【正文】 養(yǎng)基上生長。（5）基因成功表達的標志是受體細胞通過轉錄、翻譯合成相應的蛋白質，即人的生長激素?！敬鸢浮?（1）①將從細胞中提取分離出的目的基因作為模板，轉錄成mRNA單鏈DNA雙鏈DNA；②據(jù)蛋白質中氨基酸序列mRNA中堿基序列DNA堿基序列目的基因。（2）①用一定的限制酶切割質粒，使其出現(xiàn)一個有粘性末端的切口；②用同種限制酶切割目的基因，產(chǎn)生相同的粘性末端；③將切下的目的基因片段插入到質粒的切口處，再加入適量的DNA連接酶，使質粒與目的基因結合成重組質粒。（3）普通質粒A和重組質粒都含有抗氨芐青霉素基因。（4）有的能生長，有的不能生長。導入普通質粒A的細菌能生長，因為普通質粒A上有抗四環(huán)素基因；導入重組質粒的細菌不能生長，因為目的基因插在抗四環(huán)素基因中，抗四環(huán)素基因的結構被破壞。（5）受體細胞通過轉錄、翻譯合成相應的蛋白質，即人的生長激素。３、（１）限制性內切酶　　微生物　　一種限制性內切酶只能識別一種特定的核苷酸系列，并在特定的點位切割　　（２）限制性內切酶　?。模危痢　　》謩e與載體結合　　載體　　復制　帶有目的基因的ＤＮＡ片段（３）提取目的基因　　目的基因與載體結合　　將目的基因導入受體細胞目的基因的檢測和表達3 基因工程的應用基礎試題訓練Ｃ　２、B　?。?、Ｃ　?。矗隆　。怠ⅲ谩　 　?。?、Ｂ　　８、Ｃ ９、Ｃ １0、Ｂ　　1C １BCD 1BCD 1 ABD創(chuàng)新應用訓練１、（１）載體　　　　　　正常腺苷脫氧酶基因　　　　白細胞　（２）腺苷脫氧酶（抗體）　　　轉錄　　翻譯2．（1）A. （2）人與植物結構組成相同。 （3）抗病毒干擾素。（4）遺傳密碼，共同的原始祖先。 （5）基因是遺傳物質結構和功能的基本單位。（6）將抗病毒基因嫁接到水稻中，形成抗病毒水稻新品種；將人的血型基因移入豬體內，培育人血的豬；將干擾素基因移入細菌體內，培育出能產(chǎn)生干擾素的細菌。（7）用于改良作物的抗不良環(huán)境的基因引入雜草，就將難以控制雜草。３、（１）干擾素　　合成干擾素?。ǎ玻┏鲅可场　「蓴_素（３）都是脫氧核苷酸組成的　　都具有雙螺旋結構（４）干擾素　　相同的　　相同的4.（1）限制性內切酶，堿基互補配對 （2）3/4，雌雄配子各有1/2含抗除草劑基因；受精時，雌雄配子隨機結合 （3）葉綠體遺傳表現(xiàn)為母系遺傳，目的基因不會通過花粉傳遞而在下一代中顯現(xiàn)出來4 蛋白質工程基礎試題訓練D A D C A D A B C Ｄ 1Ｄ　1C創(chuàng)新應用訓練答案：功能、結構 中心法則、天冬氨酸激酶、二氫吡啶二羧酸合成酶、天冬氨酸激酶、異亮氨酸、二氫吡啶二羧酸合成酶、異亮氨酸專題2 細胞工程 植物細胞工程 植物細胞工程的基本技術課標要求能力要求理解和掌握植物組織培養(yǎng)的操作過程理解和掌握植物體細胞雜交的操作過程內容要求理解植物細胞的全能性了解植物細胞脫分化和再分化的結果掌握植物組織培養(yǎng)的特點理解植物體細胞雜交和植物細胞培養(yǎng)的聯(lián)系知識網(wǎng)絡體系概念原理：生物學原理和分子生物學原理水平：細胞整體水平或細胞器水平目的：改變細胞內的遺傳物質，獲得細胞產(chǎn)品細胞的全能性：概念、原因、大小過程：外植體→愈傷組織→胚狀體→植物體脫分化：形成愈傷組織再分化：植物細胞選擇性表達，形成胚狀體特點：子代與親代性狀高度遺傳植物細胞工程植物組織培養(yǎng)去細胞壁：纖維素酶、果膠酶誘導劑：PEG融合完成的標志：新細胞壁的形成過程：原生質體融合+組織培養(yǎng)植物體細胞雜交重難熱點歸納 理解細胞全能性的概念，把握細胞全能性的特點：細胞全能性是指生物體的細胞具有形成完整個體的潛能的特性。受精卵、生殖細胞和已分化的體細胞均具有全能性。生物體的細胞具有全能性的根本原因是細胞內含有形成完整個體所需的全套基因。同一個體的每一個已分化的體細胞都由受精卵經(jīng)有絲分裂而來，體細胞核內基因與受精卵一樣，因此都具有全能性。分化的體細胞之所以沒有表達出全能性，是因為基因選擇性表達。在離體和適當?shù)臈l件下，分化的體細胞也能表達其全能性。全能性表達的難易程度：受精卵＞生殖細胞＞體細胞；植物細胞＞動物細胞。 植物組織培養(yǎng)操作的特點：（1）選擇外植體時，由于外植體的脫分化難易因植物種類、器官來源及生理狀況的不同而有很大差異?；ê陀啄鄣慕M織脫分化較為容易，而植物的莖、葉和成熟的老組織則較難。另外制備外植體時應選取有形成層的部分，因為形成層細胞易脫分化。（2）消毒。植物組織培養(yǎng)要想取得成功，必須有效防止細菌等的污染。因為如果培養(yǎng)基上有細菌等微生物存在時，它們比植物細胞生長、繁殖得更快，而且它們會產(chǎn)生毒素，使培養(yǎng)的植物細胞很快中毒死亡。因此在培養(yǎng)過程中要求進行一系列的消毒、滅菌，并且要求無菌操作。（3）光照。離體的植物細胞、組織和器官脫分化形成愈傷組織時，需避光處理。愈傷組織再分化形成植物幼苗時，需光照處理。（4）激素調控：生長素含量高于細胞分裂素時，主要誘導植物組織脫分化和根原基的形成；當細胞分裂素的效應高于生長素時，主要誘導植物組織再分化和芽原基的形成。植物體細胞雜交雜種細胞的篩選和培養(yǎng)：以煙草與大豆細胞融合為例。煙草與大豆的原生質體融合后，將原生質體轉移到適當?shù)呐囵B(yǎng)基上培養(yǎng)，使原生質體再生出細胞壁。這時，在細胞混合物中，不僅有煙草大豆細胞，還有煙草細胞、大豆細胞、煙草煙草細胞、大豆大豆細胞，因此需要對雜種細胞進行篩選。得到煙草大豆細胞后，再通過植物組織培養(yǎng)技術，培育雜種植株。經(jīng)典例題剖析：[解析]解答此題需從以下幾個方面入手：首先，組織培養(yǎng)是指離體的植物器官、組織或細胞經(jīng)脫分化形成愈傷組織，再經(jīng)再分化形成具有根、芽結構的胚狀體，然后由胚狀體發(fā)育成完整植物體的過程?；ǚ哿Ｄ芘囵B(yǎng)成單倍體，是在離體條件下培養(yǎng)形成的。第二，芽發(fā)育成枝條、根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)，是體內分化的器官和組織形成了機體的一部分，未受精的卵發(fā)育成植物體，這就是自然情況下單倍體的形成過程，是在母體的調控下完成的。[答案] A——原生質體融合育種技術中，其技術的重要一環(huán)是將營養(yǎng)細胞的細胞壁除去，通常是采用纖維素酶和果膠酶的酶解破壁法處理。如將去掉了細胞壁的成熟植物細胞置于清水中，細胞將：[解析]成熟植物去壁后，置于清水中，由于細胞內外濃度差較大，又無細胞壁保護，細胞會大量吸水，直至細胞破裂。[答案]B [解析]原生質體是除去細胞壁的植物細胞，它實際上就是植物細胞的原生質部分。當進行植物體細胞雜交時，先用纖維素酶、果膠酶除去細胞壁，分離出具有活力的原生質體，獲得原生質體后就可以進行植物體細胞雜交了。植物體細胞雜交的過程實質是不同植物體細胞的原生質體融合的過程。將不同植物體細胞放在一起培養(yǎng)，必須通過一定的技術手段進行人工誘導。誘導方法有物理法和化學法兩大類。物理法就是利用離心、振動、電刺激等促使原生質體融合；化學法是用聚乙二醇等試劑作為誘導劑誘導細胞的原生質體融合，聚乙二醇簡稱為PEG。重壓不能促使原生質體的融合。[答案]D、組織或細胞脫分化形成愈傷組織的過程中，下列哪一項條件是不需要的[解析]解答該題需從如下三個方面入手分析：①由離體的植物器官、組織或細胞形成愈傷組織的過程是植物組織培養(yǎng)過程中的一個階段。該階段要進行細胞的增殖和細胞的脫分化，這就必須要有適宜的養(yǎng)料和激素，必須要有適宜的溫度，這樣，才能保證細胞進行正常的新陳代謝。②由離體的植物器官、組織形成愈傷組織必須是在無菌條件下，只有在這樣的條件下，才能保證培養(yǎng)產(chǎn)生出的細胞是正常細胞，否則培養(yǎng)基內將長出許多霉菌，與離體細胞爭奪營養(yǎng)與生存空間，形不成愈傷組織。③由于此階段形成的是愈傷組織，并沒有形成具有根、莖、葉的植物體，因此不需要光照。[答案]C，不需要[解析]考查植物組織培養(yǎng)的知識。要將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成完整植株，需要具有完整細胞核的細胞，細胞處于離體狀態(tài)，培養(yǎng)基中含有一定的營養(yǎng)物質和激素。[答案]C基礎試題訓練一、選擇題1．植物組織培養(yǎng)是指 （ ?。?A．離體的植物器官或細胞培育成愈傷組織B．愈傷組織培育成植株C．離體的植物器官、組織或細胞培養(yǎng)成完整植物體D．愈傷組織形成高度液泡化組織2．植物體細胞雜交要先去除細胞壁的原因是 （　 ） 3．植物體細胞雜交的結果是 （　 ）　B．產(chǎn)生雜種細胞C．原生質體融合 D．形成愈傷組織4．科學家把天竺葵的原生質體和香茅草的原生質體進行誘導融合，培育出的驅蚊草含有香茅醛，能散發(fā)出一種特殊的達到驅蚊且對人體無害的效果。下列關于驅蚊草培育的敘述中，錯誤的是 （ ） A．驅蚊草的培育屬于細胞工程育種，其優(yōu)點是能克服遠源雜交不親和的障礙 B．驅蚊草培育過程要用到纖維素酶、果膠酶、PEG等試劑或離心、振動、電刺激等方法 C．驅蚊草培育過程是植物體細胞雜交，不同于植物組織培養(yǎng)，無愈傷組織和試管苗形成 D．驅蚊草不能通過天竺葵和香茅草雜交而獲得是因為不同物種間存在生殖隔離5．（2005，上海）將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成幼苗時，下列條件中不需要的是 （ ） A、具有完整細胞核的細胞 B、一定的營養(yǎng)物質和植物激素 C、離體狀態(tài) D、導入指定基因6．植物體細胞雜交的目的中錯誤的是 （　 ）　　 　　 7．植物組織培養(yǎng)的用途中不正確的是 （　 ）　　 　　 C．生產(chǎn)生物堿 D．生產(chǎn)白細胞介素－28．A種植物的細胞和B種植物細胞的結構如右圖所示（僅 顯示細胞核），將A、B兩種植物細胞去掉細胞壁后，誘導二者的原生質體融合，形成單核的雜種細胞，若經(jīng)過 組織培養(yǎng)后得到了雜種植株，則該雜種植株是 （ ） A．二倍體；基因型是DdYyRr B．三倍體；基因型是DdYyRr C．四倍體；基因型是DdYyRr D．四倍體；基因型是DDddYYyyRRrr9．以下關于原生質的敘述，正確的是 （　 ）A、原生質泛指細胞內的基質　　　　　　　 B、原生質就是細胞質C、一個動物細胞就是一團原生質　　　　　 D、細胞膜、細胞核和細胞壁是原生質10．不能人工誘導原生質體融合的方法是 （　 ） 　 　 D．重壓11．植物細胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是 （　 ）　　　　　　，給予適宜的營養(yǎng)和外界條件　　12．細胞具有全能性的原因是 （ 　）　　　　　　　　13．植物組織培養(yǎng)過程中的脫分化是指 （　 ）　　　　B．未成熟的種子經(jīng)過處理培育出幼苗的過程　　C．植物的器官、組織或細胞，通過離體培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織的過程　　 （　 ）　　　　　　　15．植物組織培養(yǎng)過程的順序是 （　 ）①離體的植物器官、組織或細胞 ②根、芽 ③愈傷組織 ④脫分化⑤再分化 ⑥植物體A．①④③⑤②⑥ B．①④③②⑤⑥C．①⑤④③②⑥ D．⑥①④③⑤②16．（2005，上海）將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成幼苗時，下列條件中不需要的是 （　 ）A．具有完整細胞核的細胞 B．一定的營養(yǎng)物質和植物激素C．離體狀態(tài) D．導入指定基因17．下列有關細胞工程的敘述不正確的是 （　 ）　　A. 在細胞整體水平上定向改變遺傳物質　　B．在細胞器水平上定向改變遺傳物質　　C．在細胞器水平上定向改變細胞核的遺傳物質　　D．在細胞整體水平上獲得細胞產(chǎn)品18．下列細胞全能性最高的是 （　 ）　　A．植物的卵細胞　　B．植物的精子細胞　　C．被子植物的受精卵　　D．被子植物的的葉肉細胞19．植物體細胞融合完成的標志是 （　 ）A、產(chǎn)生新的細胞壁 B、細胞膜發(fā)生融合C、細胞膜發(fā)生融合 D、細胞膜發(fā)生融合 （　 ）： （　 ）A、原生質專指細胞質　　　 B、人體內的水都屬于原生質C、細胞核不是原生質　　　 D、一個動物細胞就是一團原生質22．（多選）有關原生質體的下列敘述中，正確的是 A．組成原生質體的主要生命物質是蛋白質和核酸B．原生質體包括細胞膜、液泡膜及兩者之間的原生質C．被脫掉細胞壁的植物裸露細胞是原生質體D．原生質體只能用于植物細胞工程23．(2006，廣雅中學考題)（多選）下圖為植物組織培養(yǎng)過程示意圖，則下列敘述正確的是A．植物組織培養(yǎng)依據(jù)的生物學原理是細胞的全能性B．③ ④過程是指植物的營養(yǎng)生長和生殖生長階段C．將①經(jīng)脫分化培養(yǎng)成②時，再植上人造種皮即可獲得人工種子D．② ③的再分化過程中，誘導②生根的激素為細胞分裂素和生長素二、非選擇題1．下圖是植物組織培養(yǎng)的簡略表示。據(jù)此回答： 脫分化