【正文】 從水或稀乙醇中結(jié)晶所得的小檗堿為黃色針狀結(jié)晶，含 ，在 100℃ 干燥后仍保留 ，加熱至 110℃ 變?yōu)樽攸S色， 160℃ 分解。鹽酸小檗堿為黃色小針狀結(jié)晶，在 220℃ 左右分解，形成小檗紅堿（紅棕色），在 285℃ 左右完全熔融。 小檗堿能緩溶于冷水（ 1﹕ 20），易溶于熱水和熱乙醇，難溶于丙酮、氯仿和苯等。小檗堿和酸結(jié)合成鹽，其鹽類在水中的溶解度見表 15。 N + N +OOO C H 3O C H 3OO C H 3O C H 3c l O△2 2 0 ℃? ? 小檗堿與大分子有機酸結(jié)合成的鹽在水中的溶解度很小，所以，當(dāng)黃連與甘草、大黃和黃芩等配伍時，能和甘草酸、大黃鞣質(zhì)、黃芩苷形成難溶于水的化合物而沉淀析出，這是在中藥制劑過程中需要注意的問題。 ? 小檗堿屬季銨型生物堿，可離子化而顯強堿性。小檗堿通常以季銨型狀態(tài)存在，能溶于水，水溶液呈強堿性（ pKa=），溶液為紅棕色。如果在水溶液中加入過量的堿，可抑制季銨離子的解離，使其部分轉(zhuǎn)變?yōu)槿┦交虼际剑芤阂沧兂闪俗厣螯S色。醇式或醛式小檗堿具有親脂性，可溶于親脂性有機溶劑。 ? 季銨式 (紅棕色 ) 醇式（黃色） 醛式（黃色） ? 小檗堿的三種互變異構(gòu)體 N +N : N H C H OOOOOOOO C H 3O C H 3O C H 3O C H 3O C H 3O C H 3O HO H 四 知識拓展 1．黃連中小檗堿的提取分離 黃 連 粗 粉乙 醇 溫 浸 ， 濃 縮乙 醇 濃 縮 液放 置 、 濾 過濾 液加 濃 H C l 、 放 置黃 色 沉 淀酸 性 母 液水 重 結(jié) 晶 數(shù) 次N H4 O H 堿 化 ， 乙 醚 處 理鹽 酸 小 檗 堿 堿 水 液加 H2 S O4 ， 濾 過濾 液黃 色 沉 淀冷 乙 醇 溶 解乙 醇 液加 少 量 H2 S O4，甲 基 黃 連 堿 硫 酸 鹽 結(jié) 晶2．黃柏中小檗堿的提取分離 黃 柏 粗 粉加 石 灰 水 攪 拌 均 勻 ， 浸 泡 ， 滲 濾滲 濾 液加 入 7 % 的 氯 化 鈉 ， 攪 拌 后 放 置 過 夜 ， 濾 過濾 液 沉 淀熱 水 溶 解 ， 趁 熱 濾 過濾 液 沉 淀加 鹽 酸 調(diào) p H 2 , 放 置 過 夜 ， 濾 過濾 液 沉 淀水 洗 至 中 性 ， 抽 干 后 ， 3 0 ℃ 干 燥鹽 酸 小 檗 堿 粗 品加 入 沸 水 中 溶 解濾 液沉 淀加 熱 至 澄 清 后 ， 加 入 酸 調(diào) p H 2 ， 攪 拌 后 放 冷 ， 抽 濾濾 液沉 淀洗 至 剛 果 紅 試 劑 不 變 色 為 止 ，8 0 ℃ 以 下 干 燥鹽 酸 小 檗 堿 精 品五 課 堂 互 動 ? 任務(wù)五 烏頭中生物堿類成分的提取分離技術(shù) 學(xué)習(xí)目標(biāo) 一 二 三 烏頭中總生物堿的提取分離技術(shù) 必備知識 五 四 六 相關(guān)知識鏈接及拓展 課堂互動 目標(biāo)測試 一 學(xué)習(xí)目標(biāo) 2 掌握烏頭堿、次烏頭堿的提取、分離技術(shù)。 熟悉烏頭中生物堿的結(jié)構(gòu)及主要理化性質(zhì)。 了解烏頭中生物堿的提取分離新進展。 知識要求 3 能力要求 1 掌握烏頭中生物堿的提取分離原理及操作技術(shù)。 熟練進行烏頭 中生物堿類化合物的提取、分離及鑒定操作。 學(xué)會烏頭 中生物堿類化合物 的色譜鑒定技術(shù) 。 學(xué)習(xí)目的 二 烏頭中生物堿類化學(xué)成分的提取分離技術(shù) 烏頭為毛莨科植物烏頭的干燥母根。烏頭味辛、苦，性熱，有大毒，具有祛風(fēng)除濕、溫經(jīng)止痛的功效，是臨床常用的重要中藥?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，烏頭的主要有效成分即烏頭生物堿具有鎮(zhèn)痛、消炎、麻醉、降壓及對心臟產(chǎn)生刺激等作用。 烏頭中生物堿的提取分離工藝流程 川 烏 根 粉1 0 % N a2C O3潤 濕 ， 冷 苯 浸 泡 一 周苯 浸 出 液2 % H C l溶 液 萃 取苯 層 酸 水 層氯 仿 萃 取沉 淀堿 水 層氨 水 堿 化 ， 放 置 ， 過 濾水 洗 ， 干 燥氯 仿 萃 取粗 提 物氯 仿 層蒸 干氯 仿 提 取 物合 并2 % H C l溶 解 ， 過 濾不 溶 物酸 水 液酸 水 層氯 仿 層蒸 干 氯 仿 ， 稀 H C l溶 解氨 水 堿 化 ， 乙 醚 萃 取乙 醚 液蒸 干乙 醚 提 取 物烏 頭 次 堿烏 頭 堿 美 沙 烏 頭 堿氧 化 鋁 柱 層 析 分 離 ， 乙 醚 洗 脫（二） 烏頭中生物堿的性質(zhì) （一）烏頭中生物堿主要有效成分及結(jié)構(gòu) 三 必備知識 （一）烏頭中主要有效成分及結(jié)構(gòu) 烏頭主要含二萜類生物堿，屬于四環(huán)或五環(huán)二萜類衍生物。其中以烏頭堿和烏頭次堿為主要成分。其結(jié)構(gòu)如下 ： H OO HO C H3NH5C2H2CO C H3O C H3O HO C OO HO C H3H O OH3C OO C H3NH5C2H2CO C H3O C H3O HO C OO HO C H3烏 頭 堿 烏 頭 次 堿 （二）烏頭生物堿的理化性質(zhì) 烏頭生物堿均有完好的結(jié)晶形態(tài)。其中烏頭堿熔點 198℃ ；烏頭次堿熔點 187℃ 。烏頭堿為雙酯型生物堿，有麻辣味，毒性極強，是烏頭的主要毒性成分，若將其雙酯結(jié)構(gòu)經(jīng)水解生成烏頭原堿（醇胺結(jié)構(gòu)），則無毒性。這就是把烏頭經(jīng)水浸、加熱使烏頭堿等雙酯型堿水解的炮制原理。在烏頭及其方劑、中成藥中，對劇毒的雙酯型生物堿須進行限量檢查。 烏頭中主要的二萜類生物堿易溶于無水乙醇、氯仿、乙醚、苯等有機溶劑，難溶于水。烏頭堿等雙酯型生物堿脂性較強；烏頭次堿和烏頭原堿由于酯鍵被水解，親脂性較弱。 3．堿性 烏頭堿、美沙烏頭堿、烏頭次堿等生物堿分子中含一個呈叔胺狀態(tài)的氮原子，因此它們具一般叔胺堿的堿性，能與酸成鹽。 四 知識鏈接與拓展 色譜法 分類 吸附色譜的操作技術(shù) 吸附色譜的三要素 按原理分類 按流動相分類 按操作形式分類 吸附劑 展開劑 被分離成分 按原理分類 ? 吸附色譜 ? 分配色譜 ? 離子交換色譜 ? 凝膠過濾色譜 按操作形式分類 ? 平面色譜 ? 柱色譜 ? 毛細(xì)管電泳色譜 按流動相分類 ? 液相色譜 ? 氣相色譜 ? 超臨界流體色譜 三要素 —— 基本要求： 吸附劑要有較大的表面積和適宜的活性；與移動相溶劑及被分離各成分不起化學(xué)反應(yīng)；顆粒均勻；并且在所用各種溶劑中不溶解。 種類： 親水性吸附劑：氧化鋁、硅膠、聚酰胺、氧化鎂、硅酸鎂、碳酸鈣和硅藻土等。 親脂性吸附劑：活性炭。 常用吸附劑： （ 1）硅膠 為極性吸附劑。吸附機理是與化合物形成氫鍵。極易吸水，含水量在 17%以下才能作為吸附劑?；罨瘻囟纫话阍?100℃ ～ 120℃ 。硅膠顯弱酸性，適用于中性或酸性成分的分離。（ 2）氧化鋁 為極性吸附劑，吸附能力比硅膠稍強。色譜用氧化鋁有堿性（ ）、中性 ()和酸性 ()三種。 吸附劑的活化 :在一定溫度下加熱去除水分提高吸附劑的吸附能力，使其活性增高的過程稱為。 脫活化 :在吸附劑中加入一定量的水分，降低其活性的過程稱為。 活性級別 :吸附劑的活性根據(jù)含水量的多少分為 5個 級別 （ Ⅰ 級、 Ⅱ 級、 Ⅲ 級、Ⅳ 級和 Ⅴ 級）。 種類： 包含親脂性和親水性有機溶劑以及水。 解吸附能力： 展開劑解吸附能力的大小與選擇展開劑的極性和被分離成分德極性有關(guān)。 以親水性溶劑為吸附劑，則被分離成分極性大的被吸附牢固，解吸附就困難，色譜中展開的速度就慢。 化合物極性大小判斷的原則： 分子中母核相同，極性基團越多，極性越大；分子中雙鍵及共軛雙鍵越多，極性越大；同系物中，分子量越小，極性越大；在同一母核中不能形成分子內(nèi)氫鍵的化合物比能形成分子內(nèi)氫鍵的化合物的極性大。 鋪 板 點 樣 展 開 顯色與定位 計算比移值 薄層色譜的操作技術(shù)流程 學(xué) 習(xí) 小 結(jié) （一）學(xué)習(xí)內(nèi)容 生物堿類化合物 提取分離 提取、分離 結(jié)構(gòu)測定 理化性質(zhì) 性狀、溶解性、旋光性、堿性 結(jié)構(gòu)類型 生物堿類 應(yīng)用實例 紫外、紅外、核磁、質(zhì)譜 麻黃、防己、洋金花、三棵針、烏頭 檢識反應(yīng) 顯色反應(yīng) 、 色譜檢識 （二）學(xué)習(xí)方法與體會 ? 生物堿的學(xué)習(xí)，應(yīng)遵循“共性 → 個性”的認(rèn)知規(guī)律，通過分析生物堿類化合物的結(jié)構(gòu)特點，總結(jié)出該類成分的理化性質(zhì)，進而分析每一種生物堿類成分獨特的提取分離 方法和技術(shù)． 六 目 標(biāo) 檢 測 一、 A型題 __。（ 取法 酸水 堿化 氯仿提取法 酸水 堿化 雷氏銨鹽沉淀法） __。（ C.弱堿 ） __。（ 取法 ） ，加堿調(diào)由低到高，每調(diào)一次用氯仿萃取一次，首先得到的是 ___。（ 堿 ） ，用不同 pH（由高到低）緩沖液依次萃取，最后萃取出的生物堿是 ___生物堿。（ 堿性的） ，樣品應(yīng)先配成 ___。（ ） TLC顯色劑是 ___。（ ） TLC分離生物堿，化合物的 Rf值大小取決于 ___。（ ） N甲基麻黃堿可用 ___。（ 堿性硫酸銅反應(yīng)） 二、 X型題 ___。（ 法 ） ___。（ 萃取 ） 三、比較 Rf值的大小 吸附劑：硅膠 展開劑：氯仿 甲醇 氨水（ 7︰ 1︰ ） （ 1）苦參堿（ A）與氧化苦參堿（ B）： ___﹥___ （ 2）漢防己甲素（ A）與漢防己乙素（ B）： ___﹥___ （ 3）莨菪堿（ A）與東莨菪堿（ B）： ___﹥___ CH3N+HCOO(A)NCH3(B)N(C)ON(D)N NC H 3 C H 3ON H C H 3O123N C H 3 O COC H C 6 H 5C H 2 O HN C H 3 O COC 6 H 5C O O C H 3N +C H 2H OH 3 C O C H 3C H 3O HN HC H 2H OH OO H 四、比較堿性大小 1. 2． A B ３ . A B ４ . A 小檗堿 B 秋水仙堿 C 莨菪堿 D 東莨菪堿 ５ .