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[理學]第四章dna復制-資料下載頁

2025-03-22 06:39本頁面
  

【正文】 合酶 III的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 , 大多數(shù)都與成熟的 RNA序列相當 , 除了四種 rRNA沒有相應的返座子外 , 幾乎每一類 RNA都有返座子 。 非病毒轉(zhuǎn)座子 沒有共同的結(jié)構(gòu)特征 , 長度從 33bp一直到 6kb以上 , 一般沒有轉(zhuǎn)座酶的編碼區(qū) 。 因此返座過程可能是被動的 , 返座以后產(chǎn)生 7~12bp的靶序列重復 。 由返座而產(chǎn)生的假基因稱為返座假基因 ( retropseudogene) RNA聚合酶 II合成 mRNA, snRNA→→ 沒有內(nèi)含子 , 卻有polyA RNA聚合酶 III合成 tRNA, 5s rRNA, Alu序列 ( 一種短散在元件 , SINE) 長散在元件( LINE),為 RNA聚合酶 II轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的返座子,長6~7kb,編碼反轉(zhuǎn)錄酶,有 polyA,缺少 LTR,仍可能發(fā)生返座 。 (2)非病毒大家族 轉(zhuǎn)座的本質(zhì)是轉(zhuǎn)座子從一個位點轉(zhuǎn)移到另一個新的位點,但在原來位置仍留一份拷貝,轉(zhuǎn)座子與靶序列之間并沒有同源性,轉(zhuǎn)座過程也不依賴細菌的 RecA蛋白質(zhì)。 轉(zhuǎn)座發(fā)生后,受體 DNA有一段很短的靶序列會進行復制( 5~ 12bp),轉(zhuǎn)座子就被夾在兩個重復的靶序列之間。不同的轉(zhuǎn)座子,靶序列的長度不同,同一轉(zhuǎn)座子所有靶序列的長度一致,但序列不一定相同。兩個順向重復的靶序列對后續(xù)轉(zhuǎn)座沒有意義。 ?轉(zhuǎn)座的本質(zhì) ?插入位點靶序列的復制 有的轉(zhuǎn)座子有特異性整合 —— 體現(xiàn)了位置優(yōu)先性 , 但更多的是幾乎隨機整合 。 大多數(shù) 的 轉(zhuǎn) 座 子 有 順 式 免 疫 作 用 ( cisimmunity) —— 避免整合至已存在相同類型的轉(zhuǎn)座子的位點 。 轉(zhuǎn)座子之間的距離有的很短 , 有時僅 1~ 10kb。 細菌復制型轉(zhuǎn)座子優(yōu)先轉(zhuǎn)到質(zhì)粒上 , 而不是由質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到染色體上 。 ?靶位點的優(yōu)先性 轉(zhuǎn)座分保守轉(zhuǎn)座 ( 非復制轉(zhuǎn)座 、 簡單轉(zhuǎn)座 、 切割粘貼機制 ) 和復制轉(zhuǎn)座 ( 非保守轉(zhuǎn)座 、 復合轉(zhuǎn)座 ) 保守轉(zhuǎn)座: 從一個位點切下轉(zhuǎn)座子而在另一位點整合 。 復制轉(zhuǎn)座: 轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座過程發(fā)生復制 , 一份留在供體位點 , 另一份整合至靶位點 。 返座機制 逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)座 和 反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座 轉(zhuǎn)座子是一類自私 DNA, 成功的轉(zhuǎn)座子經(jīng)常發(fā)生轉(zhuǎn)移 , 并盡可能地增加它的拷貝數(shù) , 但不受控制的轉(zhuǎn)座會破壞宿主基因組 , 并最終影響到轉(zhuǎn)座子本身 . 所以大多數(shù)轉(zhuǎn)座子在( 1)轉(zhuǎn)座頻率( 2)靶位點的選擇和特定的細胞周期等方面進行調(diào)控。因此,轉(zhuǎn)座總能在無限的擴展能力以及避免給宿主帶來致命的損傷之間找到一個平衡點。 G. 轉(zhuǎn)座調(diào)節(jié) ?反義核酸的抑制 甲基化作用 ?阻遏蛋白 順式作用 ?細胞周期 轉(zhuǎn)座調(diào)控的方式: ?反義核酸的抑制 Pout Pin Tn10R 轉(zhuǎn)座調(diào)節(jié) Pout的活性比 Pin強得多,并且兩者間有一 40bp的重迭,前者所產(chǎn)生的大量反向 RNA能有效的抑制后者所產(chǎn)生的 mRNA的翻譯。 ?甲基化作用 宿主的甲基化缺陷使 Tn10轉(zhuǎn)座酶容易起始轉(zhuǎn)錄,同時有利于轉(zhuǎn)座酶與 IS10R的結(jié)合,有利于轉(zhuǎn)座。 轉(zhuǎn)座調(diào)節(jié) ?阻遏蛋白調(diào)節(jié) Ochre Tn5 蛋白質(zhì) 1和 2 新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶 II 蛋白 1是 Tn5轉(zhuǎn)座必需的,蛋白 2抑制轉(zhuǎn)座。在 Tn50L中,蛋白 1和 2由于赭石突變的引入,產(chǎn)物縮短,從而散失功能,但獲得了抗藥性功能。 ?順式作用 Tn10的轉(zhuǎn)座酶和 Tn5的蛋白 1 起所起的作用主要是順氏的,即主要對自身的模板發(fā)生作用,對其他同類轉(zhuǎn)座子雖有一定作用,但功能大大降低(即反式作用很弱),并且這些轉(zhuǎn)座酶沒有積累效應;但 Tn5的蛋白 2等轉(zhuǎn)座阻遏蛋白不但具有積累效應同時具反式功能。 ?細胞周期調(diào)節(jié) 轉(zhuǎn)座調(diào)節(jié) 當 P品系的雄果蠅與其他品系的雌果蠅交配,導致后代雜種不育。 因為 P成分能同時編碼轉(zhuǎn)座酶和轉(zhuǎn)座阻遏蛋白,由于阻遏蛋白為反式作用,而轉(zhuǎn)座酶有很強的順式效應,在受精后的短時間內(nèi),轉(zhuǎn)座作用占優(yōu)勢。而在受精卵分化過程,轉(zhuǎn)座頻率很高,導致許多基因失活或染色體重排。 H.生物學效應 1. 引起基因的插入突變 (包括極性突變 )。 2. 產(chǎn)生靶序列 DNA的同向重復 。 3. 介導復制子的融合 。 4. 成為調(diào)節(jié)基因活動的開關(guān) (內(nèi)外源啟動子 )。 5. 引起基因的 重排 \缺失或倒位 。 6. 產(chǎn)生切離 :精確切離與不精確切離 7. 造成同源序列的整合 , 如 F因子整合到染色體形成 Hfr菌 。 8. 果蠅的雜交不育 (P因子 ); 9. 鼠傷寒沙門氏菌鞭毛的相變。 轉(zhuǎn)座會產(chǎn)生如下現(xiàn)象 : 倒位與缺失 , 簡單轉(zhuǎn)座子和復合轉(zhuǎn)座子都可引起插入點后面發(fā)生改變。 , 如轉(zhuǎn)座子上攜帶有抗藥性基因,則它一方面造成靶 DNA序列上的插入突變,同時也是這個位點產(chǎn)生抗藥性。 。 當復制型轉(zhuǎn)座發(fā)生在宿主DNA原有位點附近時,往往會導致轉(zhuǎn)座子兩拷貝之間發(fā)生同源重組,引起缺失或倒位。 。 因轉(zhuǎn)座使原來在染色體上相距甚遠的基因組合到一起,構(gòu)建成一個操縱子或表達單元,可能產(chǎn)生新基因或新蛋白。 總體上看,轉(zhuǎn)座會引起如下遺傳學效應 I.應 用 判斷 轉(zhuǎn)座是生物體中發(fā)生 DNA重組的一種方式。( ) 位點特異性重組是一種需要特異性酶參與的重組方式 ( ) 同源重組是有性生殖生物在產(chǎn)生生殖細胞過程中的一種 DNA重組方式。 ( ) 編碼區(qū)以外的突變不會導致細胞或生物體表型改變。 ( ) 下列序列中的哪一個可能是 mRNA: 5`AUAGGCGAU— 3`的對應基因序列 ( ) A. 3`UAUCCGCUA5` B. 5`ATCGCCTAT3` C. 5`TATCCGCTA3` D. 3`TATCCGCTA5` DNA連接酶催化的化學反應 ( ) A、可以填補引物遺留下的空隙 B、生成氫鍵 C、向 3`OH末端加入 dNTP D、生成磷酸二酯鍵 Klenow酶與 DNA聚合酶相比,前者喪失了下列哪種活性? `- 3`外切酶 `- 5`外切酶 `- 3`合成酶 D. 3`-5`合成酶 突變 ( ) A. 是有害因素引起有害的結(jié)果 B. 是進化的基礎 C. 自然突變頻率很低,可以忽略 D. 一定會引起功能受損 由整合酶催化、在兩個 DNA序列的特異位點間發(fā)生的整合稱 ( ) A. 位點特異性重組 B. 同源重組 C. 基本重組 D. 隨機重組 在兩個 DNA分子的同源序列間發(fā)生的重組稱為 ( ) ? 位點特異性重組 B. 同源重組 C. 基本重組 D. 隨機重組 嘧啶二聚體的解聚方式靠 ( ) A. 易錯修復 B. 切除修復 C. 重組修復 D. 光修復酶的作用
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