細胞培養(yǎng)基礎ppt課件-資料下載頁
2025-02-21 15:45本頁面
【正文】 可 欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉速？ ? 欲回收動物細胞，其離心速率一般為300xg (約 1,000rpm)， 5 10 分鐘， 過高之轉速， 將造成細胞死亡 細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時， 是否應馬上去除 DMSO？ ? 除少數(shù)特別注明對 DMSO 敏感之細胞外， 絕大部分細胞株（包括懸浮性細胞），在解凍之后，應直接放入含有 1015ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中，待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除 DMSO 即可，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題 支原體 (mycoplasma) 污染的細胞，是否能以肉眼觀察出異狀？ ? 不能。除極有經(jīng)驗之專家外，大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株， 無法以其外觀分辨之。 偵測出細胞株有支原體污染時， 該如何處理？ ? 直接滅菌后丟棄，以避免污染其它細胞株 為何培養(yǎng)基保存于 4 176。 C 冰箱中， 顏色會偏暗紅色， 且 pH值會越來越偏堿性？ ? 培養(yǎng)基保存于 4176。 C 冰箱中， 培養(yǎng)基內之 CO2 會逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑 (通常為 phenol red) 的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結果，將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時，可以通入無菌過濾之 CO2，以調整 pH 值。 細胞培養(yǎng)的污染和檢測 ? 細胞污染的種類 細菌、酵母菌、霉菌和病毒 ? 污染源 無菌操作技術不當 操作室環(huán)境不佳 污染之血清 污染之細胞 細菌培養(yǎng)液被洋蔥佰克霍爾德菌污染了。 洋蔥佰克霍爾德菌（ Burkholderiacepacia）原屬假單胞菌屬，是植物病原菌。 白色念珠菌污染 真菌感染 支原體污染電鏡照片 , 煎蛋狀和其他形狀 細菌和真菌的污染和檢測 ? 肉眼直接觀察法 ? 培養(yǎng)檢查法 ? 顯微鏡觀察法 支原體的污染和檢測 ? Hayflick培養(yǎng)基直接培養(yǎng)法 ? DNA熒光染色法 ? PCR方法 ? 相差顯微鏡觀察法 ? 測出細胞株有支原體污染時， 應直接滅菌后丟棄，以避免污染其它細胞株。
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