線粒體相關(guān)研究ppt課件-資料下載頁
2025-01-15 07:39本頁面
【正文】 信號 ， 送入計算機處理 ， 輸出統(tǒng)計結(jié)果 ， 并可根據(jù)這些性質(zhì)分選出高純度的細胞亞群 ， 分離純度可達 99%。 包被細胞的液流稱為鞘液 ， 所用儀器稱為流式細胞計 （ flow cytometer） 。 三、細胞電泳 ? 原理：在一定 PH值下細胞表面帶有凈的正或負電荷 ， 能在外加電場的作用下發(fā)生泳動 。 ? 各種細胞或處于不同生理狀態(tài)的同種細胞荷電量有所不同 ，故在一定的電場中的泳動速度不同 。 ? 用途：檢測細胞生理狀態(tài)和病理狀態(tài) 、 分離不同種類的細胞 ， 如分離哺乳動物的 XY精子 。 第四節(jié) 細胞培養(yǎng)與細胞雜交 一、細胞培養(yǎng) （一）動物細胞培養(yǎng) ? 群體培養(yǎng) （ mass culture） ：將含有一定數(shù)量細胞的懸液置于培養(yǎng)瓶中 ， 讓細胞貼壁生長 ， 匯合 （ confluence） 后形成均勻的單細胞層； ? 克隆培養(yǎng) （ clonal culture） ：培養(yǎng)高度稀釋的細胞懸液 ，細胞貼壁生長 ， 每一個細胞形成一個細胞集落 ， 稱為克隆 。 – 轉(zhuǎn)鼓培養(yǎng)法：為制取細胞產(chǎn)品而設(shè)計 ， 大容量旋轉(zhuǎn)培養(yǎng) ， 使培養(yǎng)的細胞始終處于懸浮狀態(tài)之中 。 ? 原代培養(yǎng) （ primary culture） ：即：培養(yǎng)直接來自動物機體的細胞群 ， 將細胞從一個培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到另外一個培養(yǎng)瓶稱為傳代或 傳代培養(yǎng) （ Passage） 。 ? 細胞株 （ cell strain） ：從原代培養(yǎng)細胞群中篩選出的具有特定性質(zhì)或標志的細胞群 。 ? 細胞系 （ cell line） ：從腫瘤組織培養(yǎng)建立的細胞群或培養(yǎng)過程中發(fā)生突變或轉(zhuǎn)化的細胞 ， 可無限繁殖 。 ? 克隆 （ clone） ：亦稱無性系 。 指由同一個祖先細胞通過有絲分裂產(chǎn)生的遺傳性狀一致的細胞群 。 表三、實驗室中常用的幾種細胞系 細胞系名稱 細胞類型 來源 3T3 成纖維細胞 小鼠 HeLa 宮頸癌上皮細胞 Henrietta Lacks BHK21 成纖維細胞 敘利亞倉鼠 PtKl 上皮細胞 袋鼠 L6 成肌細胞 大鼠 PCI2 嗜鉻細胞 大鼠 SP2 漿細胞 小鼠 SP2／ 0 骨髓瘤漿細胞 小鼠 CHO 卵巢細胞 中國地鼠 Henrietta Lacks, American black ,died of cancer of uterine cervix in 1951 （二）植物細胞培養(yǎng) 1. 外植體培養(yǎng) ：誘發(fā)產(chǎn)生愈傷組織。用于研究植物的生長發(fā)育、分化和變異；進行無性繁殖；制取代謝產(chǎn)物。 2. 懸浮細胞培養(yǎng) ：適合于進行產(chǎn)業(yè)化大規(guī)模細胞培養(yǎng)，制取植物代謝產(chǎn)物。 3. 原生質(zhì)體培養(yǎng) ：培養(yǎng)脫壁后的細胞，特點： – ①比較容易攝取外來的遺傳物質(zhì)，如 DNA； – ②便于進行細胞融合，形成雜交細胞； – ③適宜條件下可產(chǎn)生細胞壁，經(jīng)誘導(dǎo)分化成完整植株。 4. 單倍體培養(yǎng) ：通過花藥或花粉培養(yǎng)可獲得單倍體植株。 Plant Cell Culture Animal Cell Culture 二、細胞融合 ? 通過培養(yǎng)和介導(dǎo) ， 兩個或多個細胞合并成一個雙核或多核細胞的過程稱為細胞融合 （ cell fusion） 或細胞雜交 。 ? 同核體 ：相同基因型的細胞融合而成 。 ? 異核體： 不同基因型的細胞融合而成 。 ? 自發(fā)融合： 同種細胞在培養(yǎng)過程中自發(fā)合并的現(xiàn)象 。 ? 誘發(fā)融合： 異種間的細胞必須經(jīng)誘導(dǎo)劑處理才能融合 。 ? 誘導(dǎo)細胞融合的方法： 生物方法 （ 仙臺病毒 、 副流感病毒和新城雞瘟病毒 ） 、 化學(xué)方法 （ 聚乙二醇 PEG） 、 物理方法 （ 電擊和激光 ） 。 ?單克隆抗體技術(shù) ?正常淋巴細胞 （ 如小鼠脾細胞 ） 具有分泌抗體的能力 ， 但不能長期培養(yǎng) ， 瘤細胞 （ 如骨髓瘤 ） 可以在體外長期培養(yǎng) ， 但不分泌抗體 。 于是英國人 Kohler和 Milstein 1975將兩種細胞雜交而創(chuàng)立了單克隆抗體技術(shù) ， 獲 1984年諾貝爾獎 。
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1