20xx年醫(yī)學(xué)專題—第四章-動物干細胞(編輯修改稿)
2024-11-16 01:00 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 SSEA4為主。此外，ALP、Otc4等都可作為表面標(biāo)志。 4. 端粒酶活性鑒定： 端粒長度及端粒酶活性檢測。 5. 體內(nèi)外分化能力(n233。ngl236。)鑒定：體內(nèi)外分化能力鑒定：胚胎小體（EB，或稱擬胚體）,第三十一頁，共七十四頁。,改變細胞的培養(yǎng)條件: 改變細胞的培養(yǎng)條件是ES細胞定向分化的基本策略,常用的方法有:與輔助細胞共培養(yǎng)。在半固體培養(yǎng)基中原位生長分化。添加生長因子、化學(xué)誘導(dǎo)劑等。 導(dǎo)入外源性基因(jīyīn),使其分化為某一特定類型的細胞。 體內(nèi)定向分化,使ES 細胞多數(shù)分化為該組織特異性的細胞。,三、胚胎干細胞定向誘導(dǎo)分化(fēnhu224。)的方法,第三十二頁，共七十四頁。,胚胎干細胞的誘導(dǎo)分化： 胎牛血清，骨髓基質(zhì)細胞共培養(yǎng) 胚胎干細胞－－－－－－－－－－－－－－－?造血細胞 RA 胚胎干細胞－－－－－－－－－－－－－－－?神經(jīng)細胞 DMSO 胚胎干細胞－－－－－－－－－－－－－－－?肌肉(jīr242。u)細胞 TGFB1, VEGF, bFGF 胚胎干細胞－－－－－－－－－－－－－－－?血管和內(nèi)皮細胞 RA+胰島素+T3 胚胎干細胞－－－－－－－－－－－－－－－?脂肪細胞 BMP2, BMP4 胚胎干細胞－－－－－－－－－－－－－－－?軟骨細胞 地塞米松，磷酸甘油 胚胎干細胞－－－－－－－－－－－－－－－?骨細胞 基因轉(zhuǎn)染 胚胎干細胞－－－－－－－－－－－－－－－?胰島素分泌細胞,第三十三頁，共七十四頁。,第三十四頁，共七十四頁。,人胚胎(pēitāi)干細胞注射至免疫缺陷小鼠的后腿肌肉中形成的各種組織： （a）腸樣結(jié)構(gòu)；(b)神經(jīng)上皮花結(jié)；(c）骨骼；(d)軟骨 ；(e)橫紋?。?f)腎。,第三十五頁，共七十四頁。,A.小鼠成纖維飼養(yǎng)細胞上培養(yǎng)8天后的ICM（標(biāo)尺＝100um） B.ICM中分離出的H9細胞系（標(biāo)尺＝100um） C. H9細胞系（標(biāo)尺＝50um） D.在無小鼠胚胎成纖維細胞，但有LIF（20ng/ml）的條件(ti225。oji224。n)下培養(yǎng)5d后，H9細胞發(fā)生分化（標(biāo)尺＝100um）,第三十六頁，共七十四頁。,第四節(jié)、成體干細胞,一、概念和生物學(xué)特征 概念： 指一群分布在成體組織中尚未分化的、具 有自我更新、并負有構(gòu)建和補充某種組織的各種類 型細胞(x236。bāo)潛能的干細胞(x236。bāo)。 生物學(xué)特征： 慢周期性 自我更新和再生能力的有限性 不對稱分裂 細胞鑒定標(biāo)志,第三十七頁，共七十四頁。,造血干細胞是體內(nèi)各種血細胞的唯一來源，它主要存在于骨髓、外周血、臍帶血中。 造血干細胞的移植是治療血液系統(tǒng)疾病、先天性遺傳疾病以及多發(fā)性轉(zhuǎn)移性腫瘤疾病的最有效方法。 與骨髓移植和外周血干細胞移植相比，臍血干細胞移植的長處在于無來源的限制，對HLA配型要求不高，不易(b249。 y236。)受病毒或腫瘤的污染。,造血(z224。o xu232。)干細胞,第三十八頁，共七十四頁。,造血(z224。o xu232。)干細胞的來源,骨髓；1/400 外周血；1/100000 臍帶血；1/10000 胎兒造血系統(tǒng)(x236。tǒng)； 胚胎干細胞和胚胎生殖細胞。,第三十九頁，共七十四頁。,二、成體干細胞的分離與鑒定（以HSC為例） 無菌采集骨髓 低滲處理 密度梯度離 心 獲
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