(zhì)粒（plasmid）；質(zhì)粒的檢測(cè)方法（211）質(zhì)粒是一種獨(dú)立于染色體外，能進(jìn)行自主復(fù)制的細(xì)胞質(zhì)的遺傳因子，主要存在于各種微生物細(xì)胞中。檢測(cè)方法：超離心或瓊脂糖凝膠電泳。致育因子(Fertility factor，F(xiàn)因子，附加體)（212）F因子能以游離狀態(tài)和與染色體相結(jié)合的狀態(tài)（Hfr）存在于細(xì)胞中。F質(zhì)粒在大腸桿菌的接合作用中起作用，當(dāng)Hfr菌株上的F因子通過(guò)重組回復(fù)成自主狀態(tài)時(shí)有時(shí)可將其相鄰的染色體基因一起切割下來(lái)，成為攜帶某一染色體基因的F因子?？剐再|(zhì)粒（抗性因子、R質(zhì)粒）（212）帶有R質(zhì)粒的細(xì)菌對(duì)集中抗生素或其他藥物（氯霉素、鏈霉素、磺胺、氨芐青霉素、卡那霉素）呈抗性。許多R質(zhì)粒能使宿主細(xì)胞對(duì)許多金屬離子呈現(xiàn)抗性（砷、銀、鈷、汞等）代謝質(zhì)粒（Metabolic plasmid）（213）代謝質(zhì)粒上攜帶能降解某些基質(zhì)的酶的基因，含有這類質(zhì)粒的細(xì)菌（假單胞菌）能將復(fù)雜的有機(jī)化合物（尤其是有毒化合物）降解成能被其作為碳源和能源利用的簡(jiǎn)單形式，也成為降解質(zhì)粒。2基因突變一個(gè)基因內(nèi)部遺傳結(jié)構(gòu)或DNA序列的任何改變，包括一對(duì)或少數(shù)幾對(duì)堿基的缺失、插入或置換，而導(dǎo)致的遺傳變化。（215）2營(yíng)養(yǎng)缺陷型是微生物遺傳學(xué)研究中重要的選擇標(biāo)記和育種的重要手段，在選擇培養(yǎng)基（一般為基本培養(yǎng)基）上不生長(zhǎng)，是一種負(fù)選擇標(biāo)記營(yíng)養(yǎng)缺陷型實(shí)驗(yàn)步驟（219）①將待分離突變株的原始菌株以合適的稀釋度涂布到野生型菌株和突變株均能生長(zhǎng)的主平板上，經(jīng)培養(yǎng)后形成單菌落② 經(jīng)過(guò)一消毒的“印章”講平板的菌落分別原位轉(zhuǎn)移到與院平板相同營(yíng)養(yǎng)成分的平板a以及不含缺陷型所需要的營(yíng)養(yǎng)因子的平板b③ 經(jīng)培養(yǎng)后對(duì)照觀察兩平板上形成的菌落，如果在a上生長(zhǎng)在b上不長(zhǎng)，則為所需分離的突變型④在a上挑取b上不長(zhǎng)的相應(yīng)位置的單菌落，并進(jìn)一步在完全培養(yǎng)基上劃線分離純化。營(yíng)養(yǎng)缺陷型的表示方法（218）它的基因型常用所需要營(yíng)養(yǎng)物的前三個(gè)英文小寫斜體字母表示，例如hisC、lacZ其中的C、Z表示同一表型中不同基因的突變。形影的表型則用HisC和LacZ表示。2細(xì)菌素和抗生素的區(qū)別（213） 細(xì)菌素 抗生素 1抑制或殺死近緣甚至同種不同株的細(xì)菌 較廣的抗菌譜 2通過(guò)核糖體合成多肽 一般是次級(jí)代謝物 3結(jié)構(gòu)基因或相關(guān)基因一般位于質(zhì)粒或轉(zhuǎn)座子上 一般無(wú)直接結(jié)構(gòu)基因相關(guān)酶的基因多在染色體上2抗藥性突變型特點(diǎn)、表示方法（219）抗藥性突變是由于基因突變使菌株對(duì)某種或某幾種藥物，特別是抗生素，產(chǎn)生抗性的一種突變型。這類突變類型常用所抗藥物的前三個(gè)小寫斜體英文字母加上“r”表示，如strr和strs分別表示對(duì)鏈霉素的抗性和敏感性。再加有相應(yīng)抗生素的平板上，只有抗性突變才能生長(zhǎng)。所以很容易分離的到。試述用Ames法檢驗(yàn)致癌劑的理論依據(jù)、方法概要和優(yōu)點(diǎn)（222）許多化學(xué)誘變劑能夠引起動(dòng)物和人的癌癥，利用細(xì)菌突變能檢測(cè)環(huán)境鎮(zhèn)南關(guān)存在的致癌物質(zhì)是一種簡(jiǎn)便、快速、靈敏的方法。利用書(shū)傷寒沙門氏菌的組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的回復(fù)突變性能來(lái)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，它在不含組氨酸的培養(yǎng)基中不能（或極少）生長(zhǎng)，如果回復(fù)突變率因某種化學(xué)誘變劑的作用而增加，則這種化學(xué)藥物具有致癌性。Ames試驗(yàn)的準(zhǔn)確率達(dá)80%~90%3回復(fù)突變突變體失去的野生型性狀，可以通過(guò)第二次突變得到恢復(fù)（222）3細(xì)菌的三種水平基因轉(zhuǎn)移形式（224） 細(xì)菌的接合作用：通過(guò)細(xì)胞的直接接觸而產(chǎn)生的遺傳信息的轉(zhuǎn)移和重組過(guò)程（225）細(xì)菌的轉(zhuǎn)導(dǎo)：由病毒介導(dǎo)的細(xì)胞間進(jìn)行遺傳交換的一種方式（227）遺傳轉(zhuǎn)化：同源或異源的游離DNA分子（質(zhì)粒和染色體DNA）被自然或人工感受態(tài)細(xì)胞攝取，并得到表達(dá)的水平方向的基因轉(zhuǎn)移過(guò)程。3局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)與普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)的主要區(qū)別（229）①被轉(zhuǎn)導(dǎo)的基因共價(jià)地與噬菌體DNA連接，與噬菌體DNA一起進(jìn)行復(fù)制、包裝以及被導(dǎo)入受體細(xì)胞中。②局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)顆粒攜帶特殊的染色體片段并將固定的個(gè)別基因?qū)胧荏w，故稱為局限性轉(zhuǎn)導(dǎo)。3自然轉(zhuǎn)化必要條件（229）：受體細(xì)胞處于感受態(tài)、外源DNA人工轉(zhuǎn)化手段（231）：CaCl2 、電穿孔法轉(zhuǎn)導(dǎo)模型（228）3感受態(tài)細(xì)胞（283）理化方法誘導(dǎo)細(xì)胞，使其處于最適攝取和容納外來(lái)DNA的生理狀態(tài)。3基因組測(cè)序（234）測(cè)定待測(cè)生物基因的所有堿基排列順序，并對(duì)遺傳信息進(jìn)行研究分析3PCR的原理、方法、用途（270）PCR是一種體外快速擴(kuò)增特定DNA序列的技術(shù) 原理： 需要一對(duì)寡聚核苷酸作為引物，把各自所要擴(kuò)增靶DNA片段兩條鏈的末端互補(bǔ)。一個(gè)循環(huán)后，新合成的DNA又可作為下一個(gè)循環(huán)的模板進(jìn)行復(fù)制，重復(fù)下三個(gè)動(dòng)作，DNA片段呈指數(shù)增長(zhǎng)。方法：變性 ，高溫變性，雙鏈被解成單鏈 退火，反應(yīng)系統(tǒng)降溫使引物與模板DNA兩端的堿基配對(duì) 延伸，DNA聚合酶使引物3ˊ端向前延伸，合成與模板互補(bǔ)的DNA新鏈用途：1基因的擴(kuò)增、制備DNA探針、定為誘變、DNA測(cè)序 2臨床醫(yī)學(xué) 傳染病的檢測(cè)、遺傳病的診斷、對(duì)癌基因的分析3在法醫(yī)上 鑒別個(gè)體、判定親緣關(guān)系3什么叫基因工程？試圖示并簡(jiǎn)述其基本過(guò)程（265）定義： 把分離到的或合成的基因經(jīng)過(guò)改造，插入到載體中，然后導(dǎo)入宿主細(xì)胞內(nèi)，使其擴(kuò)增和表達(dá)，從而獲得大量基因產(chǎn)物或產(chǎn)生生物新的性狀過(guò)程：1基因的分離與合成2 外源基因與載體DNA的體外重組3 重組DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞4 目的克隆的篩選與鑒定5 控制外源基因的表達(dá)附加題一、發(fā)酵工業(yè)中微生物受到噬菌體污染后會(huì)出現(xiàn)哪些現(xiàn)象？防治噬菌體的污染有哪些措施？附加題二、什么是效價(jià)？什么叫噬菌斑？簡(jiǎn)述測(cè)定噬菌體效價(jià)的雙層平板法？（P71，周德慶）效價(jià)：每毫升試樣中所含有的具侵染性的噬菌體粒子數(shù)，又稱噬菌斑形成單位數(shù)或感染中心數(shù)。噬菌斑：在涂布有敏感宿主細(xì)胞的固體培養(yǎng)基表面，若接種上相應(yīng)噬菌體的稀釋液，其中每一噬菌體粒子由于先侵染和裂解一個(gè)細(xì)胞，然后以此為中心，再反復(fù)侵染和裂解周圍大量的細(xì)胞，就在菌苔上形成一個(gè)具有一定形狀、大小、邊緣和透明度的噬菌斑，可用于純種分離和計(jì)數(shù)。雙層平板法：底層平板—（~2%瓊脂培養(yǎng)基7~8mL） ] [上層培養(yǎng)基（~1%瓊脂培養(yǎng)基3mL）] ]37℃，10余h,計(jì)數(shù)噬菌斑上層平板—[宿主菌懸液（） ] 混勻 ] [噬菌體試樣（） ]預(yù)先分別配制含2%和1%瓊脂的底層培養(yǎng)基和上層培養(yǎng)基。先用底層…在培養(yǎng)皿上澆一層平板，凝固后，把預(yù)先融化冰冷卻到45176。C以下，加有較濃的敏感宿主和一定體積待測(cè)噬菌體樣品的上層培養(yǎng)基，搖勻，立即倒在底層…上鋪平待凝，37℃下保溫。經(jīng)10余h后即可對(duì)噬菌斑計(jì)數(shù)、思考題一、請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一實(shí)驗(yàn)來(lái)決定在一種特定的細(xì)菌中發(fā)生的遺傳轉(zhuǎn)移過(guò)程是轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)還是接合？說(shuō)明每一種的預(yù)期結(jié)果246設(shè)想有下列條件和材料可以利用：⑴合適的突變株和選擇培養(yǎng)基；⑵DNas（一種降解裸露DNA分子的酶）；⑶2種濾板：一種能夠持留細(xì)菌和細(xì)菌病毒，但不能持留游離的DNA分子；另一種濾板只能持留細(xì)菌；⑷一種可以插入濾板使其分隔成2個(gè)空間的玻璃容器思考題二、根據(jù)突變的光復(fù)活修復(fù)作用、原理，你認(rèn)為在進(jìn)行紫外線誘變處理時(shí)，應(yīng)注意什么？為了使被誘變的細(xì)胞能均勻地受到紫外線照射，你講如何做？
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