【導讀】蕆羈羇薇蕿螃芅薆螂罿芁薅襖袂膇薄薄肇肅薃蚆袀莂薃螈肆羋螞袁袈膄蟻薀肄肀芇蚃袇羆芆裊肂莄芆薅羅芀芅蚇膀膆芄蝿羃肂芃袁螆莁節(jié)薁羈芇莁蚃螄膃莀螆羀聿莀薅螃肅荿蚈肈莄莈螀袁芀莇袂肆膆莆薂衿肂蒅蚄肅羈蒄螇袇芆蒄蒆肅膂蒃蠆袆膈蒂螁膁肄蒁袃羄莃蒀薃螇艿葿蚅膅蕿螇螅肁薈蕆羈羇薇蕿螃芅薆螂罿芁薅襖袂膇薄薄肇肅薃蚆袀莂薃螈肆羋螞袁袈膄蟻薀肄肀芇蚃袇羆芆裊肂莄芆薅羅芀芅蚇膀膆芄蝿羃肂芃袁螆莁節(jié)薁羈芇莁蚃螄膃莀螆羀聿莀薅螃肅荿蚈肈莄莈螀袁芀莇袂肆膆莆薂衿肂蒅蚄肅羈蒄螇袇芆蒄蒆肅膂蒃蠆袆膈蒂螁膁肄蒁袃羄莃蒀薃螇艿葿蚅膅蕿螇螅肁薈蕆羈羇薇蕿螃芅薆螂罿芁薅襖袂膇薄薄肇肅薃蚆袀莂薃螈肆羋螞袁袈膄蟻薀肄肀芇蚃袇羆芆裊肂莄芆薅羅芀芅蚇膀膆芄蝿羃肂芃袁螆莁節(jié)薁羈芇莁蚃螄膃莀螆羀聿莀薅螃肅荿蚈肈莄莈螀袁芀莇袂肆膆莆薂衿肂蒅蚄肅羈蒄螇袇芆蒄蒆肅膂蒃蠆袆膈蒂螁膁肄蒁袃羄莃蒀薃螇艿葿蚅膅蕿螇螅肁薈蕆羈羇薇蕿螃芅薆螂罿芁薅襖袂膇薄薄肇肅

　　

【正文】 在化學上呈惰性。 不具 有與溶質(zhì)、溶劑起作用的基團。 （ 3） 有良好的物理性能。包括一定的強度和柔韌度，不易破裂，有良好的再生性能，便于多次重復使用。 透析裝置的類型：（ 1）旋轉(zhuǎn)透析器 （ 2）平面透析器 （ 3）連續(xù)透析器 （ 4）淺流透析器 克服濃差極化現(xiàn)象的措施： 克服極化的主要措施有振動、攪拌、錯流、切流等技術(shù)，但應(yīng)注意過于激烈的措施易使蛋白質(zhì)等生物大分子變性失活。此外，將某種水解酶類固定于膜上，能降解造成極化現(xiàn)象的大分子，提高流速。不過這種措施沒有通用性，只適用于一些特殊情況。 實驗用超濾器的類型： （ 1） 無攪拌式裝置 （ 2）攪拌或振動 式裝置 （ 3）小棒超濾器 （ 4）淺道系統(tǒng)超濾裝置 膜孔徑檢測技術(shù)： （ 1）氣泡壓力法 D=4Kσ cosθ /P 修正為： D=4 σ /P （ 2）水流量法：將濾膜以蒸餾水完全潤濕，裝于濾器中，下接抽氣瓶。開動真空泵，使壓力穩(wěn)定于 700mmHg 柱，然后加入潔凈蒸餾水100ml，記錄下抽濾 100ml水所需要的時間。 計算孔徑： r= GPtVSK水 (其中 r—— 濾膜孔隙半徑， cm。 K——。 S—— 膜的厚度， mm。 V—— 蒸 餾水體積， ml。 G—— 干濕膜重量差， g。 P—— 壓力差， dyn/cm2 。 t—— 時間， s。 ) （ 3）細菌過濾法 超濾技術(shù)及優(yōu)點。 超濾技術(shù)是一項分子級薄膜分離手段。它以特殊的超濾膜為分離介質(zhì)，以膜兩側(cè)的壓力差為推動力，將不同分子量的物質(zhì)進行選擇性分離。 優(yōu)點：沒有相轉(zhuǎn)移，無需舔加任何強烈化學物質(zhì)，可以在低溫下操作，過濾速度較快，便于做無菌處理等。使分離操作簡化，避免生物活性物質(zhì)的活力損失和變性。 7 術(shù)語 超濾：以特殊的超濾膜為分離介質(zhì)，以膜兩側(cè)的壓力差為 推動力，將不同分子量的物質(zhì)進行選擇性分離?？紫堵剩何⒖诪V膜孔隙總體積與濾膜總體積之比各向異性膜：在厚度方向上物質(zhì)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)不同的膜。濃度極化現(xiàn)象：超濾在外壓作用下進行。外源壓力迫使分子量較小的溶質(zhì)通過薄膜，而大分子被截留于膜表面，并逐漸形成濃度梯度。水流量法：將濾膜以蒸餾水完全潤濕，裝于濾器中，下接抽氣瓶。開動真空泵，使壓力穩(wěn)定于 700mmHg 柱，然后加入潔凈蒸餾水 100ml，記錄下抽濾 100ml水所需要的時間。氣泡壓力法：在多孔板上加 3~5mm深的水或 其他液體。在容器處于密封狀態(tài)下引入壓縮空氣，使桶內(nèi)壓力 緩慢上升。 當膜面出現(xiàn)第一個氣泡，記下壓力計讀數(shù)，將此壓力換算成 dyn/cm2 ,進行計算。 第十二章 制備高效液相色譜 HPLC 的組成部分：進樣器、高壓泵、預(yù)柱、色譜柱、柱頭、檢測器 理論塔板數(shù)及分離度的計算公式：理論塔板數(shù) N ：)2(21ttN R?? 分離度 Rs : ? ?21 21 )()(21 bb RRs WWttR??? 制備型高效液相色譜的重要參數(shù) ： 分離度（ resolution）、分離速度（ speed）、回收率（ recovery）、樣品容量（ capacity） 主要考慮樣品容量、回收率、和產(chǎn)率。 蛋白質(zhì)分離的依據(jù)：蛋白質(zhì)的疏水性、分子的大小、等電點。 色譜介質(zhì)按分離機理分為： 液固色譜、鍵合相色譜、離子交換色譜、離子交換色譜、離子對色譜、凝膠色譜、疏水色譜、親和色譜、聚焦色譜、金屬螯合親和色譜 制備型 HPLC與分析型 HPLC的主要不同點 參數(shù) 分析型 制備型 柱內(nèi)徑（ mm） 2~5 10 柱填料 10μ m 全多孔或30μ m 薄殼型 50μ m全多孔 流動相流速（ ml/min） ~1 10 流動相線速度（ cm/s） ~1 ~ 樣品體積（μ l） 200 1000 要求的檢測靈敏度 高 低 注射的樣品量（ mg） 100 術(shù)語 塔板理論：塔板理論把色譜柱看作一個分餾塔，有如下基本假設(shè)： （ 1） 色譜柱是由一系列連續(xù)、等距的水平塔板組成。在柱內(nèi)每層塔板內(nèi)部，組成能夠在流動相和固定相中達到平衡。 （ 2） 流動相通過色譜柱呈間歇式前進運動，每次前進為一個塔板體積。 （ 3） 樣品和流動相同時加在第一個塔板上，且 樣品垂直于前進方向的擴散（縱向擴散）可以忽略。 （ 4） 分配系數(shù)在各塔板上是常數(shù)。 速率理論：在低流速時增加流速，峰變銳，柱效增加；當超過一定流速時峰變鈍，柱效降低。用塔板高度 H 對載氣流量μ作圖為二次曲線，曲線最低點對應(yīng)的塔板高度最小，柱效最高，此時流速為最佳流速（ 最佳? ）其數(shù)學表達式為 H=A+B/μ +Cμ 容量因子：溶質(zhì)在固定相中的總摩爾數(shù)與流動相中的總摩爾數(shù)之比。00t ttk R ??? 選擇因子：表示柱對難分離物質(zhì)的選擇性的好壞。12???kk? 綜合表達式： 212211(41 NkkR s ））（ ?? ??? ?? 第十三章 生化藥物 生化藥物的特點及主要資源。 (主要資源：（ 1）氨基酸類藥物 （ 2）多肽與蛋白質(zhì)類 （ 3）核酸類藥物 （ 4）酶類藥物 （ 5）糖類藥物 （ 6）脂類藥物 （ 7）維生素及輔酶類 藥理學特性：（ 1）藥理活性高 （ 2）治療的針對性強，治療的生理、生化機制合理，療效可靠。（ 3）毒副作用較少，營養(yǎng)價值高。（ 4）生理副作用常用發(fā)生。 理化特性：（ 1）生物材料中的有效物質(zhì)含量低，雜質(zhì)種類多且含量相對較高 。（ 2）生物活性物質(zhì)組成結(jié)構(gòu)復雜、穩(wěn)定性差。（ 3）生物材料易染菌，腐敗。 （ 4）生物藥物制劑的特殊要求。 氨基酸的生產(chǎn)方法及各自特點 （ 1） 水解法 最早發(fā)展起來生產(chǎn)氨基酸的方法，以毛發(fā)、血粉及廢蠶絲等蛋白質(zhì)為原料，通過酸、堿或水解成多種氨基酸混合物，經(jīng)分離純化獲得各種藥用氨基酸。水解、分離、結(jié)晶。 （ 2） 發(fā)酵法：微生物通過固氮作用，硝化還原及外界吸收氨使酮酸氨基化成相應(yīng)的氨基酸。 （ 3） 酶轉(zhuǎn)化法：反應(yīng)大多在水溶液中進行，條件溫和、選擇性高、副產(chǎn)物少、生產(chǎn)工藝簡單，分離精制容易。 （ 4） 化學合成法：以石油化工產(chǎn)品為原料，價格低廉，成 本低、適合工業(yè)化生產(chǎn)。 簡述用酶轉(zhuǎn)化法由反丁烯二酸生產(chǎn)天冬氨酸，丙氨酸的過程和所用的關(guān)鍵酶。 關(guān)鍵酶：固定化天冬氨酸酶、固定化 LAspβ 脫羧酶 簡述氨基酸輸液的組方原理和原則，常用的氨基酸輸液的類型。 組方的原理和原則： （ 1）所供氨基酸除質(zhì)量要合格外，尚需根據(jù)組合原理確定氨基酸的比例及組成。 （ 2）在氨基酸輸液里，含必需氨基酸的同時，加入恰當組成的非必需氨基酸。必需氨基酸（ E）與非必需氨基酸（ N）之比一般在 1：1 或 1： 3 之間。（ 3）在輸液中通常加入山梨醇或木糖醇，作為添加劑。 常見的 氨基酸輸液的類型： （ 1） 氨基酸營養(yǎng)輸液（ 2）代血漿用輸液 （ 3）止血用氨基酸輸液 （ 4）嬰幼兒用氨基酸輸液（ 5）治療用氨基酸輸液 多肽類藥物及蛋白質(zhì)類藥的分類。 多肽類藥物的分類： （ 1） 多肽激素 ① 垂體多肽激素 ② 下丘腦激素 ③ 甲狀腺激素 ④ 胰島激素 ⑤ 胃腸道激素 ⑥ 胸腺激素 （ 2） 多肽類細胞生長調(diào)節(jié)因子 表皮生長因子（ EGF）轉(zhuǎn)移因子（ TG）心 鈉素（ ANP） （ 3） 含有多肽成分的其他生化藥物 血活素 胚胎素 蛇毒等。 以生物組織為原料提取純化多肽和蛋白質(zhì)，在選擇材料及選擇分離純化方法時注意點： 材料選擇： （ 1） 種屬 （ 2）發(fā)育生長階段 （ 3）生物狀態(tài) （ 4）原料來源 （ 5）原料解剖血部位 分離純化方法： 1 根據(jù)蛋白質(zhì)等電點的不同來純化蛋白質(zhì) 2 根據(jù)蛋白質(zhì)分子形狀和大小的不同來純化蛋白質(zhì) 3 根據(jù)蛋白質(zhì)溶解度的不同來純化蛋白質(zhì) 4根據(jù)蛋白質(zhì)電離性質(zhì)的不同來純化蛋白質(zhì) 5根據(jù)蛋白質(zhì)功能專一性的不同來純化蛋白質(zhì) 6 根據(jù)蛋白質(zhì)疏水基團與相應(yīng)的載體基團結(jié)合來純化蛋白質(zhì) 7 根據(jù) 蛋白質(zhì)在溶劑系統(tǒng)種分配的不同來純化蛋白質(zhì) 8根據(jù)蛋白質(zhì)的選擇性吸附性質(zhì)來純化蛋白質(zhì) 9根據(jù)蛋白質(zhì)的某些特殊性質(zhì)進行純化 純化注意點： （ 1） 分離純化早期使用方法的選擇 2 各種分離純化方法的使用順序3 分離純化后期的保護性措施 4 對分離純化每一步驟的優(yōu)劣進行綜合評價 酸醇提取法 以胰臟為原料生產(chǎn)胰島素的工藝 工藝流程： ~ 倍的 86%~88%乙醇（ W/W）和 5%草酸提取→用~ 濃氨水堿化，用硫酸酸化 ~→減壓濃縮，蒸去乙醇→去脂、 27%（ W/V）固體氯化鈉鹽析→精制→除酸性蛋白質(zhì)→鋅沉淀→ 結(jié)晶→回收 重組 DNA 技術(shù)制造人胰島素的兩途徑。 AB 鏈合成法：以人工合成的人胰島素 A鏈和 B鏈基因，分別插入克隆載體質(zhì)粒所攜帶的β 半乳糖苷酶基因中，再將重組質(zhì)粒導入大腸桿菌，在細胞中進行復制，并在β 半乳糖苷酶基因的信號序列的控制下，合成 mRNA,再翻譯出 A鏈和 B鏈蛋白，用溴化氰（ CNBr） 將 A 鏈和 B鏈聯(lián)接起來組成人胰島素。 反轉(zhuǎn)錄酶法：通過胰島素原的 cDNA 合成人胰島素。先將 mRNA 經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶處理合成 cDNA，用化學合成法把甲硫氨酸密碼子（ ATG）接在胰島素原 cDNA的 5′末端，再將此基因插入 pBR322 質(zhì)粒載體并轉(zhuǎn)入大腸桿菌中增殖，連接物蛋氨酸使胰島素原從融合的蛋白質(zhì)中釋放出來。胰島素原折疊成三維結(jié)構(gòu)，并形成二硫物，再經(jīng)工具酶切開，除去 C