【導(dǎo)讀】菌株最佳培養(yǎng)基和最優(yōu)培養(yǎng)、條件進(jìn)行了研究。結(jié)果表明:適宜FX05產(chǎn)抑綠膿桿菌活性物。發(fā)酵條件為初始pH為,培養(yǎng)溫度為28℃,培養(yǎng)。120h產(chǎn)抑菌物質(zhì)達(dá)最大值。鏈霉菌是放線(xiàn)菌目的一科?；鶅?nèi)菌絲不斷裂，氣生菌絲通常發(fā)育良好，形成。劑、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、殺蟲(chóng)殺螨和除草劑等多種物質(zhì)。鏈霉菌基因組是目前己。因組中GC含量平均為73％。鏈霉菌染色體富含次生代謝基因簇和調(diào)控基因,鏈霉菌中某。因此，鏈霉菌除產(chǎn)生抗生素抑殺“異己”外，其基因組富含。由于抗生素的廣泛及長(zhǎng)期應(yīng)用，細(xì)菌對(duì)抗生素的耐藥性問(wèn)題日益嚴(yán)重，天然產(chǎn)物趨勢(shì)推測(cè)，鏈霉菌中還存在大量未知的抗生素有待進(jìn)一步挖掘。紫外誘變等方式提高鏈霉菌分泌抗生素的能力，以提高其抑菌能力。病毒沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)，由于。約75％的傳染病是由病毒引。起的，其中動(dòng)物病毒是引起人類(lèi)疾病的重要病原。植物病毒病一旦發(fā)生流行，就會(huì)造成嚴(yán)重的損失。植物病毒病有“植物癌癥”之稱(chēng)，是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上重要病害之一。

　　

【正文】 2 21 30 39 23 25 28℃ 12 21 43 19 32 41 17 28 39 41 30℃ 8 16 50 33 48 31 24 39 38 40 32℃ 18 30 40 22 31 29 25 38 34 34 在對(duì)培養(yǎng)條件溫度優(yōu)化實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)所得菌液對(duì)煙草 TMV病毒活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，在溫度為 28℃ 時(shí) ，抗煙草 TMV病毒活性最高 pH 的優(yōu)化： 菌株培養(yǎng)基： 利用最優(yōu)碳氮源 （碳源 — 小米粉；氮源 — 酪蛋白胨） 組合制作培養(yǎng)基，分別用 ph 計(jì)將培養(yǎng)基的 ph 調(diào)至 ph6， ph7， ph8， ph9四個(gè)不同的 pH 值， 121℃高溫高壓滅菌 30分鐘，冷卻至室溫后，分別接種 F01（ 2， 7，） 2 種菌種，然后 28℃、 180rpm 搖床培養(yǎng) 7 天。 活性測(cè)定：取出各個(gè)培養(yǎng)基中的對(duì)應(yīng)菌液，以半葉枯斑法，采用健康，長(zhǎng)勢(shì)基本一樣的心葉煙做活性測(cè)定。 結(jié)果及分析 ph 重復(fù) 2菌株 平均抑制率 % 重復(fù) 1 重復(fù) 2 重復(fù) 3 左 右 抑制率 % 左 右 抑制率 % 左 右 抑制率 % 22 27 19 34 41 17 19 25 24 20 15 32 53 21 37 43 24 49 51 49 26 39 33 10 28 64 16 38 58 52 33 41 20 25 28 11 14 19 26 19 ph 重復(fù) 7菌株 平均抑制率 % 重復(fù) 1 重復(fù) 2 重復(fù) 3 左 右 抑制率 % 左 右 抑制率 % 左 右 抑制率 % 12 17 29 24 31 23 21 28 25 26 31 49 37 29 50 42 18 30 40 40 28 39 36 20 32 38 13 27 52 42 7 11 36 41 48 15 35 44 20 24 在對(duì)培養(yǎng)條件 pH 優(yōu)化實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)所得菌液對(duì)煙草 TMV病毒活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，在pH 為 時(shí) ，抗煙草 TMV病毒活性最高 。 培養(yǎng)時(shí)間 的優(yōu)化： 菌株培養(yǎng)基： 利用最優(yōu)碳氮源 （碳源 — 小米粉；氮源 — 酪蛋白胨） 組合制作培養(yǎng)基，用 ph 計(jì)將培養(yǎng)基的 ph 調(diào)至 pH 為 , 121℃高溫高壓滅菌 30 分鐘，冷卻至室溫后，分別接種 F01（ 2， 7，） 2 種菌種，然后 28℃、 180rpm 搖床培養(yǎng) ， 分別在第 4 天，第 5 天，第 6 天，第 7 天同一時(shí)間段采集菌液 。 活性測(cè)定：取出各個(gè)培養(yǎng)基中的對(duì)應(yīng)菌液，以半葉枯斑法，采用健康，長(zhǎng)勢(shì)基本一樣的心葉煙做活性測(cè)定。 結(jié)果及分析 重復(fù) 時(shí)間 2菌株 平均抑制率 % 重復(fù) 1 重復(fù) 2 重復(fù) 3 左 右 抑制率 % 左 右 抑制率 % 左 右 抑制率 % 4d 31 48 35 25 31 19 11 28 61 38 5d 15 30 50 30 53 43 32 49 35 43 6d 23 38 39 28 35 20 19 32 41 33 7d 33 43 23 26 38 32 19 29 34 30 重復(fù) 時(shí)間 7菌株 平均抑制率 % 重復(fù) 1 重復(fù) 2 重復(fù) 3 左 右 抑制率 % 左 右 抑制率 % 左 右 抑制率 % 4d 28 46 39 35 49 29 36 57 37 35 5d 25 45 44 13 28 54 34 53 36 45 6d 36 59 39 27 49 45 19 32 41 42 7d 12 21 43 33 46 28 34 57 40 37 在對(duì)培養(yǎng)基條件優(yōu)化培養(yǎng)時(shí)間實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)所得菌液對(duì)煙草 TMV病毒活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，在溫度為 28℃， ph 值為 時(shí)， 120h 左右抑菌物質(zhì)產(chǎn)量達(dá)最高峰。 5 結(jié)論與展望 結(jié)論 不同的菌種能夠利用的碳源和氮源往往不同 , 同一個(gè)菌種對(duì)不同碳源和氮源的利用速度也不同 , 碳源物質(zhì)為細(xì)胞提供能源 , 組成菌體細(xì)胞成分的碳架 , 構(gòu)成代謝產(chǎn)物 , 氮源物質(zhì)也是構(gòu)成菌體細(xì)胞結(jié)構(gòu)的物質(zhì) , 在碳源不足的情況下也可為微生物提供能源 。 各種微生物在生長(zhǎng)繁殖和產(chǎn)生代謝產(chǎn)物中 , 除了需要碳源和氮源物質(zhì) , 還需要磷 、 鎂 、 硫 、 鐵 、 鉀 、 鈉等無(wú)機(jī)鹽和微量元素作為酶的激活劑 、 生理活性物質(zhì)的組成或生理活性作用的調(diào)節(jié)劑 。 這些物質(zhì)一般在較低濃度時(shí)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成有促進(jìn)作用 , 而在高濃度時(shí)常表現(xiàn)出顯著的抑制作用 。 通過(guò)對(duì)放線(xiàn)菌 F01 菌株 培養(yǎng)基和發(fā)酵條件的研究 , 得出 F01菌株的最佳發(fā)酵培養(yǎng)基的組分為 淀粉（ 2g）、酪蛋白胨 ()、 K2HPO4 ()、 () 、 NaCl ()、 ()、水 100mL。 發(fā)酵條件為培養(yǎng)基初始 pH為 , 28 ℃ 培養(yǎng) , 120 h左右抑菌物質(zhì)產(chǎn)量達(dá)最高峰 。 小 米粉是一種成本廉價(jià)的物質(zhì) , 含有豐富的還原糖 、 氨基酸 、 磷 、 微量元素 、 生長(zhǎng)素及有機(jī)酸 ,它作為 F01 菌株的能源物質(zhì) , 達(dá)到了降低成本提高效價(jià)的目的 , 為進(jìn)一步放大試驗(yàn)奠定了基礎(chǔ) 。 論文工作的不足 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中在 F01菌系中從四種菌株篩選出 F02 菌株、 F07 菌株，通過(guò)五種不同的碳源篩選結(jié)果可能存在偏差。同時(shí)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中同時(shí)進(jìn)行 F02 菌株、F07 菌株兩種菌株的培養(yǎng)基碳氮源和培養(yǎng)條件的篩選，雖然兩種菌株的性質(zhì)，功能相似，但也存在 細(xì)小的差異，因此在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中會(huì)存在許多的誤差和結(jié)果偏差。 由于本身能力因素，對(duì)于正交實(shí)驗(yàn)理解不夠，因此只能進(jìn)行碳氮源的簡(jiǎn)單組合實(shí)驗(yàn)，這樣對(duì)于實(shí)驗(yàn)工作量大大的提高，同時(shí)也遠(yuǎn)遠(yuǎn)的降低了實(shí)驗(yàn)的精確度。 在培養(yǎng)基條件的篩選中，溫度， pH,培養(yǎng)時(shí)間的梯度較大。在培養(yǎng)條件 pH篩選中，選取 、 、 、 。在 和 的發(fā)酵產(chǎn)菌量差不多，本身實(shí)驗(yàn)過(guò)程中未調(diào)節(jié) pH， pH位于 ，增加了實(shí)驗(yàn)誤差。 展望 鏈霉菌在生物防治和環(huán)境保護(hù)領(lǐng) 域具有重大應(yīng)用前景，是許多病原微生物的生防因子，也是目前研究應(yīng)用廣泛的生防菌。隨著鏈霉菌研究的不斷擴(kuò)展和深入，相信會(huì)有更多鏈霉菌被篩選，進(jìn)而豐富我國(guó)的鏈霉菌種群及其系統(tǒng)分類(lèi)學(xué)研究。篩選優(yōu)良菌株或利用基因工程技術(shù)和原生質(zhì)體融合技術(shù)，為構(gòu)建高產(chǎn)、高效鏈霉菌的生防菌株防治植物病害等提供有力的保障。 研究出其準(zhǔn)確的碳氮源配比和發(fā)酵條件，如溫度、 pH，培養(yǎng)時(shí)間，轉(zhuǎn)速，無(wú)機(jī)因子等。從而更有利于產(chǎn)生最大產(chǎn)菌量，為醫(yī)藥，工業(yè)，農(nóng)業(yè)等服務(wù)。 ： 采用現(xiàn)代發(fā)酵工程和代謝工程技術(shù)研究微生物定向發(fā)酵調(diào)控工藝。建立優(yōu)化的發(fā)酵 、增殖生產(chǎn)工藝技術(shù)，提高有效活性物質(zhì)的生產(chǎn)率。用抗病機(jī)制有交叉的生防菌復(fù)配協(xié)同抗病。許多學(xué)者的研究表明，使用幾種拮抗菌的混合物可以獲得良好的病害防治效果 ，多菌復(fù)配可以拓寬鏈霉菌使用范圍，防治多種病原 菌；可以增強(qiáng)其有效性，減少使用頻率，可結(jié)合不同微生物的防治優(yōu)勢(shì)，提高生防效果。通過(guò)對(duì)鏈霉菌的遺傳改良包括提高抗菌物質(zhì)的表達(dá)增強(qiáng)競(jìng)爭(zhēng)能力和誘導(dǎo)抗性等，增強(qiáng)其抗菌活性，擴(kuò)大抑菌譜，增強(qiáng)在植物寄主上的定殖能力，從而 提高防病能力。隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的運(yùn)用，鏈霉菌的研究及開(kāi)發(fā)應(yīng)用將會(huì)出現(xiàn)新的發(fā)展，對(duì)農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有 重要意義，同時(shí)有較強(qiáng)的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力和良好經(jīng)濟(jì)效益，能產(chǎn)生巨大的社會(huì)、經(jīng)濟(jì)和生態(tài)效益，將會(huì)有廣闊的應(yīng)用前景。 參考文獻(xiàn)