【正文】 其布置應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的生產(chǎn)及工藝關(guān)鍵操作區(qū)設(shè)置。一般高效過濾器裝在末端（天花板）的HVAC系統(tǒng)及在層流罩下只需在工作區(qū)（～1m處）設(shè)置測(cè)點(diǎn)即可；而高效過濾器裝在空調(diào)器內(nèi)的及亞高效過濾器（效率為≥95%）的HVAC系統(tǒng)除在工作區(qū)設(shè)置測(cè)點(diǎn)外，還需在每個(gè)送風(fēng)口處（）設(shè)置測(cè)點(diǎn)。（3）懸浮粒子潔凈度測(cè)定的最小采樣量和最少采樣點(diǎn)數(shù)目參見《粒子測(cè)試方法》的規(guī)定，國(guó)外某些公司做法見表2.（4）懸浮粒子潔凈度級(jí)別的結(jié)果評(píng)定參見《粒子測(cè)試方法》的兩個(gè)條件?；钗⑸餃y(cè)定活微生物測(cè)定的目的是確定浮游的生物微粒濃度和生物微粒沉降密度，以此來判斷潔凈室是否達(dá)到規(guī)定的潔凈度。因此活微生物的測(cè)定有浮游菌和沉降菌兩種測(cè)定方法。細(xì)菌通?？床灰?，將它們采集或沉降到培養(yǎng)基中培養(yǎng)。細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，由一個(gè)或幾個(gè)細(xì)菌繁殖而成的一細(xì)菌團(tuán)稱為CFU（菌落形成單元數(shù)），亦稱菌落數(shù)。浮游菌用計(jì)數(shù)CFU/L或CFU/m3表示，沉降菌用沉降濃度CFU/皿、min表示。我國(guó)《GMP》采用了與歐州共同體GMP一樣的浮游菌標(biāo)準(zhǔn)（CFU/m3）。由于我國(guó)用于檢測(cè)浮游菌濃度的儀器還不普遍,許多企業(yè)還是采用沉隆菌的測(cè)試方法,所以這兩種方法并存,浮游菌與沉降菌的關(guān)系存在著以下近似公式：Ng=NVSFt 式中： Ng在f面積上的細(xì)菌沉降數(shù)（CFU）； N空氣中的浮游菌濃度（CFU/cm2）； f沉降面積（cm2）； VS含菌粒子沉降速度（cm/s）； T沉降時(shí)間（S）。 （1）浮游菌的測(cè)定 浮游菌的測(cè)定可以參見國(guó)家醫(yī)藥管理局即將頒發(fā)的待業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和潔凈區(qū)中浮游菌的測(cè)試方法》（以下簡(jiǎn)稱《浮游菌的測(cè)試方法》），基本內(nèi)容如下：A、浮游菌的測(cè)定是通過收集懸浮在空氣中的生物性微粒子，通過專門的培養(yǎng)基，在適應(yīng)的生長(zhǎng)條件下，讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，從而判定潔凈環(huán)境中單位體積空氣中菌落數(shù)的多少。B、浮游菌測(cè)定需有專門的采樣器、真空抽氣泵等設(shè)備，浮游菌采樣器常用撞擊法中的狹縫式采樣器。C、采用的浮游菌采樣器必須要有流量計(jì)和定時(shí)器，并嚴(yán)格按儀器說明書的要求定期進(jìn)行校驗(yàn)和操作。D、浮游菌測(cè)定的采樣點(diǎn)及數(shù)目與懸浮粒子測(cè)定相同，即在同懸浮粒子相同的測(cè)定點(diǎn)采樣。E、浮游菌潔凈度測(cè)定的最小采樣量和最少采樣點(diǎn)數(shù)目參見《浮游菌測(cè)試方法》的規(guī)定。國(guó)外某些做法見表3。F、浮游菌潔凈度的結(jié)果評(píng)定參見《浮游菌測(cè)試方法》的規(guī)定。（2）沉降菌的測(cè)定沉降菌是用暴露法收集降落在培養(yǎng)皿中的活生物性粒子，然后加以培養(yǎng)，繁殖后加以計(jì)數(shù)得到的，其沉降濃度表示CFU/皿、min。此外用擦試方法收集培養(yǎng)的建筑物表面（墻面、地板、天花板等）以及操作人員衣著上的細(xì)菌亦屬于沉降菌測(cè)試的內(nèi)容。沉降菌的測(cè)定可參見國(guó)家醫(yī)藥管理局即將頒發(fā)的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和潔凈區(qū)中沉降菌的測(cè)試方法》（以下簡(jiǎn)稱《沉降菌測(cè)試方法》），其基本內(nèi)容如下：A、沉降菌測(cè)定的設(shè)備主要是φ90180。150玻璃培養(yǎng)皿和各種培養(yǎng)基（常用普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基）。B、沉降菌測(cè)定其培養(yǎng)皿應(yīng)布置在有代表性的地方和氣流擾動(dòng)最小的地方，其最少采樣點(diǎn)數(shù)目見表4。C、采樣方法及培養(yǎng)：將培養(yǎng)皿按要求放置后，打開平皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露30分鐘后，將平皿蓋蓋上，然后在30～35℃的條件下（可用恒溫培養(yǎng)箱）培養(yǎng)48小時(shí)后計(jì)數(shù)。D、結(jié)果計(jì)算；Σmi M=———— N 式中：M平均菌落數(shù)(CFU)； Mi1，2，3，……n號(hào)平皿菌落數(shù)； n平皿總數(shù)。表4 最少采樣點(diǎn)數(shù)目面積潔凈度級(jí)別m210010000100000102~323104222082240164210040103200802064001604013100040010032200080020063注：表中的面積，對(duì)于單向流潔凈室，是指送風(fēng)面積 ；對(duì)于亂流潔凈實(shí)是指房間的面積。在滿足最少測(cè)點(diǎn)數(shù)的同時(shí)，還要滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)，如表28所示。不論面積大小，作為一個(gè)被測(cè)對(duì)象，都應(yīng)該滿足這個(gè)要求.表28 最少培養(yǎng)皿數(shù)潔凈度級(jí)別所需 90mm培養(yǎng)皿數(shù)（）100141000021000002F、結(jié)果評(píng)定，見表29。表29 沉降菌合格界限潔凈度級(jí)別沉降菌落數(shù)(CFU/皿)10010000100000平均〈1平均〈3平均〈10（一）表21 國(guó)內(nèi)及國(guó)外環(huán)境驗(yàn)證時(shí)某些做法對(duì)最小采樣點(diǎn)數(shù)目的規(guī)定（二）懸浮粒子浮游菌驗(yàn)證測(cè)定時(shí)的采樣量 最少采樣量表凈化級(jí)別懸浮粒子浮游菌工作區(qū)送風(fēng)口工作區(qū)送風(fēng)口每個(gè)采樣點(diǎn)lft3采樣量的數(shù)目每點(diǎn)采樣量m3100102210015221001522（三）、懸浮粒子和浮游菌結(jié)果判斷表22 國(guó)內(nèi)與國(guó)外環(huán)境驗(yàn)證時(shí)某些做法的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)潔凈度級(jí)別《懸浮粒子測(cè)試方法》國(guó)外某些驗(yàn)證時(shí)做法《浮游菌測(cè)試方法》懸浮粒子數(shù)p/m3/（p/ft3）總懸浮粒子數(shù)平均值 p/m3/（p/ft3）總浮游菌濃度均值CFU/3平浮游菌濃度平均值 CFU/3CFU/3驗(yàn)證日常監(jiān)測(cè)1003500(100)0875(25)11210035000(10000)2000(57)87500(2500)2220100350000010000020000(570)875000(25000)20201000(1)此表為動(dòng)態(tài)時(shí)的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn).(2)靜態(tài)測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)沒有說明.(3)對(duì)單向流,測(cè)試在HVAC系統(tǒng)至少運(yùn)行10min后進(jìn)行.(1)靜枋測(cè)試狀態(tài),房間中只有一個(gè)測(cè)試人員.(2)高效過濾器DOP栓漏試驗(yàn)在過去的一年中完成并有記錄.(3)對(duì)單向流,測(cè)試在HVAC系統(tǒng)至少運(yùn)行2h后進(jìn)行。對(duì)非單向流,至少在運(yùn)行30min后進(jìn)行.(4)浮游菌測(cè)試應(yīng)在房間消毒后進(jìn)行.十二、潔凈室的消毒方法醫(yī)藥工業(yè)潔凈室與其他工業(yè)潔凈室有所不同，特別是無菌生產(chǎn)，不僅要控制空氣中一般的懸浮狀態(tài)的氣溶膠粒子，還要控制活微生物數(shù)，即提供所謂的“無菌”環(huán)境（無菌室）。當(dāng)然“無菌”是相對(duì)的，它可以用無菌保證率STA（Sterilty Assurance Level）來表示。醫(yī)藥工業(yè)上獲得無菌空氣的方法大致可以分為兩大類：滅菌利用加熱（干熱、濕熱）、化學(xué)試劑（如甲醛、環(huán)氧已烷）、臭氧、射線（如紫外燈照射）等方法，使空氣中細(xì)菌的蛋白質(zhì)變性以滅菌。除菌利用過濾介質(zhì)（如各類空氣過濾器、高效過濾器）或靜電除塵法將空氣中塵埃、雜菌、予以捕集截留。事實(shí)上，工業(yè)應(yīng)用的除菌方法往往也不是單一的，而是兩者的結(jié)合，對(duì)于流動(dòng)的空氣（如HVAC系統(tǒng)、壓縮空氣）常采用過濾介質(zhì)除菌，而對(duì)于靜止環(huán)境內(nèi)空氣，常采用滅菌法，用于無菌室、培養(yǎng)室、傳遞窗、衣服等的滅菌。利用過濾介質(zhì)除菌我們已在前面HVAC系統(tǒng)驗(yàn)證中作過介紹。按理說，順HVAC系統(tǒng)中，送入經(jīng)高效過濾器過濾的空氣，可以使房間的活微生物數(shù)控制在規(guī)定的范圍內(nèi)。其實(shí)不然，實(shí)際生產(chǎn)時(shí)，由于機(jī)器的運(yùn)行、人員的進(jìn)出，建筑物的表面均會(huì)產(chǎn)生塵粒，從而滋生細(xì)菌并極易再吹落，特別是人員的污染幾乎是唯一的細(xì)菌來源，一個(gè)人每小時(shí)約散發(fā)1000只死皮細(xì)胞（等價(jià)于20μm大小的粒子）因此無菌室的室內(nèi)建筑材料、潔凈服裝的洗滌、晾干、包裝必須在潔凈環(huán)境中進(jìn)行；無菌衣要經(jīng)高溫消毒滅菌；人員、設(shè)備、儀器進(jìn)入無菌室應(yīng)伯嚴(yán)格的消毒滅菌處理；（人手需用消毒藥物或噴灑）；定期進(jìn)行室內(nèi)消毒滅菌操作。各國(guó)GMP均對(duì)潔凈室中空氣浮游菌及表面細(xì)菌有嚴(yán)格的規(guī)定，如USP建議潔凈環(huán)境中的細(xì)菌允許值如表6所示：由于藥品生產(chǎn)時(shí)，在潔凈室的地面、墻面、頂棚、機(jī)器、人體衣服表面可能有活微生物粒子存在，當(dāng)溫濕度合適時(shí)，細(xì)菌即在這些表面繁殖，并不時(shí)被氣流吹散到室內(nèi)。因此潔凈室（特別是無菌室）一般不按排三班生產(chǎn)，每天必須有足夠時(shí)間用于清潔、消毒。表6 細(xì)菌允許值潔凈級(jí)別浮游菌CFU/inch3表面細(xì)菌CFU/inch2人體細(xì)菌CFU/inch2手套其他10013351000及1000055/10（地板）510100000或以上8720/30（地板）1530消毒的方法常見的表面消毒滅菌方法有紫外燈照射，臭氧接觸，過氧已酸、環(huán)氧已烷等氣體熏蒸、消毒劑噴灑等。清潔和滅菌是驅(qū)除微生物污染的主要手段，但必須保證清潔及滅菌的徹底性，因此藥品生產(chǎn)企業(yè)必須制定清潔與滅菌規(guī)程，并定期進(jìn)行驗(yàn)證，以確證清潔與滅菌劑及濃度、消毒設(shè)備、消毒時(shí)間以及最后的環(huán)境監(jiān)測(cè)。A、紫外燈消毒滅菌紫外線滅菌燈（簡(jiǎn)稱紫外燈）在其它消毒方法未使用之前，為藥品生產(chǎn)企業(yè)普遍采用，主要用在潔凈工作臺(tái)、層流罩、物料傳遞窗、風(fēng)淋室乃至整個(gè)潔凈房間的消毒，由于目前已有了其它好的滅菌方法，潔凈室內(nèi)是否安裝紫外線殺菌力最強(qiáng)，紫外線波長(zhǎng)為136~390nm,，但紫外線穿透力極弱且存在照射死角，只適用于表面殺菌；B、臭氧消毒臭氧廣泛存在于自然界中，雷雨過后的空氣有一種“清新”感覺，是因?yàn)榭罩蟹烹姰a(chǎn)生臭氧，消滅了空氣中的細(xì)菌和微生物凈化了空氣。人們?cè)谒闪种幸矔?huì)嗅到臭氧的氣味，是因?yàn)樗蓸渲趸a(chǎn)生臭氧。地球大氣圈的平流層中，由于受太陽紫外線的強(qiáng)烈照射以及宇宙射線的激發(fā)而產(chǎn)生臭氧，這里臭氧集中形成一個(gè)臭氧層，它象一把保護(hù)傘擋住太陽的紫外線和宇宙射線使地球的生物免危害?？茖W(xué)研究表明，臭氧具有強(qiáng)烈的殺菌消毒作用。臭氧（O3）的消毒原理是：臭氧在常溫、常壓下分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，很快自行分解成氧（O2）和單個(gè)氧原子（O），后者具有很強(qiáng)的活性，對(duì)細(xì)菌有極強(qiáng)的氧化作用，臭氧氧化分解了細(xì)菌內(nèi)部氧化葡萄糖所必須的酶，從而破壞其細(xì)胞膜，將它殺死。多余的氧原子則會(huì)自行重新結(jié)合成為普遍氧分子（O2），不存在任何有毒殘留物，故稱無污染消毒劑。它不但對(duì)各種細(xì)菌（包括肝炎病毒、大腸桿菌、綠濃桿菌及雜菌等）有極強(qiáng)的殺滅能力，而且對(duì)殺死霉菌也很有效。生產(chǎn)臭氧的原料主要是空氣和電能，一般通過高頻氧發(fā)生器（電子消毒器）來獲得。消毒時(shí)，直接將臭氧發(fā)生器置于房間中即可，空氣中使用臭氧消毒的濃度很低，只有幾個(gè)PPm，可根據(jù)房間體積及臭氧發(fā)生器的臭氧產(chǎn)量來計(jì)算得到。臭氧消毒效果的驗(yàn)證中需確認(rèn)和校正的臭氧發(fā)生器技術(shù)指標(biāo)主要有：臭氧產(chǎn)量、臭氧濃度和時(shí)間定時(shí)器，并通過驗(yàn)證檢查細(xì)菌數(shù)來確定消毒時(shí)間。C、氣體滅菌對(duì)環(huán)境空氣的滅菌傳統(tǒng)做法是采用某種消毒液在一定條件下讓其蒸發(fā)產(chǎn)生氣體來熏蒸。消毒液有甲醛、環(huán)氧已烷、過氧已酸、石碳酸和乳酸的混合液等。在所有的消毒液中，甲醛是最常用的，當(dāng)相對(duì)濕度65%以上，溫度在24～40℃時(shí)，甲醛氣體的消毒效果最好，但采用過多的甲醛，會(huì)因聚合而析出白色粉末附著在建筑物或設(shè)備表面 ，顧應(yīng)采用合理的消毒方法來進(jìn)行。甲醛消毒滅菌的氣體發(fā)生量、熏蒸時(shí)間、換氣時(shí)間等應(yīng)以驗(yàn)證結(jié)果來最后確定。D、消毒劑滅菌潔凈室的墻面、天花板、門、窗、機(jī)器設(shè)備、儀器、操作臺(tái)、車、桌、椅等表面以及人體雙手（手套）在環(huán)境驗(yàn)證及日常生產(chǎn)時(shí)，應(yīng)定期清潔并用消毒劑噴灑。常見的消毒劑有民丙醇（75%）、已醇（75%）、戍二醛、潔爾滅等。無菌室消毒我國(guó)藥廠傳統(tǒng)的方法是用甲醛熏蒸，國(guó)外藥廠認(rèn)為甲醛對(duì)人體有一定的危害，現(xiàn)普扁采用戍二醛（glutaraldehyde）噴灑，其方法是將戍二醛放在帶有時(shí)間控制的自動(dòng)噴霧器中，在下班后或周未，無菌室內(nèi)無人時(shí)自動(dòng)噴灑，其噴灑量可以調(diào)節(jié)，時(shí)間可以設(shè)定，在噴灑期間空調(diào)系統(tǒng)應(yīng)停止工作。無菌室用的消毒劑必須在層流工作臺(tái)中。十三、其它在制藥企業(yè)潔凈廠房建設(shè)中，只有學(xué)習(xí)掌握了政策法規(guī)性文件（99版《GMP》規(guī)范、《潔凈廠房設(shè)計(jì)規(guī)范》、《潔凈室施工驗(yàn)收規(guī)范》等）才能合理高效地實(shí)現(xiàn)建設(shè)目標(biāo)，了解更多的制藥生產(chǎn)中的特殊要求和凈化方面的知識(shí)將有助于服務(wù)于潔凈廠房的建設(shè)一次通過國(guó)家GMP認(rèn)證。本文僅供各位學(xué)友交流指正，在編寫中參考了以下文獻(xiàn)，亦誠(chéng)推薦給各位學(xué)友?！端幤飞a(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（1999年修訂） 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局《藥品GMP實(shí)施與認(rèn)證》 李 鈞 主編《空氣調(diào)節(jié)設(shè)計(jì)手冊(cè)》 電子工業(yè)部第十一設(shè)計(jì)研究院 主編《空氣潔凈技術(shù)原理》 許鐘麟 主編《制藥工業(yè)的潔凈與空調(diào)》 涂光備 主編《潔凈室設(shè)計(jì)》 許鐘麟 主編《HVAC暖通空調(diào)設(shè)計(jì)指南》 陸耀慶 主編 ３４ / 35