沙門菌檢驗(yàn)技術(shù)和方法-資料下載頁
2025-08-11 11:46本頁面
【導(dǎo)讀】沙門菌是1885年由Salmon氏等在豬霍亂流行。沙門菌屬是腸桿菌科中最重要的病原菌。血清型繁多，目前已發(fā)現(xiàn)的沙氏菌。有2500多個(gè)血清型和變種。雖然沙門菌的血清型很多，但多數(shù)國(guó)家從人。而在一個(gè)國(guó)家中的一定時(shí)期只約。有10個(gè)血清型是比較常見的。傷寒沙門菌-傳染病防治法中。規(guī)定報(bào)告的乙類傳染病。非傷寒沙門菌-食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)的主要。革蘭氏陰性桿菌，無芽胞,一般無莢膜。緣整齊或呈鋸齒狀。不分解乳糖，大部分菌株產(chǎn)H2S，發(fā)酵葡萄。生存5個(gè)月至二年之久。沙門菌廣泛存在于自然環(huán)境中。通過沙門菌病患者或健康帶菌的人和動(dòng)物。的排泄物污染環(huán)境和食品。沙門菌在肉類中不分解蛋白質(zhì)，不產(chǎn)生靛。樣品液增加調(diào)整pH值。原國(guó)標(biāo)中生化鑒定是將可疑菌落同時(shí)接種于三糖。本部分還增加了對(duì)疑似菌落進(jìn)行留。結(jié)果,報(bào)告25g樣品中檢出或未檢出沙門菌。接種三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)。至少保留24h，以備必要時(shí)復(fù)查。
【正文】 或加塞，應(yīng)保證滅菌效果。 ? 可選擇適用于微生物檢驗(yàn)的一次性用品來替代反復(fù)使用的物品與材料（如培養(yǎng)皿、吸管、吸頭、試管、接種環(huán)等）。 ? 檢驗(yàn)用品的儲(chǔ)存環(huán)境應(yīng)保持干燥和清潔 , 已滅菌與未滅菌的用品應(yīng)分開存放并明確標(biāo)識(shí)。 ? 滅菌檢驗(yàn)用品應(yīng)記錄滅菌 /消毒的溫度與持續(xù)時(shí)間。 培養(yǎng)基和試劑 ? 培養(yǎng)基 按照 GB/。 ? 試劑 檢驗(yàn)試劑的質(zhì)量及配制應(yīng)適用于相關(guān)檢測(cè)。對(duì)檢測(cè)結(jié)果有重要影響的關(guān)鍵試劑（如血清、抗生素等）應(yīng)進(jìn)行適用性驗(yàn)證。 ? 應(yīng)使用微生物菌種保藏專門機(jī)構(gòu)和同行認(rèn)可機(jī)構(gòu)保存的、可溯源的標(biāo)準(zhǔn)或參考菌株。 ? 應(yīng)對(duì)指從食品、環(huán)境或人體分離、純化、鑒定的，未在微生物菌種保藏專門機(jī)構(gòu)登記注冊(cè)的原始分離菌株 (野生菌株 )，進(jìn)行系統(tǒng)、完整的菌株信息記錄，包括分離時(shí)間、來源，表型及分子鑒定的主要特征等。 菌株 樣品的采集 ? 采樣原則： ? 根據(jù)檢驗(yàn)?zāi)康?、食品特點(diǎn)、批量、檢驗(yàn)方法、微生物的危害程度等，確定采樣方案。 ? 采用隨機(jī)的原則進(jìn)行采樣，確保所采集的樣品具有代表性。 ? 采樣過程遵循無菌操作程序，防止一切可能的外來污染。 ? 樣品在保存和運(yùn)輸?shù)倪^程中，應(yīng)采取必要的措施防止樣品中原有微生物的數(shù)量變化，保持樣品的原有狀態(tài)。 ? 采樣方案的類型： ? 采樣方案包括二級(jí)采樣方案和三級(jí)采樣方案。二級(jí)采樣方案設(shè)有 n、 c和 m值，；三級(jí)采樣方案設(shè)有 n、 c、 m和 M值。 n：同一批次產(chǎn)品應(yīng)采集的樣品件數(shù)； c：最大可允許超出 m值的樣品數(shù)； m: 微生物指標(biāo)可接受水平的限量值。 M: 指微生物指標(biāo)的最高安全限量值。 ? 按照二級(jí)采樣方案設(shè)定的指標(biāo)：在 n個(gè)樣品中，允許 ≤C個(gè)樣品相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗(yàn)值＞ m值為合格，否則為不合格。 ? 按照三級(jí)采樣方案設(shè)定的指標(biāo)：在 n個(gè)樣品中，允許全部樣品相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗(yàn)值均小于 m值，即為合格；允許 ≤C個(gè)樣品相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗(yàn)值在 m值和 M值范圍內(nèi)，為附加條件合格，否則為不合格；不允許有樣品相應(yīng)微生物指標(biāo)檢驗(yàn)值＞ M值，則為不合格。 采樣方案的解釋 ? 例如： n=5， c=2， m=100cfu/g， M=1000cfu/g。 ? 含義：是從一批產(chǎn)品中采集 5個(gè)樣品，若 5個(gè)樣品的檢驗(yàn)結(jié)果均小于 m 值（ 100cfu/g），則判定為該批產(chǎn)品合格；若 ≤2個(gè)樣品的結(jié)果位于 m和 M之間（ 100 cfu/g X1000cfu/g），則判定為附加條件合格；若有 3個(gè)及以上樣品的檢驗(yàn)結(jié)果位于 m和 M之間，判定為該批產(chǎn)品不合格；若有任一樣品的檢驗(yàn)結(jié)果等于或超過 M值（ ≥1000cfu/g），則為不合格。 ? 各類食品的采樣方案： ? 按照相應(yīng)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)中的規(guī)定執(zhí)行。 ? 食源性疾病及食品安全事件中食品樣品的采集： 由工業(yè)化批量生產(chǎn)加工的食品污染導(dǎo)致的食源性疾病或食品安全事件，食品樣品的采集和判定原則按上述原則 (采集方案、產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn) )執(zhí)行。 由餐飲單位或家庭烹調(diào)加工的食品導(dǎo)致的食源性疾病或食品安全事件，食品樣品的采集按 GB14938(食物中毒診斷標(biāo)準(zhǔn)及技術(shù)處理總則 )中衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn)的要求執(zhí)行。 ? 不同類食品的采樣方法： ? 采樣應(yīng)遵循無菌操作程序，采樣工具和容器應(yīng)無菌、干燥、防漏，形狀及大小適宜。 ? 即食類預(yù)包裝食品：取相同批次的最小零售原包裝，檢驗(yàn)前要保持包裝的完整，避免污染。 ? 非即食類預(yù)包裝食品：原包裝小于 500g的固態(tài)食品或小于 500ml的液態(tài)食品，取相同批次的最小零售原包裝。 ? 大于 500ml的液態(tài)食品，應(yīng)在采樣前搖動(dòng)或用無菌棒攪拌液體，使其達(dá)到均質(zhì)后分別從相同批次的 n個(gè)容器中采集 5倍或以上檢驗(yàn)單位的樣品。 ? 大于 500g的固態(tài)食品，應(yīng)用無菌采樣器從同一包裝的幾個(gè)不同部位分別采取適量樣品，放入同一個(gè)無菌采樣容器內(nèi) , 采樣總量應(yīng)滿足微生物指標(biāo)檢驗(yàn)的要求。 ? 散裝食品或現(xiàn)場(chǎng)制作食品，根據(jù)不同食品的種類和狀態(tài)及相應(yīng)檢驗(yàn)方法中規(guī)定的檢驗(yàn)單位，用無菌采樣器現(xiàn)場(chǎng)采集 5倍或以上檢驗(yàn)單位的樣品，放入無菌采樣容器內(nèi)，采樣總量應(yīng)滿足微生物指標(biāo)檢驗(yàn)的要求。 ? 食源性疾病及食品安全事件的食品樣品中：采樣量應(yīng)滿足食源性疾病診斷和食品安全事件病因判定的檢驗(yàn)要求。 ? 采集樣品的標(biāo)記 : ? 應(yīng)對(duì)采集的樣品進(jìn)行及時(shí)、準(zhǔn)確的記錄和標(biāo)記，采樣人應(yīng)清晰填寫采樣單（包括采樣人、采樣地點(diǎn)和時(shí)間，樣品名稱、來源、批號(hào)、數(shù)量、保存條件等信息）。 ? 采集樣品的貯存和運(yùn)輸 : ? 采樣后，應(yīng)盡快將樣品在接近原有貯存溫度條件下盡快送往實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。運(yùn)輸時(shí)應(yīng)保持樣品完整。如不能及時(shí)運(yùn)送，應(yīng)在接近原有貯存溫度條件下貯存。 樣品檢驗(yàn) ? 樣品處理 : ? 實(shí)驗(yàn)室接到送檢樣品后 , 應(yīng)核對(duì)登記 , 確保符合實(shí)驗(yàn)要求。 ? 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按要求盡快檢驗(yàn)。若不能及時(shí)檢驗(yàn)，應(yīng)采取必要的措施保持樣品的原有狀態(tài)，防止樣品中目標(biāo)微生物數(shù)值因客觀條件的干擾而發(fā)生變化。 ? 冷凍產(chǎn)品 , 應(yīng)在 45 ℃ 以下不超過 15 min,或 2 ℃ ～ 5 ℃ 不超過 18 h解凍后進(jìn)行檢驗(yàn)。 ? 檢驗(yàn)方法的選擇 : ? 應(yīng)選擇現(xiàn)行有效的標(biāo)準(zhǔn)方法，如 GB/T4789。 ? GB/T 4789系列標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)同一檢驗(yàn)項(xiàng)目有兩個(gè)以上檢驗(yàn)方法時(shí)，應(yīng)以第一法為基準(zhǔn)方法。 ? 實(shí)驗(yàn)室生物安全要求： ? 應(yīng)符合 GB19489(實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求 )的規(guī)定。 ? 質(zhì)量控制 : ? 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期對(duì)實(shí)驗(yàn)用菌株、培養(yǎng)基、試劑和水等設(shè)置陽性對(duì)照、陰性對(duì)照和空白對(duì)照。 ? 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)重要的檢驗(yàn)設(shè)備 (特別是自動(dòng)化檢驗(yàn)儀器 )設(shè)置儀器比對(duì)。 生物安全與質(zhì)量控制 ? 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期對(duì)實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行技術(shù)考核和人員比對(duì)。 ? 兩個(gè)或兩個(gè)以上實(shí)驗(yàn)室承擔(dān)相同微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目時(shí)，應(yīng)在技術(shù)培訓(xùn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)。 記錄與報(bào)告 ? 記錄 : ? 檢驗(yàn)過程中應(yīng)即時(shí)、準(zhǔn)確地記錄觀察到的現(xiàn)象、結(jié)果和數(shù)據(jù)等信息。 ? 報(bào)告 : ? 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按照檢驗(yàn)方法中規(guī)定的要求，準(zhǔn)確、客觀地報(bào)告每一項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果。 報(bào)告后處理 ? 檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告后 ,樣品方能處理。 ? 檢出致病菌的樣品要經(jīng)過無害化處理。 謝謝 !
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