人教版生物選擇性必修三學案：122-微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)-【含解析】-資料下載頁
2025-04-05 05:37本頁面
【正文】 數(shù)據(jù),B正確。為了保證結果準確,一般選取菌落數(shù)在30～300之間的平板進行計數(shù),C錯誤。在某一濃度下涂布三個平板,若三個平板統(tǒng)計的菌落數(shù)差別不大,則應以它們的平均值作為統(tǒng)計結果以減小實驗誤差,D正確。 【思維躍遷】。人們在研究微生物時一般要將它們分離提純,然后進行數(shù)量的測定。下面是有關土壤中分解尿素的細菌分離和計數(shù)的實驗過程,請回答有關問題。(1)若取土樣6 g,應加入________mL的無菌水配制成稀釋10倍土壤溶液。因土壤中細菌密度很大,需要不斷加以稀釋,配制成101～107不同濃度的土壤溶液。將103～ mL加入固體培養(yǎng)基上,用涂布器將菌液鋪平,每個稀釋度下至少涂布3個平板,這種接種方法稱為________。將接種的培養(yǎng)皿放置在37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～48 h,觀察并統(tǒng)計菌落數(shù),結果如下表,其中________倍的稀釋比較合適,由此計算出每克土壤中的菌落數(shù)為________。這種方法測定的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目________(填“低”或“高”)。稀釋倍數(shù)103104105106107菌落數(shù)/個1號平板4783672772652號平板4963542612083號平板509332254293(2)若研究尿素分解菌的群體生長規(guī)律,可采用平板劃線法分離土壤中的尿素分解菌。操作時,接種環(huán)通過灼燒滅菌,在第二次及以后劃線時,總是從上一次的末端開始劃線。這樣做的目的是___________________________。將分離純化后的單個菌落進行液體培養(yǎng),可采用定期取樣的方法進行計數(shù)。若以一個大方格( mm3)有25個中方格的計數(shù)板為例進行計算,設5個中方格中總菌數(shù)為45,菌液稀釋倍數(shù)為102 ,那么原菌液的菌群密度為________個/mL。 【解析】(1)根據(jù)題意分析,需要稀釋10倍的土壤溶液,因此應該將6 g土樣加入54 mL的無菌水進行配制。將103～ mL加入固體培養(yǎng)基上,用稀釋涂布平板法將菌液用涂布器涂布到固體培養(yǎng)基上。估算樣品中的活菌數(shù)時,往往選取菌落數(shù)在30到300之間的平板,分析表格中數(shù)據(jù)可知,稀釋倍數(shù)為105的平板菌落數(shù)在這一范圍。每克土壤中的菌落數(shù)為(277+261+254)247。3105247。247。6=107。稀釋涂布平板法進行微生物計數(shù)時,由于菌落之間會相互重疊,因此測定的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低。(2)用平板劃線法分離土壤中的尿素分解菌時,為了將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得(不連續(xù))單個菌落,在第二次及以后劃線時,總是從上一次的末端開始劃線。若以一個大方格( mm3)有25個中方格的計數(shù)板為例進行計算,設5個中方格中總菌數(shù)為45,菌液稀釋倍數(shù)為102 ,那么原菌液的菌群密度=455247。247。103102=108個/mL。答案:(1)54 稀釋涂布平板法 105 107 低 (2)將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得(不連續(xù))單個菌落 108 【拓展探究】。為了研究利用尿素配制的反芻動物飼料,以替代部分蛋白質飼料,降低飼料成本,進行了相關實驗。請回答下列問題:(1)尿素是尿素分解菌的氮源,因此在配制培養(yǎng)基時________。,故培養(yǎng)基中的氮源為尿素,故培養(yǎng)基中尿素為無機氮(2)瘤胃中的尿素分解菌能將尿素分解成________,其中的________可用于合成微生物蛋白,該蛋白質是反芻動物的優(yōu)質氮源。(3)為研究瘤胃中尿素分解菌的種類,實驗者配制以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基從功能上屬于________培養(yǎng)基?？稍谂囵B(yǎng)基中加入________指示劑以初步鑒定這些菌能夠分解尿素,為確證這些菌是尿素分解菌,可通過酶活性測定及基因數(shù)據(jù)庫比對,只有具有脲酶活性和________基因的菌,才是真正的尿素分解菌。(4)研究發(fā)現(xiàn),如果只飼喂尿素配制的飼料,會導致反芻動物氨中毒,請根據(jù)高中所學知識分析其原因是_____________________________________。【解析】(1)尿素既可以作為尿素分解菌的氮源,也可以作為其碳源,葡萄糖在培養(yǎng)基中并不是越多越好,A項錯誤。添加尿素的目的是篩選尿素分解菌,其他微生物不能很好地生活在該培養(yǎng)基上,尿素在培養(yǎng)基中不是越少越好,過少就失去選擇作用,過多又會使細胞失水死亡,B項錯誤。尿素分解菌沒有固氮能力,故培養(yǎng)基中需要添加尿素作為有機氮源,C項正確,D項錯誤。(2)尿素分解菌能將尿素分解成CO2和NH3,其中的NH3可用于合成微生物蛋白,為反芻動物提供優(yōu)質氮源。(3)以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基,尿素分解菌可以生存,而其他微生物不能存活,因此該培養(yǎng)基從功能上屬于選擇培養(yǎng)基。可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑以初步鑒定這些菌能夠分解尿素。為確證這些菌是尿素分解菌,可通過酶活性測定及基因數(shù)據(jù)庫比對,只有具有脲酶活性和脲酶基因的菌,才是真正的尿素分解菌。(4)如果只飼喂尿素配制的飼料,會導致反芻動物氨中毒,原因是氨會使瘤胃液pH增大。 答案:(1)C (2)CO2和NH3 NH3 (3)選擇 酚紅 脲酶 (4)氨會使瘤胃液pH增大 25
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