20xx探討在?高海拔地區(qū)應(yīng)用血液基因組dna提取試劑盒的最佳條件精選-資料下載頁
2025-03-30 05:18本頁面
【正文】 。 （3） 將說明書上的參加200mu。l TB緩沖液改為100mu。l, 65℃水浴1h改為過夜 （24h） . 在高原環(huán)境提取DNA的過程中， 首先將80℃保存的抗凝血室溫融化后按照改良方案細(xì)胞裂解液使用量為血液的3倍， 顛倒混勻10次使DNA別離出來[5,6]。參加蛋白酶K和FG混合液后水浴20h, 樣品溶液透明， 推斷由于環(huán)境要素導(dǎo)致裂解時(shí)間延長(zhǎng)；參加TB洗脫液后水浴24h后采納紫外分光光度法檢測(cè)DNA濃度和純度。按照文獻(xiàn)報(bào)道DNA純度推斷標(biāo)準(zhǔn)：純DNA, 其OD260/。OD260/, 說明有RNA污染；OD260/OD280比值lt。, 說明有蛋白質(zhì)等污染[7].實(shí)驗(yàn)組109份樣品中35份DNA濃度在5180ng/mu。l之間， 61份樣品DNA濃度80ng/mu。l。DNA純度OD260/OD280比值在ge。， ， 比值ge。， DNA濃度和純度比例均高于對(duì)照組?！ 〔杉{改良方法在高原地區(qū)提取的DNA不管是完好性仍然濃度純度均能保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究的需要同時(shí)適宜臨床研究及檢測(cè)應(yīng)用?！ ⒖嘉墨I(xiàn) [1]王秀娟， 肖瑞， 張傳領(lǐng)， 等。血液基因組DNA試劑盒提取條件的優(yōu)化[J].疾病監(jiān)測(cè)與操縱雜志， 2015, 12 （9） :855. [2]韓芬霞， 楊麗芬。全血DNA提取方法的改良及PCR檢測(cè)[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)， 2012, 40 （8） :56. [3]余凱琳， 鄧正棟， 嚴(yán)濟(jì)。血液基因組DNA提取方法改良[J].南昌大學(xué)學(xué)報(bào) （醫(yī)學(xué)版） , 2014, 54 （10） :9. [4]袁茂勇， 郭斌， 宋歡， 等。DNA定量分析在宮頸病變篩查中應(yīng)用價(jià)值的研究[J].南昌大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版， 2011, 51 （6） :68. [5]劉正旺， 云美玲， 鐘江華， 等。提取陳舊血液標(biāo)本中DNA的三種方法比擬[J].中國(guó)熱帶醫(yī)學(xué)， 2012, 12 （3） :321. [6]許麗娟， 馬驍， 王洋陽， 等。一種快速、經(jīng)濟(jì)提取外周凝血基因組DNA方法的建立[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展， 2011, 11 （20） :3946. [7]段瑩， 于衛(wèi)建。40℃條件下儲(chǔ)存不同時(shí)間的全血對(duì)提取DNA濃度的阻礙[J].中國(guó)輸血雜志， 2011, 24 （11） :973.
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