現代生物技術5-資料下載頁
2025-01-05 02:08本頁面
【正文】 技術不可缺少的組成部分 四、體外受精技術環(huán)節(jié) ?卵母細胞的獲得和體外成熟 ?精子的體外獲能 ?成熟卵母細胞與獲能精子的體外受精 ?受精卵的體外培養(yǎng) ?受精卵的移植 體外受精 獲能 次級卵母細胞 減數第二次分裂中期 1．卵母細胞的獲得與體外成熟 1）卵細胞的采集方法 獲得足夠數量的卵母細胞是生產試管動物的前提 （ 1）從屠宰場家畜卵巢中采集 （ 2）從超數排卵的卵巢獲得卵泡 ,借助腹腔鏡，手術法取卵 （ 3）陰道超聲波監(jiān)視穿刺法直接從牛卵巢收集卵母細胞和內窺鏡借助套筒穿刺陰道穹隆獲得 卵母細胞的采集 . . 2）卵母細胞的成熟 ?未成熟的卵母細胞的核在細胞中央，成熟過程中遷移到動物極質膜下，核變得膨大，改稱發(fā)生泡，接著進行第一次成熟分裂， 減數分裂的完成標志著卵母細胞核的成熟 （ 1） 細胞核成熟 （ 2） 細胞質的成熟 ? 顯著的蛋白質合成發(fā)生在生發(fā)泡破裂前后，這些新合成的蛋白質不僅與卵細胞自身成熟有關（激活成熟促進因子），而且與卵母細胞輸精后的發(fā)育能力直接有關，所以 細胞質成熟的質量如何直接影響到早期胚胎的發(fā)育能力 ? 胞質成熟主要表現為細胞器變化和紡錘體的形成 ? 卵母細胞成熟后期細胞器完成重新組裝，如高爾基體消失，線粒體分布核的周圍，胞質內有 PAS陽性的囊膜和脂滴 （ 3）細胞膜和透明帶的成熟 ?細胞膜穩(wěn)定性發(fā)生改變，膜微絨毛發(fā)生重排，表現密集而有彎曲，并從透明帶內退出或斷裂 ?透明帶外層呈網狀，變軟 體外獲能 ?指精子在體外獲得受精能力的過程 ?包括在體外環(huán)境中除去精漿和精子表面吸附的大分子物質，減少表面陰性電荷，提高膜流動性，增加精子呼吸率和加快運動幅度等一系列生理生化過程 ? 精子體外獲能是體外受精技術的關鍵環(huán)節(jié)， 主要包括 精子的洗滌 和 添加特定成分 ? Brackett（ 1982）以 高離子強度液 處理使精子獲能 ? 鈣離子 在精子獲能時起關鍵作用，能較快的誘發(fā)精子超活化運動和頂體反應 ? 氨基多糖（ GAGs） 是牛精子獲能的主要物質，可促進對鈣離子的吸收，誘發(fā)頂體反應。如肝素也可使精子獲能，但同樣是一個鈣離子依賴的過程 ? 血清白蛋白（ BSA） 也可誘發(fā)精子獲能?？赡茏鳛?Zn離子融合劑引起 PLA2的表達，或者在獲能中去除精子膜上的膽固醇 體外受精 ?體外受精是以正常體內受精的研究為基礎的，盡可能給精 — 卵提供一個適宜的共培養(yǎng)體系是研究體外受精的目的 ?受精成功的標志是看受精卵是否可發(fā)育至囊胚期階段 ?多精子受精一直是體外受精的一個難點 受精卵的體外培養(yǎng) 受精卵要在體外條件下培養(yǎng)發(fā)育一段時間，再移植到受體子宮內，因此， “試管動物”實際上要在體外進行三個階段的培養(yǎng)： 第一階段 是卵子成熟培養(yǎng)和精子獲能培養(yǎng) 第二階段 是受精培養(yǎng) 第三階段 才是受精卵早期發(fā)育培養(yǎng) 存在的問題 ? 1）體外受精的效率有待提高 ? 2）體外培養(yǎng)體系有待進一步完善 ? 3）基礎理論研究有待加強 作業(yè) 概念 ?胚胎移植、超數排卵、同期發(fā)情、胚胎分割、發(fā)育阻斷、體外受精、精子獲能 簡答 ?胚胎移植的生理學基礎 ?胚胎移植的基本原則 ?牛胚胎移植基本程序 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH
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