elisa原理和分類附圖解-資料下載頁
2025-04-07 05:35本頁面
【正文】 gM抗體不能結合到固相上。因此如用抗人IgM作為二抗，間接測定IgM抗體，必須先將標本用A蛋白或抗IgG抗體處理，以除去IgG的干擾。在臨床檢驗中測定抗體IgM時多采用捕獲包被法。先用抗人IgM抗體包被固相，以捕獲血清標本中的IgM（其中包括針對抗原的特異性IgM抗體和非特異性的IgM）。然后加入抗原，此抗原僅與特異性IgM相結合。繼而加酶標記針對抗原的特異性抗體。再與底物作用，呈色即與標本中的IgM成正相關。此法常用于病毒性感染的早期診斷。甲型肝炎病毒（HAV）抗體的檢測模式見圖27.類風濕因子（RF）同樣能干擾捕獲包被法測定IgM抗體，導致假陽性反應。因此中和IgG的間接法近來頗受青睞，用這類試劑檢測抗CMV IgGM和抗弓形蟲IgM抗體已獲成功。（七）ABSELISA法ABS為親和素(avidin)生物素(biotin)系統(tǒng)(system)的略語。親和素是一種糖蛋白，分子量60000，每個分子由4個能和生物素結合的亞基組成。生物素為小分子化合物，標記方法頗為簡便。生物素與親和素的結合具有很強的特異性，其親和力較抗原抗體反應大得多，兩者一經(jīng)結合就極為穩(wěn)定。由于一個親和素可與4個生物素分子結合，因此如把ABS與ELISA法可分為酶標記親和素生物素（LAB）法和橋聯(lián)親和素生物素（ABC）法兩種類型。兩者均以生物素標記的抗體（或抗原）代替原ELISA系統(tǒng)中的酶標抗體（抗原）。在LAB中，固相生物素先與不標記的親和素反應，然后再加酶標記的生物素以進一步提高敏感度。在早期，親和素從蛋清中提取，這種卵親和素為堿性糖蛋白，與聚苯乙烯載體的吸附性很強，用于ELISA中可使本底增高。從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素則無此缺點，在ELISA應用中有替代前者的趨勢。由于ABSELISA較普通ELISA多用了兩種試劑，增加了操作步驟，在臨床檢驗中ABSELISA應用不多。科研項目中檢測微量的成分如細胞因子常采用本法。
公司管理相關推薦
鄂ICP備17016276號-1