酶的化學(xué)修飾前理論后例子-資料下載頁
2025-01-06 15:53本頁面
【正文】 果和修飾劑與酶之間的交聯(lián)點的數(shù)目有關(guān)。 （ PEG和酶以單點交聯(lián)時熱穩(wěn)定性提高并不明顯，通常交聯(lián)點增多，酶的熱穩(wěn)定性就可提高） ? 原因 2:修飾劑本身增加了酶分子的表面親水性，使酶分子在水溶液中形成新的氫鍵和鹽橋。 ? 如 α 胰凝乳蛋白酶的表面氨基經(jīng)乙醛酸修飾，再還原成親水性更強的 NHCH2COOH后，在 60℃ 時熱穩(wěn)定性提高了 1000倍，這種穩(wěn)定的酶可用于醫(yī)藥和洗滌工業(yè)。 ? 抗各類失活因子能力提高 ? 某些酶修飾后抗蛋白水解酶水解、抗抑制劑、抗酸、堿、有機溶劑等變性失活能力明顯提高。 ? 原因 1： 修飾劑所產(chǎn)生的空間屏蔽有效地阻擋了水解酶、抑制劑等失活因子的進攻； ? 原因 2:酶分子中對蛋白水解酶等失活因子敏感的基團被修飾，因此使得某些修飾酶的抗失活因子能力提高。 ? 如 :過氧化氫酶經(jīng) PEG修飾后，抗胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶水解能力明顯提高； ? 尿激酶經(jīng)白蛋白修飾后，抗胃蛋白酶水解和抗胎盤抑制劑能力也分別增加。 ? 原因 ：酶分子結(jié)構(gòu)上有一些氨基酸殘基組成了抗原決定簇，當酶作為異源蛋白進入機體后，就會誘發(fā)產(chǎn)生抗體，使酶失活；而化學(xué)修飾后，有些組成抗原決定簇的基團與修飾劑形成了共價鍵，可能破壞了酶分子上抗原決定簇的結(jié)構(gòu)，降低抗原性。同時大分子修飾劑也同樣能“遮蓋”抗原決定簇和阻礙抗原、抗體產(chǎn)生結(jié)合反應(yīng)。 ? 如： β 葡萄糖苷酶用白蛋白修飾后抗原性消除； L天門冬酰胺酶用 PEG修飾后也消除了抗原性。 而糖類物質(zhì)包括右旋糖酐也不容易消除酶的抗原性。 PEG、人血清白蛋白、聚丙氨酸在消除或降低酶抗原性上效果明顯。 抗原性消除 體內(nèi)半衰期延長 ? 許多酶經(jīng)過化學(xué)修飾后，由于增強了抗蛋白水解酶、抗抑制劑等失活因子的能力和熱穩(wěn)定性的提高，體內(nèi)半衰期比天然酶延長，這對提高藥用酶的療效很有意義。 ? L天門冬酰胺酶經(jīng) PEG修飾后，體內(nèi)半衰期延長 13倍；白蛋白修飾的 β 葡萄糖苷酶在體內(nèi)的半衰期延長 18倍以上。 最適 pH改變 ? 有些酶經(jīng)過化學(xué)修飾后，最適 pH發(fā)生變化，這在生理和臨床應(yīng)用上以及工業(yè)生產(chǎn)中更好地發(fā)揮酶的催化作用具有重要意義。 酶學(xué)性質(zhì)變化 ? 絕大多數(shù)酶經(jīng)過化學(xué)修飾后，最大反應(yīng)速度 Vm沒有變化。但有些酶在修飾后，米氏常數(shù) Km值會增大。 ? 化學(xué)修飾還可改變某些酶的底物專一性。 ? 如 :脂肪酶經(jīng)過 PEG修飾后，就可溶于有機溶劑 ,并能催化酯合成和酯交換等有機相反應(yīng)，這將擴大酶在科研和生產(chǎn)中的應(yīng)用范圍。 ? 化學(xué)修飾改變酶對底物專一性的方法還可以用于立體專一性的有機合成中。 對組織分布能力改變 ? 一些酶經(jīng)化學(xué)修飾后，對組織的分布能力就有所改變，能在血液中被靶器官選擇性地吸收。 ? 如 :β 葡萄糖苷酶經(jīng)白蛋白修飾后，有利于肝細胞對其的攝入，使更多的酶到達靶器官發(fā)揮作用。 ? 辣根過氧化物酶用聚賴氨酸修飾后，細胞的攝入量增加，對細胞的穿透能力能增加 100倍。 第三次 作業(yè) ? 固定化酶優(yōu)點？ ? 酶固定化的基本方法？ ? 固定化酶的性質(zhì)？ ? 酶的化學(xué)修飾的意義？ ? 簡述酶化學(xué)修飾的機理？ ? 簡述酶化學(xué)修飾的方式？
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