層析和膜技術在生物制藥中的應用(2)-資料下載頁
2025-01-13 22:17本頁面
【正文】 以特殊的超濾膜為分離介質，以膜兩側的壓力差為推動力將不同分子量的物質進行選擇性分離。 ? 超濾膜的最小截留分子量為 500道爾頓，在生物制藥中可用來分離蛋白質、酶、核酸、多糖、多肽、抗生素、病毒等。 超濾技術 ?優(yōu)點：沒有相轉移，無需添加任何化學物質，可以在低溫下操作，過濾速度較快，便于做無菌處理，分離操作簡便，避免生物活性物質的活力損失和變性。 ?用途：①大分子物質的脫鹽和濃縮； ②小分子物質的純化； ③大分子物質的分級分離； ④生化制劑或其他制劑的去熱原處理。 超濾技術的應用 ?濃縮和脫鹽 優(yōu)點是不消耗試劑，無相轉移，可在低溫下進行，濃縮的同時還可脫掉鹽和其他小分子雜質。 ?脫鹽方法： （ 1）稀釋超濾法 鹽離子等小分子雜質隨溶劑（水）不斷透過濾膜而去，當濃縮到一定濃度時再加入溶劑至原體積，如此反復多次，絕大部分小分子物質可被除去。 （ 2）滲濾法脫鹽 原理與稀釋法相同。 超濾的應用 ? 分級分離與純化 如右圖所示，按分子量截留值由大而小串聯(lián)幾個超濾器，各自保持一定體積，用 1020倍體積的緩沖液逐級洗下，不同分子量物質相應下移，在各濾器中獲得不同分子量范圍的組分，從而使大分子量得到分離和純化，同時也進行了濃縮。 超濾的應用 ?除菌 超濾是一種很好的冷滅菌法，適合于不能高壓消毒滅菌的生化產(chǎn)品； ?去熱原 適合一些分子量較小的生物藥物的去熱原； 超濾的應用 ?超濾與酶反應器聯(lián)用 ?使分解產(chǎn)物生成后立即與底物分離，提高底物利用率，減少酶用量，提高酶促反應速度。 微孔膜過濾 ?微孔膜過濾又稱 “ 精密過濾 ” ，是最近 20多年發(fā)展起來的一種薄膜過濾技術。 ?主要用于分離亞微米級顆粒，是目前應用最廣泛的一種分離分析微細顆粒和超凈除菌的手段。 ?優(yōu)點：（ 1）設備簡單； （ 2）操作簡便、快速； （ 3）分離效率高，重現(xiàn)性好； （ 4）一些微孔濾膜具有結合生物大分子的特殊能力。 微孔濾膜過濾的應用 ? 藥液中微粒及細菌的濾除 靜脈注射若受微粒及細菌的污染，對人體危害性很大。 微孔濾膜過濾在制藥工業(yè)中對于濾除藥液中微粒、微生物和檢測藥液的質量是不可缺少的保證手段。 ?抗生素的無菌檢驗 ?空氣凈化處理 微孔濾膜過濾的應用 抗生素的無菌檢驗 ? 用微孔膜過濾進行無菌檢驗比常規(guī)法（直接接種法）采樣容量大、簡便、快速、靈敏度高，并可避免抗生素本身的抑菌作用。 ? 方法 : 取樣，加無菌生鹽稀釋，置于已滅菌的濾膜、濾器上，抽濾。抽濾完畢后，將濾膜置于盛培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，一定時間后，觀察濾膜上的菌落生長情況。（培養(yǎng)基分需氣菌、厭氣菌培養(yǎng)基） ? 藥典收載的二個方法： (1)直接接種法 用青霉素酶加入抗生素樣品中，消除抗生素的抗菌。 (2)薄膜過濾法 分別進行陽性對比、陰性對比試驗。 祝大家國慶節(jié)快樂 ! 再見 !
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