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第六章沉淀反應-資料下載頁

2024-10-24 14:04本頁面

【導讀】經典的抗原抗體反應相同。絮狀沉淀試驗是將抗原與相應抗體混合,形成肉眼可見的絮狀沉淀物。方法受抗原抗體比例的影響非常明顯。應用于測定抗原抗體反應的最適比例。大小的抗原抗體復合物,使反應液體出現濁度。圍是否出現沉淀環(huán)。標準曲線,質控血清。結果與真實含量不符。單克隆抗體;多克隆抗體;上排為5個不同濃度的參考品;徑為3mm,孔間距在3~5mm之間,孔,孔徑3mm,孔距6mm,于陰極側孔內加待測血清,件3~4mA/cm,30min~1h。無沉淀線出現則表明無相。間,說明兩者比例較適合。淀峰,繪制標準曲線,求出待測樣品濃度。,防止寬底峰形.化),抵消了電滲作用。

  

【正文】 + 免疫電泳示意圖 免疫電泳原理,不同之處是將抗血清直接加于電泳后的蛋白質區(qū)帶表面,抗原抗體在凝膠中直接發(fā)生沉淀反應,在適當位置形成抗原抗體復合物,經染色后,可對各類免疫球蛋白及其輕鏈進行分型 原理 區(qū)帶電泳+沉淀反應 四、免疫固定電泳 先將患者血清或血漿在醋纖膜或瓊脂上作區(qū)帶電泳,根據血清蛋白質的電荷不同將其分開,然后將 IgG、 IgA、 IgM、 κ 輕鏈和 λ 輕鏈的抗血清加于分離的蛋白質泳道,參考泳道則加蛋白質固定劑,用于區(qū)帶對照, 作用一定時間后洗去游離蛋白質,染色后則可見被固定的相應 M蛋白成分。 技術要點 免疫固定電泳 左圖為 IgG κ 型 , 中圖為 IgG λ 型,右為正常 SP G A M κ λ SP G A M κ λ SP G A M κ λ 免疫固定電泳示意圖 分辨率強,敏感度高,操作周期短,僅需數小時,結果易于分析。 應用 最常用于 M蛋白的鑒定與分型,也用于尿中本周氏蛋白質的檢測與 κ 、 λ 分型,腦脊液中寡克隆蛋白的檢測與分型。 優(yōu)點 免疫固定電泳 、體液中蛋白質的測定。 :穩(wěn)定性好,敏感度高,精確度高,簡便快速,易于自動化,無放射性核素污染,適合大批量標本檢測。 故已不推薦使用。 ,影響因素多,結果不易分析。 ,敏感度高,結果易于分析,常用于 M蛋白的鑒定與分型。 沉淀反應在醫(yī)學檢驗中的應用 ? ? 、方法與分類? ? ? Mancini曲線? Fahey曲線? ? ?結果解釋? ? 思考題 ? 沉淀反應是指可溶性抗原與相應抗體在適當條件下發(fā)生特異性結合而出的沉淀現象 .根據沉淀反應介質和檢測方法的不同,將其分為液體內沉淀試驗、凝膠內沉淀試驗和凝膠免疫電泳試驗三大基本類型。 ? 免疫濁法度測定為液體內沉淀試驗;單向擴散試驗平板法是一種定量的凝膠內沉淀試驗,免疫電泳技術是電泳分析與沉淀反應的結合產物,常見的有對流免疫電泳、火箭免疫電泳、免疫電泳、免疫固定電泳等。 小 結
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