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[理學(xué)]第四章dna復(fù)制-資料下載頁(yè)

2025-03-22 06:39本頁(yè)面
  

【正文】 合酶 III的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 , 大多數(shù)都與成熟的 RNA序列相當(dāng) , 除了四種 rRNA沒(méi)有相應(yīng)的返座子外 , 幾乎每一類(lèi) RNA都有返座子 。 非病毒轉(zhuǎn)座子 沒(méi)有共同的結(jié)構(gòu)特征 , 長(zhǎng)度從 33bp一直到 6kb以上 , 一般沒(méi)有轉(zhuǎn)座酶的編碼區(qū) 。 因此返座過(guò)程可能是被動(dòng)的 , 返座以后產(chǎn)生 7~12bp的靶序列重復(fù) 。 由返座而產(chǎn)生的假基因稱(chēng)為返座假基因 ( retropseudogene) RNA聚合酶 II合成 mRNA, snRNA→→ 沒(méi)有內(nèi)含子 , 卻有polyA RNA聚合酶 III合成 tRNA, 5s rRNA, Alu序列 ( 一種短散在元件 , SINE) 長(zhǎng)散在元件( LINE),為 RNA聚合酶 II轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的返座子,長(zhǎng)6~7kb,編碼反轉(zhuǎn)錄酶,有 polyA,缺少 LTR,仍可能發(fā)生返座 。 (2)非病毒大家族 轉(zhuǎn)座的本質(zhì)是轉(zhuǎn)座子從一個(gè)位點(diǎn)轉(zhuǎn)移到另一個(gè)新的位點(diǎn),但在原來(lái)位置仍留一份拷貝,轉(zhuǎn)座子與靶序列之間并沒(méi)有同源性,轉(zhuǎn)座過(guò)程也不依賴(lài)細(xì)菌的 RecA蛋白質(zhì)。 轉(zhuǎn)座發(fā)生后,受體 DNA有一段很短的靶序列會(huì)進(jìn)行復(fù)制( 5~ 12bp),轉(zhuǎn)座子就被夾在兩個(gè)重復(fù)的靶序列之間。不同的轉(zhuǎn)座子,靶序列的長(zhǎng)度不同,同一轉(zhuǎn)座子所有靶序列的長(zhǎng)度一致,但序列不一定相同。兩個(gè)順向重復(fù)的靶序列對(duì)后續(xù)轉(zhuǎn)座沒(méi)有意義。 ?轉(zhuǎn)座的本質(zhì) ?插入位點(diǎn)靶序列的復(fù)制 有的轉(zhuǎn)座子有特異性整合 —— 體現(xiàn)了位置優(yōu)先性 , 但更多的是幾乎隨機(jī)整合 。 大多數(shù) 的 轉(zhuǎn) 座 子 有 順 式 免 疫 作 用 ( cisimmunity) —— 避免整合至已存在相同類(lèi)型的轉(zhuǎn)座子的位點(diǎn) 。 轉(zhuǎn)座子之間的距離有的很短 , 有時(shí)僅 1~ 10kb。 細(xì)菌復(fù)制型轉(zhuǎn)座子優(yōu)先轉(zhuǎn)到質(zhì)粒上 , 而不是由質(zhì)粒轉(zhuǎn)移到染色體上 。 ?靶位點(diǎn)的優(yōu)先性 轉(zhuǎn)座分保守轉(zhuǎn)座 ( 非復(fù)制轉(zhuǎn)座 、 簡(jiǎn)單轉(zhuǎn)座 、 切割粘貼機(jī)制 ) 和復(fù)制轉(zhuǎn)座 ( 非保守轉(zhuǎn)座 、 復(fù)合轉(zhuǎn)座 ) 保守轉(zhuǎn)座: 從一個(gè)位點(diǎn)切下轉(zhuǎn)座子而在另一位點(diǎn)整合 。 復(fù)制轉(zhuǎn)座: 轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座過(guò)程發(fā)生復(fù)制 , 一份留在供體位點(diǎn) , 另一份整合至靶位點(diǎn) 。 返座機(jī)制 逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)座 和 反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座 轉(zhuǎn)座子是一類(lèi)自私 DNA, 成功的轉(zhuǎn)座子經(jīng)常發(fā)生轉(zhuǎn)移 , 并盡可能地增加它的拷貝數(shù) , 但不受控制的轉(zhuǎn)座會(huì)破壞宿主基因組 , 并最終影響到轉(zhuǎn)座子本身 . 所以大多數(shù)轉(zhuǎn)座子在( 1)轉(zhuǎn)座頻率( 2)靶位點(diǎn)的選擇和特定的細(xì)胞周期等方面進(jìn)行調(diào)控。因此,轉(zhuǎn)座總能在無(wú)限的擴(kuò)展能力以及避免給宿主帶來(lái)致命的損傷之間找到一個(gè)平衡點(diǎn)。 G. 轉(zhuǎn)座調(diào)節(jié) ?反義核酸的抑制 甲基化作用 ?阻遏蛋白 順式作用 ?細(xì)胞周期 轉(zhuǎn)座調(diào)控的方式: ?反義核酸的抑制 Pout Pin Tn10R 轉(zhuǎn)座調(diào)節(jié) Pout的活性比 Pin強(qiáng)得多,并且兩者間有一 40bp的重迭,前者所產(chǎn)生的大量反向 RNA能有效的抑制后者所產(chǎn)生的 mRNA的翻譯。 ?甲基化作用 宿主的甲基化缺陷使 Tn10轉(zhuǎn)座酶容易起始轉(zhuǎn)錄,同時(shí)有利于轉(zhuǎn)座酶與 IS10R的結(jié)合,有利于轉(zhuǎn)座。 轉(zhuǎn)座調(diào)節(jié) ?阻遏蛋白調(diào)節(jié) Ochre Tn5 蛋白質(zhì) 1和 2 新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶 II 蛋白 1是 Tn5轉(zhuǎn)座必需的,蛋白 2抑制轉(zhuǎn)座。在 Tn50L中,蛋白 1和 2由于赭石突變的引入,產(chǎn)物縮短,從而散失功能,但獲得了抗藥性功能。 ?順式作用 Tn10的轉(zhuǎn)座酶和 Tn5的蛋白 1 起所起的作用主要是順氏的,即主要對(duì)自身的模板發(fā)生作用,對(duì)其他同類(lèi)轉(zhuǎn)座子雖有一定作用,但功能大大降低(即反式作用很弱),并且這些轉(zhuǎn)座酶沒(méi)有積累效應(yīng);但 Tn5的蛋白 2等轉(zhuǎn)座阻遏蛋白不但具有積累效應(yīng)同時(shí)具反式功能。 ?細(xì)胞周期調(diào)節(jié) 轉(zhuǎn)座調(diào)節(jié) 當(dāng) P品系的雄果蠅與其他品系的雌果蠅交配,導(dǎo)致后代雜種不育。 因?yàn)? P成分能同時(shí)編碼轉(zhuǎn)座酶和轉(zhuǎn)座阻遏蛋白,由于阻遏蛋白為反式作用,而轉(zhuǎn)座酶有很強(qiáng)的順式效應(yīng),在受精后的短時(shí)間內(nèi),轉(zhuǎn)座作用占優(yōu)勢(shì)。而在受精卵分化過(guò)程,轉(zhuǎn)座頻率很高,導(dǎo)致許多基因失活或染色體重排。 H.生物學(xué)效應(yīng) 1. 引起基因的插入突變 (包括極性突變 )。 2. 產(chǎn)生靶序列 DNA的同向重復(fù) 。 3. 介導(dǎo)復(fù)制子的融合 。 4. 成為調(diào)節(jié)基因活動(dòng)的開(kāi)關(guān) (內(nèi)外源啟動(dòng)子 )。 5. 引起基因的 重排 \缺失或倒位 。 6. 產(chǎn)生切離 :精確切離與不精確切離 7. 造成同源序列的整合 , 如 F因子整合到染色體形成 Hfr菌 。 8. 果蠅的雜交不育 (P因子 ); 9. 鼠傷寒沙門(mén)氏菌鞭毛的相變。 轉(zhuǎn)座會(huì)產(chǎn)生如下現(xiàn)象 : 倒位與缺失 , 簡(jiǎn)單轉(zhuǎn)座子和復(fù)合轉(zhuǎn)座子都可引起插入點(diǎn)后面發(fā)生改變。 , 如轉(zhuǎn)座子上攜帶有抗藥性基因,則它一方面造成靶 DNA序列上的插入突變,同時(shí)也是這個(gè)位點(diǎn)產(chǎn)生抗藥性。 。 當(dāng)復(fù)制型轉(zhuǎn)座發(fā)生在宿主DNA原有位點(diǎn)附近時(shí),往往會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)座子兩拷貝之間發(fā)生同源重組,引起缺失或倒位。 。 因轉(zhuǎn)座使原來(lái)在染色體上相距甚遠(yuǎn)的基因組合到一起,構(gòu)建成一個(gè)操縱子或表達(dá)單元,可能產(chǎn)生新基因或新蛋白。 總體上看,轉(zhuǎn)座會(huì)引起如下遺傳學(xué)效應(yīng) I.應(yīng) 用 判斷 轉(zhuǎn)座是生物體中發(fā)生 DNA重組的一種方式。( ) 位點(diǎn)特異性重組是一種需要特異性酶參與的重組方式 ( ) 同源重組是有性生殖生物在產(chǎn)生生殖細(xì)胞過(guò)程中的一種 DNA重組方式。 ( ) 編碼區(qū)以外的突變不會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞或生物體表型改變。 ( ) 下列序列中的哪一個(gè)可能是 mRNA: 5`AUAGGCGAU— 3`的對(duì)應(yīng)基因序列 ( ) A. 3`UAUCCGCUA5` B. 5`ATCGCCTAT3` C. 5`TATCCGCTA3` D. 3`TATCCGCTA5` DNA連接酶催化的化學(xué)反應(yīng) ( ) A、可以填補(bǔ)引物遺留下的空隙 B、生成氫鍵 C、向 3`OH末端加入 dNTP D、生成磷酸二酯鍵 Klenow酶與 DNA聚合酶相比,前者喪失了下列哪種活性? `- 3`外切酶 `- 5`外切酶 `- 3`合成酶 D. 3`-5`合成酶 突變 ( ) A. 是有害因素引起有害的結(jié)果 B. 是進(jìn)化的基礎(chǔ) C. 自然突變頻率很低,可以忽略 D. 一定會(huì)引起功能受損 由整合酶催化、在兩個(gè) DNA序列的特異位點(diǎn)間發(fā)生的整合稱(chēng) ( ) A. 位點(diǎn)特異性重組 B. 同源重組 C. 基本重組 D. 隨機(jī)重組 在兩個(gè) DNA分子的同源序列間發(fā)生的重組稱(chēng)為 ( ) ? 位點(diǎn)特異性重組 B. 同源重組 C. 基本重組 D. 隨機(jī)重組 嘧啶二聚體的解聚方式靠 ( ) A. 易錯(cuò)修復(fù) B. 切除修復(fù) C. 重組修復(fù) D. 光修復(fù)酶的作用
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