微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱-資料下載頁
2025-04-04 23:23本頁面
【正文】 ts，cfu)而不以絕對(duì)菌落數(shù)來表示樣品的活菌含量。當(dāng)光線通過微生物菌懸液時(shí)，由于菌體的散射及吸收作用使光線的透過量降低。在一定的范圍內(nèi)，微生物細(xì)胞濃度與透光度成反比，與光密度成正比，而光密度或透光度可以由光電池精確測出。因此，可用一系列已知菌數(shù)的菌懸液測定光密度，作出光密度菌數(shù)標(biāo)準(zhǔn)曲線。因此，對(duì)于不同微生物的菌懸液進(jìn)行光電比濁計(jì)數(shù)應(yīng)采用相同的菌株和培養(yǎng)條件制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。顯微鏡直接計(jì)數(shù)法是將小量待測樣品的懸浮液置于一種特別的具有確定面積和容積的載玻片上(又稱計(jì)菌器)，于顯微鏡下直接計(jì)數(shù)的一種簡便、快速、直觀的方法。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容平板計(jì)數(shù)法；光電計(jì)數(shù)法；直接計(jì)數(shù)法(顯微鏡)；實(shí)驗(yàn)操作考核二。實(shí)驗(yàn)材料和用品材料：大腸桿菌；用品：學(xué)生顯微鏡、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、計(jì)數(shù)器、分光光度計(jì)、蓋玻片、無菌毛細(xì)滴管、無菌平皿、無菌試管、無菌移液管、酒精燈、涂棒、鑷子、記號(hào)筆等；牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、無菌生理鹽水。（十五）實(shí)驗(yàn)十五 理化因素對(duì)微生物的影響目的要求了解常用化學(xué)消毒劑對(duì)微生物的作用；了解紫外線對(duì)微生物的作用；實(shí)驗(yàn)原理常用化學(xué)消毒劑主要有重金屬及其鹽類、酚、醇、醛等有機(jī)溶劑、鹵族元素及其化合物、染料和表面活性劑等。重金屬離子可與菌體蛋白質(zhì)結(jié)合而使之變性或與某些酶蛋白的巰基相結(jié)合而使酶失活；有機(jī)溶劑可使蛋白質(zhì)及核酸變性，也可破壞細(xì)胞膜透性使內(nèi)含物外溢；碘可與蛋白質(zhì)酪氨酸殘基不可逆結(jié)合而使蛋白質(zhì)失活，氯氣與水發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生的強(qiáng)氧化劑也具有殺菌作用；染料在低濃度條件下可抑制細(xì)菌生長。紫外線滅菌是用紫外線燈進(jìn)行的。波長為200300nm的紫外線都有殺菌能力，其中以260nm的殺菌力最強(qiáng)。在波長一定的條件下，紫外線的殺菌效率與強(qiáng)度和時(shí)間的乘積成正比。紫外線殺菌機(jī)制主要是因?yàn)樗T導(dǎo)了胸腺嘧啶二聚體的形成和DNA鏈的交聯(lián)，從而抑制了DNA的復(fù)制。另一方面，由于輻射能使空氣中的氧電離成［O］，再使O2氧化生成自臭氧(O3)或使水(H2O)氧化生成過氧化氫(H2O2)。O3和H2O2均有殺菌作用。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容化學(xué)因素對(duì)微生物的影響；物理因素對(duì)微生物的影響；實(shí)驗(yàn)材料和用品材料：大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌；用品：酒精燈、接種環(huán)、記號(hào)筆、紫外燈等；牛肉膏蛋白胨平板；%升汞、10%石炭酸、75%酒精、1%來蘇爾、%龍膽紫。（十六）實(shí)驗(yàn)十六 生物因素對(duì)微生物的影響目的要求了解抗生素對(duì)微生物的作用原理，學(xué)習(xí)抗菌譜試驗(yàn)的基本方法。實(shí)驗(yàn)原理生物之間的關(guān)系從總體上可分為互生、共生、寄生、拮抗等，微生物之間的拮抗現(xiàn)象是普遍存在于自然界的，許多微生物在其生命活動(dòng)過程中能產(chǎn)生某種特殊代謝產(chǎn)物如抗生素，具有選擇性地抑制或殺死其它微生物的作用，不同抗生素的抗菌譜是不同的，某些抗生素只對(duì)少數(shù)細(xì)菌有抗菌作用。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容生物因素對(duì)微生物的影響；實(shí)驗(yàn)操作考核三。實(shí)驗(yàn)材料和用品材料：大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌；用品：酒精燈、接種環(huán)、記號(hào)筆、紫外燈等；牛肉膏蛋白胨平板；氨芐青霉素。四、作業(yè)（略） 《微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》教學(xué)大綱說明一、本課程的重難點(diǎn)和廣度（一）課程的重點(diǎn)：微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程要求學(xué)生熟悉微生物學(xué)方法與技術(shù)，掌握無菌操作技能和建立無菌概念是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中最重要的內(nèi)容，重點(diǎn)掌握最基本的無菌操作技能，如接種、純培養(yǎng)、計(jì)數(shù)等。（二）課程的難點(diǎn)： 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課程的難點(diǎn)是與微生物學(xué)基礎(chǔ)理論課緊密結(jié)合，使學(xué)生將理性知識(shí)與感性認(rèn)識(shí)有機(jī)地結(jié)合，將書本知識(shí)用于實(shí)驗(yàn)，在實(shí)驗(yàn)中更深地理解基礎(chǔ)理論，提高學(xué)生的綜合能力與創(chuàng)新意識(shí)。（三）課程的廣度：微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是生物學(xué)重要的基礎(chǔ)課之一，特別是隨著分子生物學(xué)的發(fā)展與拓寬，微生物學(xué)方法與技術(shù)顯得尤為重要。此外，醫(yī)學(xué)、農(nóng)學(xué)、林學(xué)等學(xué)科，甚至地質(zhì)學(xué)、太空學(xué)等也需微生物的方法與技術(shù)。二、考核辦法：考試占30％，平時(shí)占70％。三、學(xué)時(shí)分配：總學(xué)時(shí)：108 講課：96 課 程 內(nèi) 容課時(shí)分配講 課實(shí)驗(yàn)一 實(shí)驗(yàn)室安全教育與微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的器皿66實(shí)驗(yàn)二 環(huán)境微生物的檢查66實(shí)驗(yàn)三 顯微鏡的構(gòu)造、性能和使用方法66實(shí)驗(yàn)四 細(xì)菌的簡單染色與顯微觀察66實(shí)驗(yàn)五 革蘭氏染色66實(shí)驗(yàn)六 細(xì)菌的芽孢染色法66實(shí)驗(yàn)七 細(xì)菌鞭毛染色及運(yùn)動(dòng)性觀察66實(shí)驗(yàn)八 酵母菌的形態(tài)觀察及死活細(xì)胞的鑒別66實(shí)驗(yàn)九 霉菌的形態(tài)觀察66實(shí)驗(yàn)十 培養(yǎng)基的配制與滅菌66實(shí)驗(yàn)十一 微生物的分離與純化66實(shí)驗(yàn)十二 微生物的培養(yǎng)特征66實(shí)驗(yàn)十三 菌種保藏66實(shí)驗(yàn)十四 微生物數(shù)量的測定66實(shí)驗(yàn)十五 理化因素對(duì)微生物的影響66實(shí)驗(yàn)十六 生物因素對(duì)微生物的影響66機(jī) 動(dòng)66考 試66總 學(xué) 時(shí)108108四、參考書目：《微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》第4版、沈萍主編、高等教育出版社、2007年。《微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程》第2版、周德慶主編，高等教育出版社、2006年?！段⑸飳W(xué)實(shí)驗(yàn)教程》 第2版、黃儀秀主編、北京大學(xué)出版社、2008年?！段⑸飳W(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》第2版、黃秀梨主編、高等教育出版社、2008年。《圖解微生物實(shí)驗(yàn)指南》 (附光盤)、(著)、謝建平等 (譯)、McGrawHill／科學(xué)出版社、2012年。 編寫： 審核： 批準(zhǔn)：18
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