抗抑郁藥r-托莫西汀中間體s-3-氯-1-苯丙醇的生物合成-資料下載頁(yè)
2025-01-14 10:41本頁(yè)面
【正文】 T e m p e ra t u re (0C)Yield or e.e.(%) Y i e l d e . e .3 4 5 6 7 8 9 100 .02 0 .04 0 .06 0 .08 0 .01 0 0 .0Yield or e.e.(%)pH Y i e l d e . e .水 /有機(jī)溶劑兩相體系中的不對(duì)稱(chēng)還原 圖 21 不同緩沖液濃度對(duì)還原的影響 Buffer Yield(%) .(%) Control Tris鹽酸 Tris乙酸 Tris硼酸 Tris磷酸 Tris甘氨酸 表 7 緩沖體系的選擇 0 50 100 150 2000 .02 0 .04 0 .06 0 .08 0 .01 0 0 .0Yield or e.e.(%)Buf f e r co n ce n t ra t i o n (m m o l / L ) Y i e l d e . e .水 /有機(jī)溶劑兩相體系中的不對(duì)稱(chēng)還原 圖 22 不同振搖速度對(duì)還原的影響 100 150 200 250 3000 .02 0 .04 0 .06 0 .08 0 .01 0 0 .0Yield or e.e.(%)Sha k i n g ra t e (r/ m i n ) Y i e l d e . e .水 /有機(jī)溶劑兩相體系中的不對(duì)稱(chēng)還原 圖 23 兩相體系不對(duì)稱(chēng)還原的時(shí)間進(jìn)程 在水 /正己烷兩相體系中，酵母細(xì)胞的催化活性保持時(shí)間較長(zhǎng)；但相比與單一水相體系，即使在較高的底物濃度下，兩相體系中的催化速率仍較低。 0 10 20 30 40 50 60 70 800 .02 0 .04 0 .06 0 .08 0 .01 0 0 .0Yield or e.e.(%)T i m e (h ) e . e . i n b i p h a si c sy st e m y i e l d i n b i p h a si c sy st e m y i e l d i n m o n o p h a si c a q u e o u s sy st e m底物濃度 15 mmol/L 底物濃度 20 mmol/L 水 /有機(jī)溶劑兩相體系中的不對(duì)稱(chēng)還原 ?水 /正己烷兩相體系中加入離子液體對(duì)反應(yīng)的影響 加入不同種類(lèi)的離子液體對(duì)酶的立體選擇性影響較小。但離子液體會(huì)對(duì)還原產(chǎn)率產(chǎn)生不利影響。 主要結(jié)論 ?篩選到一株對(duì) 3氯 1苯丙酮具有良好的不對(duì)稱(chēng)還原能力的酵母 FU5，初步鑒定為釀酒酵母。 ?在單一水相體系中，當(dāng)?shù)孜餄舛葹?15 mmol/L，反應(yīng) 20 h后，產(chǎn)率達(dá)到 65%， 98%。研究顯示，體系中不存在底物抑制與產(chǎn)物抑制，但產(chǎn)物毒性限制了產(chǎn)率的提高。 ?在水相體系中，適當(dāng)濃度的添加物（ Tween 80和 β環(huán)糊精）可提高產(chǎn)率：當(dāng)反應(yīng)體系中 Tween 80濃度為 mmol/L， β環(huán)糊精濃度為 mmol/L時(shí)，產(chǎn)率從對(duì)照組的 %分別提高到 %和 %。說(shuō)明同時(shí)具有包結(jié)作用和改善細(xì)胞膜滲透性的 Tween80提高產(chǎn)物得率的效果優(yōu)于僅具有包結(jié)作用的 ?環(huán)糊精。但對(duì)于產(chǎn)物 ，兩種包結(jié)物對(duì)其基本無(wú)影響。 主要結(jié)論 ?在水 /正己烷兩相體系中，經(jīng)過(guò)條件優(yōu)化，當(dāng)?shù)孜餄舛葹? 20 mmol/L時(shí)，產(chǎn)率和 84%和 98%。相比于單一水相體系，兩相體系可使底物濃度和產(chǎn)率得到大幅提高。 ?不同的反應(yīng)體系對(duì)酵母細(xì)胞膜完整性影響較小，但會(huì)影響細(xì)胞膜的流動(dòng)性。 ?所考察的 9種離子液體對(duì)酵母細(xì)胞中酶的立體選擇性影響較小，但產(chǎn)率均有所下降。
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