抗體制藥pappt課件(2)-資料下載頁(yè)
2025-01-05 10:51本頁(yè)面
【正文】 escence， IFA） ? 放射免疫法 （ radioimmunoassay， RIA） ?雙向擴(kuò)散法 第二節(jié) 單克隆抗體及其制備 酶聯(lián)免疫吸附法（ ELISA） 技術(shù)原理： 第二節(jié) 單克隆抗體及其制備 四、克隆化 常用克隆化方法： 有限稀釋法 軟瓊脂平板法 顯微操作法 ? 80 個(gè)細(xì) /96孔 ?飼養(yǎng)細(xì)胞（ feeder cells） ELISA 法檢測(cè)單克隆雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)上清， 選出分泌特異性抗體的陽(yáng)性孔，所分泌抗體即為 單克隆抗體 。 第二節(jié) 單克隆抗體及其制備 單克隆抗體（ monoclonal antibody， MAb） 由單一克隆的雜交瘤細(xì)胞分泌的抗體，只針對(duì)于一個(gè) 抗原決定簇 單克隆抗體（ monoclonal antibody， MAb） 單克隆抗體優(yōu)點(diǎn)： ?高度純一 ?高度專(zhuān)一 應(yīng)用： ? 疾病的論斷和治療 （生物導(dǎo)彈） ? 生物大分子的鑒定、定位和分離純化 ? 細(xì)胞器的鑒定、定位和分離 ? 特定細(xì)胞或病毒的鑒定、定位很分離 第二節(jié) 單克隆抗體及其制備 五、單克隆抗體的大量制備 常用的大規(guī)模培養(yǎng)方法： 動(dòng)物接種法 轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)法 細(xì)胞培養(yǎng)罐法 第二節(jié) 單克隆抗體及其制備 五、單克隆抗體的大量制備 大量制備單克隆抗體的方法主要有兩種： ? 體外培養(yǎng)法： 10μg/ml ? 動(dòng)物體內(nèi)誘生法： 5~20mg/ml BALB/c小鼠 優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便，比較經(jīng)濟(jì)，所得單克隆抗體較多且效價(jià)較高。缺點(diǎn)：混有雜蛋白 有血清培養(yǎng)法； 無(wú)血清培養(yǎng)法 第二節(jié) 單克隆抗體及其制備 第二節(jié) 單克隆抗體及其制備 動(dòng)物接種法 轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)法 細(xì)胞培養(yǎng)罐法 第二節(jié) 單克隆抗體及其制備 第二節(jié) 單克隆抗體及其制備 第二節(jié) 單克隆抗體及其制備 六、單克隆抗體的純化 體內(nèi)誘生法單克隆抗體的純化方法： 離心 取上清，超濾，鹽析 2. 分離 a 凝膠過(guò)濾； IgG IgM 單抗純化 b 陰離子交換層析； IgG單抗純化 C 親和層析； IgG單抗純化
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