【文章內(nèi)容簡介】 記各類檢查標記（合格品、返工品、廢品）達到檢查標記清晰、明顯，不混不亂。（4）熟練掌握本所檢查范圍產(chǎn)品的零件號、總成號及名稱，達到提件號知名稱，提名知件號，提件號、名稱知其實物形狀。（5）達到能記住檢查項目、參數(shù)和所使用的檢查量、夾具 及其各項檢查頻次與數(shù)量。（6）熟悉所檢查產(chǎn)品的裝配部位，件數(shù)。（7）熟悉所檢查產(chǎn)品的加工、裝配工藝，加工定位順序及操作規(guī)范。（8）達到能記住所檢查產(chǎn)品的材料牌號，零件公差及技術要求。（9）懂得維護、保養(yǎng)和正確使用檢查所需的量夾具。（10）結(jié)合本崗產(chǎn)品的具體質(zhì)量要求。能根據(jù)標準樣品或工作經(jīng)驗，用目測、耳聽、觸摸、錘敲等方法正確判斷外觀或是內(nèi)在質(zhì)量缺陷。第三章 質(zhì)量檢驗的類型及其特征第四章 質(zhì)量問題的處理 一般遵循兩個原則，一是必須堅持“三不放過”原則，二是執(zhí)行“逐級上訴”原則所謂三不放過是指在處理問題之前必須找出原因，查清責任，落實糾正措施，否則不放過所謂逐級上訴是對質(zhì)量問題處理程序的規(guī)定，一般是自下而上逐級裁決的辦法。第三篇：微生物檢驗員培訓資料（一）微生物基礎知識培養(yǎng)基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。由于微生物具有不同的營養(yǎng)類型，對營養(yǎng)物質(zhì)的要求也各不相同，加之實驗和研究的目的不同，所以培養(yǎng)基的種類很多，使用的原料也各有差異，但從營養(yǎng)角度分析，培養(yǎng)基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、無機鹽、生長素以及水分等。另外，培養(yǎng)基還應具有適宜的pH值、一定的緩沖能力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質(zhì)，是應用最廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養(yǎng)基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固。但多次反復融化，其凝固性降低。任何一種培養(yǎng)基一經(jīng)制成就應及時徹底滅菌，以備純培養(yǎng)用。一般培養(yǎng)基的滅菌采用高壓蒸汽滅菌。（二）消毒與滅菌知識 滅菌是指殺死或消滅一定環(huán)境中的所有微生物，滅菌的方法分物理和化學滅菌法兩大類。本實驗主要介紹物理方法的一種，即加熱滅菌。加熱滅菌包括濕熱和干熱滅菌兩種。通過加熱使菌體內(nèi)蛋白質(zhì)凝固變性，從而達到殺菌目的。蛋白質(zhì)的凝固變性與其自身含水量有關，含水量越高，其凝固所需要的溫度越低。在同一溫度下，濕熱的殺菌效力比干熱大，因為在濕熱情況下，菌體吸收水分，使蛋白質(zhì)易于凝固；同時濕熱的穿透力強，可增加滅菌效力。（三）潔凈室行為規(guī)范（四）實驗室安全知識（一）培養(yǎng)基配制、滅菌、使用和保藏 按照培養(yǎng)基瓶簽所示，準確稱量一定培養(yǎng)基干粉于合適的容器，加純化水溶解。 根據(jù)培養(yǎng)基對pH的要求，用5%NaOH或5%HC1溶液調(diào)至所需pH。 如需分裝，應先加熱攪拌，待培養(yǎng)基完全溶解并均一后進行。分裝時注意不要使培養(yǎng)基沾染在管口或瓶口，以免污染。液體分裝高度以試管高度的1/4左右為宜。固體分裝裝量為管高的1/5，半固體分裝試管一般以試管高度的1/3為宜；分裝三角瓶，其裝量以不超過三角瓶容積的一半為宜。 培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后，如需要作斜面固體培養(yǎng)基，則滅菌后立即擺放成斜面，斜面長度一般以不超過試管長度的1/2為宜；半固體培養(yǎng)基滅菌后，垂直冷凝成半固體深層瓊脂。 按照培養(yǎng)基瓶簽所示的滅菌條件（溫度和時間）對配制好的培養(yǎng)基進行高壓滅菌。配制好的培養(yǎng)基應在2小時內(nèi)進行滅菌。 液體培養(yǎng)基管置專用不銹鋼筒內(nèi)，2～25℃避光保存，3周內(nèi)使用。在不銹鋼筒貼標簽，標明培養(yǎng)基名稱、培養(yǎng)基配制日期、高壓滅菌編號等信息。不同批次培養(yǎng)基不得置于同一不銹鋼筒內(nèi)。置專用不銹鋼筒，標明培養(yǎng)基名稱、制備日期、培養(yǎng)基的滅菌編號，用保鮮膜密封筒口后，2～25℃避光保存，3周內(nèi)使用。不同批次平板和接觸皿不得置于同一容器內(nèi)。 培養(yǎng)基使用之前應預培養(yǎng)，合格后方可使用。營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：2535℃，預培養(yǎng)3天。硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基：2535℃，預培養(yǎng)2天?；⒓t瓊脂培養(yǎng)基和改良馬丁培養(yǎng)基：2328℃，預培養(yǎng)3天。（二）消毒劑配制和使用%新潔爾滅溶液的配制和使用：5%新潔爾滅溶液20ml ＋注射用水980ml 作為手部和衣服浸泡消毒，設備、操作臺面和潔凈室六面擦洗消毒以及地漏消毒用，有效期為3個月。%酒精的配制與使用 基準處方：95%乙醇790 ml ＋ 純化水210 ml 作為消毒雙手（手套），擦洗設備、操作臺等表面消毒劑，有效期為14天。%來蘇兒（甲酚皂）溶液的配制和使用 基準處方：50%來蘇兒（甲酚皂）溶液40 ml ＋ 純化水960 ml 拖擦地面用，臨用前配制。 作為環(huán)境空氣和表面消毒劑。操作步驟：關閉風機→無關人員撤出消毒區(qū)，操作人員戴防護手套和防毒面具→將設備及器具暴露于空氣中→將盛有甲醛溶液的不銹鋼飯盒置不銹鋼臺面→上層飯盒倒入需要體積的甲醛（10ml/m3，每只飯盒不得多于250ml），下層飯盒倒入300ml 95%或無水乙醇→點燃下層飯盒內(nèi)乙醇，操作人員迅速離開→保留被消毒空間的甲醛氣體至少8小時→消毒結(jié)束后，開啟風機，直至消毒空間無甲醛刺激性氣味，方可進入工作。 作為環(huán)境空氣和表面消毒劑。 操作步驟：關閉風機→無關人員撤出消毒區(qū)，操作人員戴防護手套和防毒面具→將設備及器具暴露于空氣中→設定消毒時間，開啟臭氧法生器面→操作人員迅速離開→保留被消毒空間的臭氧氣體至少8小時→消毒結(jié)束后，開啟風機，直至消毒空間無臭氧氣味，方可進入工作。 %新潔爾滅溶液和75%酒精進行手部消毒。 %新潔爾滅溶液和2%來蘇爾溶液拖擦地面。 潔凈區(qū)每月對空氣消毒一次，甲醛消毒6個月一次，其余時間采用臭氧消毒。（三）微生物室設備與設施：高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的加壓滅菌鍋內(nèi)，通過加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽,待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，然后關閉排氣閥，繼續(xù)加熱，此時由于蒸汽不能溢出，而增加了滅菌器內(nèi)的壓力，從而使沸點增高，得到高于100℃的溫度。導致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌的目的。 操作步驟：向高壓滅菌器滅菌艙內(nèi)加水至排泄管口高度→放入待滅菌物品，關閉滅菌器蓋→開啟電源，設置滅菌溫度和時間以及排氣溫度→按start鍵開始滅菌（依次經(jīng)歷：升溫—排氣—升壓—保壓—降壓—排氣—降溫）→滅菌結(jié)束后，取出滅菌物品，關閉電源→清潔滅菌艙。 注意事項待滅菌物品間應留適宜間隙，便于蒸汽穿透。當溫度在80℃以上時，蓋將不會被打開；當溫度低于60℃時，即可開蓋。每次滅菌前應保持滅菌艙內(nèi)水位在規(guī)定線以上。干熱滅菌法常用于空玻璃器皿、金屬器具的滅菌。凡帶有膠皮的物品，液體及固體培養(yǎng)基等都不能用此法滅菌。將包扎好的物品放入干燥烘箱內(nèi)，注意不要擺放太密，以免妨礙空氣流通；不得使器皿與烘箱的內(nèi)層底板直接接觸。將烘箱的溫度升至160～170℃并恒溫1～2h，注意勿使溫度過高，超過170℃，器皿外包裹的紙張、棉花會被烤焦燃燒。如果是為了烤干玻璃器皿，溫度為120℃持續(xù)30分鐘即可。溫度降至60～70℃時方可打開箱門，取出物品，否則玻璃器皿會因驟冷而爆裂。用此法滅菌時，絕不能用油、蠟紙包扎物品。直接用火焰灼燒滅菌，迅速徹底。對于接種環(huán)，接種針或其它金屬用具，可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱進行滅菌。此外，在接種過程中，試管或三角瓶口，也采用通過火焰而達到滅菌的目的。（干熱滅菌） 原理：通過使用干熱空氣殺滅微生物。一般是把待滅菌的物品放入電烘箱中烘烤，加熱至160～170℃維持2h（除熱原要求250℃維持1h）。 操作步驟：將待滅菌物品正確包扎與加塞，以免滅菌后被外界污染→將包扎好的物品放入干燥烘箱內(nèi)→ （四）平板和接觸皿制備將需倒平板的培養(yǎng)基，于水浴鍋中冷卻到45～50℃,立刻倒平板。（五）微生物數(shù)量測定（一）微生物限度檢查（二）無菌檢查（三）環(huán)境監(jiān)控檢查（四）模擬灌裝檢查（五）培養(yǎng)基靈敏度檢查（六）菌株傳代與保藏（一）微生物形態(tài)觀察（菌落形態(tài)、染色與鏡檢）（二）微生物分離純化培養(yǎng)（三）API法鑒定微生物（四）PCR法鑒定微生物7思考？，你認為在制備培養(yǎng)基時要注意些什么問題？？4試述高壓蒸汽滅菌的操作方法和原理。5高壓蒸汽滅菌時應注意哪些事項？標準菌種的保藏形式我國提供的標準菌種通常是以凍干粉的形式包裝于熔封的厚玻璃容器中。在這種容器中，微生物通常與賦形劑共存，由于缺乏生長必須的環(huán)境條件，一般呈休眠狀態(tài)。純培養(yǎng)所謂微生物的純培養(yǎng)是指在一個微生物的菌落形成單位中，所有的微生物細胞或孢子都屬于生物學的同一個種。嚴格地說，純培養(yǎng)是在培養(yǎng)基上由一個細胞或孢子分裂、繁殖而產(chǎn)生的后代。在該細胞或孢子的生長過程種，不受其他微生物的侵犯，不會在培養(yǎng)物中產(chǎn)生另外微生物種的后代，在整個生長過程中不發(fā)生變異或死亡。獲取純培養(yǎng)的工作環(huán)境潔凈工作室：環(huán)境潔凈度10000級下的局部100級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)，全過程必須無菌操作，防止微生物污染。無菌隔離艙 獲取純培養(yǎng)的接種工具接種環(huán)接種針接種鏟接種鉤其他玻璃器械 獲取純培養(yǎng)的其他器具玻璃器皿：如各種規(guī)格培養(yǎng)皿。微生物實驗室常用的設備，如高壓滅菌鍋、恒溫培養(yǎng)箱等 獲取純培養(yǎng)的主要技術－移植（又稱接種）微生物的移植（或稱接種）是指將微生物接種在培養(yǎng)基上的操作。移植（又稱接種）的兩種方式－劃線 和穿刺劃線法是指用接種工具將微生物細胞移植在固體培養(yǎng)基斜面或平板上的一種方法。穿刺法是指用接種工具將微生物細胞移植到固體或半固體培養(yǎng)基內(nèi)的一種方法。影響集菌培養(yǎng)效果的若干因素n溫度 n滲透壓 n氧氣 n光 npH值和氧化還原電位n培養(yǎng)基 n抗生素驗證純培養(yǎng)的主要依據(jù)用顯微鏡觀察時，全部的生物個體是相似的，如果是細菌，對革蘭氏染色反應應當是一致的。將培養(yǎng)物制成懸液，重新傾注平板，或平板劃線培養(yǎng)后，所形成的全部菌落的形態(tài)應該是相似的。如果是細菌，將重新形成的菌落各作穿刺培養(yǎng)，其培養(yǎng)特征應當是一致的。從重新分離的各菌落作生理特征觀測時，如對氮源的利用，對糖類的發(fā)酵或同化以及其他生理生化的測定，應呈現(xiàn)出一致性。定期移植保藏法一般步驟為：將菌種接種在所要求的培養(yǎng)基上，置最適溫度下集菌培養(yǎng)。得到健壯的菌體（如有性孢子、無性孢子或細胞等）后，放于溫度較低、干燥處保藏，并且每隔一定時間重新移植培養(yǎng)一次。定期移植保藏法細菌置4～6℃保藏，芽孢桿菌每3～6個月移植一次，其他細菌每月移植一次。放線菌于4～6℃保藏，每3個月移植一次。酵母菌于4～6℃保藏，每4～6個月移植一次。絲狀真菌于4～6℃保藏，每3個月移植一次。擔子菌于4～6℃保藏，每3個月移植一次。保藏的濕度通常在50％～70％為宜。定期移植保藏法需定期檢查移植進行時，應仔細核對集菌培養(yǎng)完成后，應比較培養(yǎng)特征應注意觀察各代之間的變化 瓊脂斜面低溫保藏法菌種的典型菌落接種至斜面，規(guī)定的溫度和時間培養(yǎng)，充分生長，硅膠塞換成無菌橡膠塞。4～6 ℃冰箱保藏a:1～3個月移植一次，繼續(xù)保藏。b:用半固體高層培養(yǎng)基穿刺培養(yǎng)，可保藏半年至一年。瓊脂斜面低溫保藏法n適用細菌、霉菌、酵母菌及放線菌保藏 n優(yōu)點：簡便、大多數(shù)微生物適用n缺點：保藏期短；傳代次數(shù)多；容易發(fā)生變異及污染。n生孢梭菌用硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基、乙型溶血性鏈球菌及肺炎球菌用血肉湯（瓊脂）培養(yǎng)基液體石蠟保藏法一般步驟為：準備液體石蠟并滅菌去水備用。獲得需要保藏菌種的純培養(yǎng)，將液體石蠟注入培養(yǎng)容器中，并完全覆蓋培養(yǎng)基?！?cm為宜 4～6 ℃冰箱保藏液體石蠟保藏法 甘油冷凍保藏法n將保藏菌種接種瓊脂斜面上，適宜溫度下培養(yǎng)適宜時間，用無菌接種環(huán)輕輕刮取菌苔，并通過接種環(huán)與試管壁之間的輕輕摩擦使菌種充分擴散到無菌水中，調(diào)證菌液濃度，向已制備好的菌懸液加入等體積的20％無菌甘油，輕輕振試管管，使內(nèi)容物充分混合，分裝于無菌小管。甘油冷凍管最好在30 ℃貯存。沙管保藏法 n制備沙管 n培養(yǎng)接種 n制備菌懸液 n混菌 n干燥 n保藏n適合保藏芽孢桿菌、梭菌、放線菌和一些絲狀真菌。土壤保藏法n用土壤替代沙管保藏法中的河沙，其余操作與沙管保藏法相同 n適合保藏土壤細菌、放線菌和絲狀真菌，時間為2～6年。硅膠保藏法n用硅膠替代沙管保藏法中的河沙，其余操作與沙管保藏法相同 n適合保藏酵母菌和某些絲狀真菌濾紙保藏法n保藏微生物細胞或孢子的載體為濾紙。n對細菌、酵母菌、絲狀真菌等都有一定的效果，有些菌種最長可達17年明膠片保藏法n制備無菌營養(yǎng)明膠 n制備無菌石蠟濾紙n微生物培養(yǎng)并制成濃厚的懸液 n在懸液中加入營養(yǎng)明膠n將含微生物細胞或孢子的營養(yǎng)明膠滴于石蠟濾紙表面 n干燥n將形成的明膠片密封保藏麩皮保藏法n我國歷史悠久的微生物保藏法n適于保藏根霉、曲霉、青霉、紅曲霉等屬和赤霉菌梭氏真空干燥保藏法n在小試管中放置菌懸液。n小試管在大試管中放置 n大試管在真空狀態(tài)下干燥 n密封大試管液體直接干燥保藏法n需要加入保護劑 n干燥之前不需凍結(jié)n在干燥過程中為增大蒸發(fā)面積，可加入多孔材料 n干燥后的容器應熔封蒸餾水保藏法n最為簡便的微生物保藏法n微生物細胞或孢子保藏在蒸餾水中 n保藏的容器應密封n適于保藏棒狀桿菌、土壤桿菌和假單孢菌等液氮冰箱超低溫保藏法n需專用設備－液氮超低溫冰箱 n菌懸液密封于安瓿管內(nèi)，控速凍結(jié) n國外已普遍采用 n保藏時間長凍結(jié)真空干燥保藏法n歷史悠久，又稱凍干法n不產(chǎn)生孢子只產(chǎn)生菌絲體的絲狀真菌不宜采用該法 n適用面廣 n保藏時間可達10年以上n多為菌種保藏機構采用凍結(jié)真空干燥保藏法n密封性好，可避免保藏期間的污染 n保藏容器體積小，方便攜帶和貯藏 n保藏時間更長，變異概率更低普通微生物實驗室適用的保藏技術n瓊脂斜面低溫保藏法 液體石蠟保藏法 低溫冷凍保藏法 甘油冷凍保藏法 nnn瓊脂斜面低溫保藏法n細菌置4～6℃保藏，芽孢桿菌每3～6個月移植一次，其他細菌每月移植一次。4～6℃保藏，每3個月移植一次。4～6℃保藏，每4～6個月移植一次。4～6