[農(nóng)學(xué)]糧油檢驗(yàn)-維生素-資料下載頁
2025-10-07 17:48本頁面
【正文】 憎水性的硫色素而進(jìn)入正丁醇中，同時(shí)避免了硫色素被鐵氰化鉀的氧化。 ③ 可以使用二氯化汞和溴化氰作為氧化劑，這兩種氧化劑的的氧化專一性比鐵氰化鉀高，如對(duì) N甲基煙酰胺的氧化。 2021/11/10 國家糧食儲(chǔ)備局標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量中心 27 四、硫胺素的測定 4）測定 用硫酸奎寧溶液校正熒光分光光度計(jì)。選擇測定波長：激發(fā)波長 365nm，發(fā)射波長 435nm，分別測定空白試劑標(biāo)準(zhǔn)溶液、樣品液的熒光強(qiáng)度值。 2021/11/10 國家糧食儲(chǔ)備局標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量中心 28 四、硫胺素的測定 ，影響測定結(jié)果的因素有： ①儀器的不穩(wěn)定，引起熒光讀數(shù)的波動(dòng)。 ②純化硫色素時(shí)，浮石柱子的吸附活性不夠高。 ③氧化硫胺素時(shí)，過量的堿性鐵氰化鉀氧化硫色素。 2021/11/10 國家糧食儲(chǔ)備局標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量中心 29 四、硫胺素的測定 ④ 在硫色素的正丁醇溶液中的熒光淬滅劑，引起的熒光淬滅。 引起熒光淬滅的因素： 、溴離子、氰酸根離子是典型的熒光淬滅劑 ，溶液中溶質(zhì)分子自撞。 pH引起的熒光淬滅。 2021/11/10 國家糧食儲(chǔ)備局標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量中心 30 第七節(jié) 食品中維生素的測定 五、熒光法測定核黃素 核黃素微溶于水，水溶液中呈黃綠色熒光，不溶于有機(jī)溶劑，在強(qiáng)酸中穩(wěn)定，堿性溶液中光照易分解。核黃素的測定方法主要有直接熒光法、光黃素?zé)晒夥ê透邏阂合嗌V法。 2021/11/10 國家糧食儲(chǔ)備局標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量中心 31 五、熒光法測定核黃素 用酸水解樣品，使 VB2游離進(jìn)入酸溶液中。經(jīng)凈化處理的提取液，用熒光分光光度計(jì)測定熒光強(qiáng)度。當(dāng)用連二亞硫酸鈉還原 VB2為無熒光的物質(zhì)后，測定樣液中的熒光強(qiáng)度，還原前后熒光強(qiáng)度之差，即為樣品中 VB2的熒光強(qiáng)度，與標(biāo)準(zhǔn)比較定量。 2021/11/10 國家糧食儲(chǔ)備局標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量中心 32 五、熒光法測定核黃素 酸水解樣品 → 酸提取 → 氧化 → 柱層析凈化 → 熒光測定 → 還原核黃素 → 熒光測定 → 結(jié)果計(jì)算 2021/11/10 國家糧食儲(chǔ)備局標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量中心 33 五、熒光法測定核黃素 1） VB2提取 樣品用鹽酸水解，水解液調(diào)節(jié) pH值，以沉淀蛋白質(zhì)。對(duì)于含淀粉高的樣品，加淀粉酶水解；含蛋白質(zhì)高的樣品，加木瓜蛋白酶水解。 2） VB2提取液凈化 樣品的酸提取液中色素等雜質(zhì)經(jīng)高錳酸鉀氧化后，用雙氧水去除多余的高錳酸鉀，然后過硅鎂吸附劑柱子，經(jīng)丙酮、冰醋酸、水淋洗進(jìn)一步凈化提取液。 2021/11/10 國家糧食儲(chǔ)備局標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量中心 34 五、熒光法測定核黃素 3）測定 經(jīng)凈化處理的樣品提取液，以 440nm為激發(fā)波長，525nm為熒光波長，測定其熒光強(qiáng)度。加入連二亞硫酸鈉，將 VB2還原為無熒光物質(zhì)，測定樣液中雜質(zhì)的熒光強(qiáng)度。二者之差即為樣品中 VB2的熒光強(qiáng)度。
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