實(shí)驗(yàn)二十、食品中黃曲霉毒素b1的檢測-資料下載頁
2025-10-02 19:08本頁面
【導(dǎo)讀】本試劑盒采用間接競爭ELISA方法，樣品中的黃曲霉。毒素B1經(jīng)提取、脫脂、濃縮后與定量特異性抗體反應(yīng)，酶標(biāo)記物和底物后顯色，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較測定含量。樣品粉碎后過20目篩，稱取，加入250m1具塞。65℃水浴通風(fēng)揮干。樣品去殼去皮粉碎后稱取，加入250mL具塞三角瓶中，準(zhǔn)確。并于蒸發(fā)皿中，以下按上述“65℃水浴通風(fēng)揮干”起，依法操作。用小燒杯稱取，用，將樣品移。將抗體與等量樣品提取液在玻。10min，加入紅色試劑100μl，終止反應(yīng)。但反復(fù)凍融后，將導(dǎo)致抗體效價(jià)下降。污染程度進(jìn)行判定。
【正文】 應(yīng)：紅色微孔中加入藍(lán)色試劑 100μl，分別加入標(biāo)準(zhǔn)品和樣品各 100μl，三次混勻，移 100μl到白色抗體孔，搖勻，室溫反應(yīng) 10min，棄去液體，用去離子水洗 5次，用吸水紙扣干。 顯色反應(yīng)：加入綠色試劑 100μl，搖勻，室溫反應(yīng)10min，加入紅色試劑 100μl，終止反應(yīng)。 結(jié)果檢測：在 450nm處用酶標(biāo)儀檢測。 七、注意事項(xiàng)及說明 ? 帶手套操作。酶標(biāo)板用后處理，不能重復(fù)使用。樣品提取過程中用過的玻璃儀器需要重復(fù)使用時(shí)，應(yīng)作解毒處理后 ,再洗滌。 ? 操作時(shí)應(yīng)手持酶標(biāo)板板框，避免液體等沾污板底部，以保持酶標(biāo)潔度。 ? 試劑盒如需分次使用，應(yīng)在每次使用前根據(jù)用量稀釋試劑，每次用多少稀釋多少，剩下的酶標(biāo)板和試劑，應(yīng)及時(shí)封存， 4℃ 保存?zhèn)溆?。如需保存較長時(shí)間則應(yīng) 20℃ 保存。 但反復(fù)凍融后，將導(dǎo)致抗體效價(jià)下降。 ? 結(jié)果判定：根據(jù)參考資料三：現(xiàn)行國家食品（飼料）衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的 AFB1允許量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)檢測樣品 AFB1污染程度進(jìn)行判定。 ? 具體分析還要根據(jù)試劑盒的具體要求。 八、思考題 ? 簡述 ELISA方法定量檢測黃曲霉毒素 B1的原理？ ? 實(shí)驗(yàn)對(duì)樣品進(jìn)行前處理的作用？ ? 影響檢測準(zhǔn)確性主要有哪些因素？ ? 酶標(biāo)儀操作過程要注意些什么？
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