【正文】 果培育出衣袖、后襟和領子一應俱全的皮大衣。? “ 繁殖 ” 肉 ? “ 消除種族區(qū)別 ” 皮膚替代物美國 FDA批準美國加利福尼亞州一家公司生產(chǎn)的商品名為 TransCyte的皮膚替代物進入市場。它由取自皮膚真皮或表皮層的細胞在一個生物可降解的聚合物上生長而成。TransCyte能作為創(chuàng)口的臨時覆蓋物，可用于 2度或 3度燒傷的病人。BodyPartShack肢體臟器量販店四、實例： 哈佛醫(yī)學院 獵犬膀胱首先，從獵犬膀胱的外表面獲取平滑肌細胞，在膀胱內(nèi)表面獲取尿上皮細胞，在體外培養(yǎng)。其次，應用多分支的、多孔滲水的聚羥基乙酸聚合體，塑造了一個膀胱形狀的模子，再在其表面涂上聚乳酸類物質(zhì)。第三步，將尿上皮細胞加到聚合體膀胱的內(nèi)表面，平滑肌細胞加到外表面，然后進行無菌培養(yǎng)。7天后，通過外科手術，用新生長成的膀胱分別替代 6只小獵犬的正常膀胱。3個月后，聚合體在新膀胱組織中消失，小獵犬的機體開始用自身的血管供應新膀胱，新膀胱和正常的膀胱一樣能容納尿液，并維持正常的膀胱形態(tài)，甚至還接受機體神經(jīng)支配。織工程面臨的挑戰(zhàn) ? 零部件工廠? 欲求之特性? 面向患者小結七、器官培養(yǎng)? 定義和特點? 培養(yǎng)技術? 實例? 研究進展 特點? 器官培養(yǎng) 主要采用類似于組織培養(yǎng)中植塊培養(yǎng)的方式培養(yǎng)器官型植塊。? 特點：培養(yǎng)對象為胚胎組織的某一器官或非胚胎組織器官的一部分；被培養(yǎng)物浸泡在培養(yǎng)液中，細胞增殖，器官保持正常功能；被培養(yǎng)組織器官的細胞靠簡單的深透擴散方式從培養(yǎng)液中獲得氧氣和其他營養(yǎng)物質(zhì)，并排泄廢物。胚胎器官培養(yǎng) ：可整體培養(yǎng)，培養(yǎng)時不需要補充氧，細胞生長活躍，遷移能力強。成年器官培養(yǎng)： 對氧的要求高，細胞高度分化，內(nèi)部細胞的遷移不明顯。培養(yǎng)時注意兩個基本原則：? 提供充足的營養(yǎng)和氧，及時排除代謝廢物；? 要抑制細胞從植塊向外遷移。血管的培養(yǎng)材料：成年哺乳動物的胸動脈，固定后剖開胸部，取出胸動脈，用培養(yǎng)液沖洗動脈內(nèi)壁，剪成 左右的動脈管。，加入 10ml左右的培養(yǎng)液，并向培養(yǎng)瓶中通入 95％氧和 5％ CO2的混合氣體，加塞。 37度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。? 最早是由 Leob在 1897年對成年兔的一些器官進行了嘗試性培養(yǎng)， 3天內(nèi)保持正常。? 20世紀初，利用胚胎器官培養(yǎng)的研究活躍； 20世紀 50年代，器官培養(yǎng)進入蓬勃發(fā)展階段。? 西南醫(yī)院利用裸鼠培養(yǎng)出的小鼠的腎臟。? 目前，培養(yǎng)的人體器官已達 18種以上。指骨、動脈、腎臟、乳房、人造膀胱、人造角膜都在積極的實驗培養(yǎng)階段，有待于應用。? 定義? 特性和分類? 培養(yǎng)和建系? 應用八、干細胞培養(yǎng)? 干細胞（ stemcells） 是一種具有多分化潛能和自我復制功能的早期未分化細胞。在一定條件下 ， 它可以分化成多種功能細胞 ， 形成多種組織和器官。? （ 干 細 胞 :哺乳 動 物的 許 多已分化 組織 和器官中都保留了一些能 夠 分裂形成 該組織 或器官的未分化原始 細 胞， 這 些 細 胞稱 為 干 細 胞。 ）? 形態(tài)： 呈圓形或橢圓型、體積小、核質(zhì)比例較大（ 圖 ）；具有較高的端粒酶活性， 因此具有 較 強 增殖能力。? 增殖 ：增殖速度較慢，利于進入特定分化程序，避免產(chǎn)生自身突變。自穩(wěn)性，干細胞會自我更新維持自身數(shù)目。生長在培養(yǎng)液中的人胚胎干細胞(周圍是小鼠“喂養(yǎng)”細胞)從 分化潛能性 分單能干細胞：分裂產(chǎn)生的子細胞只能分化為單一類型的細胞。如：表皮干細胞。多能干細胞：能夠形成兩種或兩種以上類型細胞的干細胞。如：骨髓造血干細胞全能干細胞：具有無性分化潛能的干細胞。能專門分化胚胎和胚后期組織、器官。從 來源 分成體干細胞：成體組織中具有自我更新及分化產(chǎn)生子代細胞的未成熟細胞。胚胎干細胞（ ESC）： 著床前胚胎內(nèi)細胞團或原始生殖細胞經(jīng)體外分化抑制培養(yǎng)分離的一種全能性細胞系，可分化成任何一種組織類型的細胞。干細胞分類把小鼠胚胎干細胞植入小鼠大腦（見左圖的藍色背景）之后，形成了類似于神經(jīng)細胞的細胞（見左圖棕色部分及右圖）干細胞發(fā)育成神經(jīng)細胞(1).ESC的獲得：桑椹胚、囊胚。小鼠選用 16－ 20細胞的桑椹胚；牛取 6－ 7天的桑椹胚或 7－ 8天的囊胚；人取 7－ 8天的囊胚。：哺乳動物原始生殖細胞最早出現(xiàn)在靠近尿囊基部的卵黃囊內(nèi)胚層，后期移向生殖脊。大鼠取 － 的生殖脊；人取 5－ 9周齡的胎兒背腸系膜或生殖脊。（ 2） .建系過程 ： ES細胞體外培養(yǎng)極易分化或喪失正常二倍體核型，必須進行分化抑制培養(yǎng)。采用飼養(yǎng)層抑制物 ：選用 STO（ 小鼠胎兒成纖維細胞） 、 UE（ 子宮上皮細胞） 等細胞以絲裂霉素 C阻斷有絲分裂后制備成細胞單層。使用條件培養(yǎng)基 ：飼養(yǎng)單層細胞培養(yǎng)一定時間后，收集細胞培養(yǎng)液，處理后加入培養(yǎng)基中 。或直接向基本培養(yǎng)基中添加細胞分化抑制因子 LIF(白血病抑制因子 )。 ：內(nèi)細胞團（ ICM)細胞，經(jīng)消化、分散后，進行抑制分化培養(yǎng)，獲得 ES細胞；擴增培養(yǎng)，建立細胞系， 2天換液一次， 3－ 4天繼代一次。（ 3） .培養(yǎng)和誘導分化? ES細胞培養(yǎng) 方法和分化抑制培養(yǎng)相似，采用飼養(yǎng)層培養(yǎng)法和無飼養(yǎng)層培養(yǎng)法。? 誘導分化：加入一些無機物或有機酸等，使胚胎細胞滲透壓改變導致輕度損傷，誘導細胞分化。加入類固醇激素、多肽因子等誘導物與被誘導細胞表面受體結合而誘導分化。誘導分化得到特定的細胞和組織，在組織、器官修復和基因治療方面具有重要應用。? （ 1）應用干細胞 治療疾病 有著廣泛的前景。　　目前，在干細胞生物學上已能在體外鑒別、分離純化、擴增和培養(yǎng)人體胚胎干細胞、原始生殖干細胞以及多種組織干細胞。 用干細胞治療疾病的設想已進入實踐檢驗。造血干細胞工程 產(chǎn)品如骨髓、擴增及定向誘導分化的造血細胞和免疫細胞、轉基因的基質(zhì)細胞等，已經(jīng)進入臨床應用。 造血干細胞移植已成為治療白血病、各種惡性腫瘤放、化療后引起的造血和免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病的重要手段。（ 2）干細胞為解決 組織工程所需要的細胞 帶來了希望?！　〗M織工程用來修補由于意外損傷等引起功能喪失的體內(nèi)組織，滿足臨床康復的需要，并有可能對一些目前尚無根治辦法的疾病，如惡性腫瘤、帕金森病、中風等提供解決方案。 以干細胞工程為代表的現(xiàn)代組織工程是一個迅速發(fā)展的新領域 。干細胞的產(chǎn)生及進行組織修復產(chǎn)生人胚胎干細胞的胚泡 胚胎干用病人的 體細胞移植 到 去核的卵母 細胞內(nèi)，經(jīng)過一定的處理使其發(fā)育成囊胚，再利用囊胚建立細胞，在體外進行誘導分化成特定的組織或器官，再將這些組織或器官移植到病人身上。 利用干細胞技術，將從根本上解決同種異體器官移植過程中最難的 免疫排斥反應 問題，同時還較好地解決了 組織器官的來源 問題。（ 3）利用干細胞技術 體外克隆人體器官 用于移植治療。　　? （ 4）干細胞研究將大大 改進藥品研制和進行安全性實驗 的方法?！　⌒碌乃幬镏委煼椒梢韵扔萌祟惣毎颠M行實驗，如癌細胞系。 胚胎干細胞提供了新藥的藥理、藥效、毒理及藥物代謝等細胞水平的研究手段，大大減少了藥物實驗所需動物的數(shù)量。 胚胎干細胞還可用來研究人類疾病的發(fā)生機制和發(fā)展過程，以便找到持久有效的治療方法。干細胞技術治療疾病要解決 4個問題：一、 來源 ：研究發(fā)現(xiàn)脂肪中一些細胞可發(fā)育成健康組織，可能代替從胚胎組織或骨髓中提取干細胞；二、如何把干細胞轉化成病人所需的功能細胞；三、如何克服免疫排斥；四、如何誘導干細胞形成一個具有一定解剖結構的臟器。 此外，還存在一些倫理道德上的爭論。 干細胞的研究和應用的難點第四章 動物細胞與組織培養(yǎng)一、發(fā)展史二、動物細胞的特點三、動物細胞培養(yǎng)方法四、影響動物細胞生長的環(huán)境因素五、動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)六、組織工程七、器官培養(yǎng)八、干細胞章160