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基因克隆的一般流程-資料下載頁

2025-01-12 12:46本頁面
  

【正文】 Liner vector 50100 ng Target gene fragment 15 30 ng 10 Ligase Buffer (已含有 ATP) ?l T4 DNA Ligase ?l ? 輕輕混勻 , 稍加離心 , 1416℃ 或 4℃ ,O/N 。 重組子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞 ? 體外重組的 DNA引入受體細(xì)胞 ? 感受態(tài) :受體細(xì)胞處于易于接受外源 DNA 的狀態(tài) ? 原理 :( 1)遺傳物質(zhì)的傳遞 ( 2)受體菌的選擇與改造 重組質(zhì)粒的酶切鑒定 重組子的鑒定 ? 插入片段長度大小鑒定 質(zhì)粒抽提、酶切; PCR ? 插入片段方向性鑒定 可以選擇基因內(nèi)部切點(diǎn)進(jìn)行不對(duì)稱酶切 ? DNA序列測定 熒光質(zhì)粒轉(zhuǎn)染觀察
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