【文章內容簡介】 點是由Akt (Ser259)和PKA催化的。 ? 抑制：RKIP可干擾RafMEK的結合，抑制后者磷酸化和活化。,第五十九頁，共一百二十三頁。,2. ERK1/2通路中MKK (MEK) ? MEK1和MEK2是該通路主要的MEK ? 為雙特異性蛋白激酶 ? 通過(tōnggu242。)兩個殘基的磷酸化而被激活 ( Ser或Thr) (同MAPK) ? 突變可引起其活性增加(不同于MAPK) ? 酸性氨基酸替代，明顯增加其活性 ? 特異性較高，僅磷酸化少數底物,第六十頁，共一百二十三頁。,? MEK4可磷酸化非MAPK ? MEK1和MEK2含3個非酶活性結構域 — ERK1/2結合(ji233。h233。)位點 ( D域 ) 富含Pro結構域 核輸出序列 ( NES ),第六十一頁，共一百二十三頁。,? MEK1和MEK2的上游調節(jié)因子(yīnzǐ) — Raf、RTK、非RTK、GPCR 在轉化細胞： Ras → Raf1 → MEK1 → ERK1/2 在心肌細胞 ARaf → MEK1 → ERK1/2 在PC細胞 BRaf → MEK1 → ERK1/2,第六十二頁，共一百二十三頁。,第六十三頁，共一百二十三頁。,3. ERK1/2蛋白激酶的作用底物及滅活 ? 底物的保守性磷酸化位點模體為 ProLueSer/ThrPro ? 底物蛋白 — 胞質蛋白: p90S6K 、cPLA2 、EGF 受體 細胞骨架: MAP2 、4 、Tau 轉錄(zhuǎn l249。)因子：Elk1, Ets1, Sap1a, cMyc等 ? 滅活: MKP1, 3, 4,第六十四頁，共一百二十三頁。,4. ERK1/2通路的生物學功能 ? 刺激細胞增殖 ? 抑制細胞生長、分化 ? 細胞周期調控(di224。o k242。nɡ) ? 調控MTOC ? 紡錘體的組裝 ? 促進細胞存活 ? 某些情況下，與細胞死亡有關,第六十五頁，共一百二十三頁。,第六十六頁，共一百二十三頁。,第六十七頁，共一百二十三頁。,第六十八頁，共一百二十三頁。,（二）JNK信號轉導通路 1991年鑒定出的新的MAPK 與ERK有兩點不同： ? 被紫外線輻射(fsh232。)等細胞應激所激活 ? 磷酸化cJun的氨基活化位點 故稱之為cJun Nterminal kinase (JNK) 鼠的同源物則被命名為Stress activated protein kinase (SAPK)。,第六十九頁，共一百二十三頁。,之所以稱為SAPK是因為在應答各種刺激時，它們(tā men)的活性增加。這些應激包括： ? 細胞因子 ? 生長因子撤離 ? 干擾DNA和蛋白合成的試劑 ? UV輻射 ? 熱休克 ? 反應活性氧 (ROS) ? 高滲透壓,第七十頁，共一百二十三頁。,JNK信號轉導通路 ? 是已知的應答最多樣刺激(c236。jī)的細胞信號轉導途徑之一 ? JNK通過ThrProTyr模體的磷酸化被激活 ? 由JNK、 MAP2Ks、 MAP3Ks 和MAP4Ks組成 ? 細胞外配體應答的JNK通路照比細胞應激應答研究得較為清楚,第七十一頁，共一百二十三頁。,第七十二頁，共一百二十三頁。,JNK： ? 人的JNK由3個基因(jīyīn) ( jnk1, jnk 2和 jnk3)編碼 ? 3個基因轉錄產物的不同剪接產生10個JNK亞型 (46kDa, 55kDa) ? JNK家族成員間的激酶催化核心的同源性為87% ? 同一基因編碼的46kDa和55kDa亞型無明顯的功能差異,第七十三頁，共一百二十三頁。,? JNK1和JNK2廣泛地在多種組織表達 ? JNK3 主要在神經組織表達 ? JNK1和JNK2 在激酶域的不同剪接體可改變JNK與它們底物(dǐ w249。)的相互作用 ? 不同的亞型受不同的調節(jié),第七十四頁，共一百二十三頁。,JNK底物包括： ? 轉錄因子 cJun, JunD, ATF2, ATFα, Elk1 Sap1a, GABPα, GABPβ ? 腫瘤抑制蛋白p53 JNK生理功能： JNK1和JNK2有重疊功能，在免疫(miǎny236。)應答和胚胎發(fā)育中具有重要的調節(jié)作用。 JNK3在神經組織中有特異功能,第七十五頁，共一百二十三頁。,第七十六頁，共一百二十三頁。,1. JNK信號通路MKK和MKKK MKK (MAP2Ks) ▲ MKK4 ( SEK1/MEK4/JNKK1/SKK1 ) ? 主要激活JNK，但對p38也有活化作用 ? 可能是個抑癌基因 ? 胚胎發(fā)育所必需(b236。xū) ? 使細胞免于凋亡 ? 不是惟一的激活劑,第七十七頁，共一百二十三頁。,▲ MKK7 (MEK7/JNKK2/SKK4 ) ? 特異地激活JNK，而不激活p38或ERK ? 與MKK4相關，屬于哺乳動物細胞MAPKK超家族 ? 與果蠅(ɡuǒ y237。nɡ)的HEP(DJNK的激活劑)密切相關 ? MKK7基因編碼6個蛋白亞型 ? 不同亞型應答不同的細胞外刺激和上游激酶,第七十八頁，共一百二十三頁。,MKK4與MKK7在人和鼠組織中廣泛表達，但在不同(b249。 t243。nɡ)的組織起表達的豐度不同(b249。 t243。nɡ) MKK4與MKK7介導來自同一細胞外刺激的信號轉導，但它們被不同MAP3Ks所激活。 同MEK1/2，用酸性氨基酸置換磷酸化位點的氨基酸，可增加其激酶活性。,第七十九頁，共一百二十三頁。,MEKK (MAP3Ks) 包括(bāoku242。)： MEKK1~ ASK1/MAPKKK5 MAPKKK TAK1 Tpl2 、 MLK2/MSK MLK3/SPRK/PTK1 MUK/DLK/ZPK LZK,第八十頁，共一百二十三頁。,▲ MEKKs ( MAPK/ERK kinase kinases ) ? 因與酵母的STE11同源而被克隆 ? 首先鑒定出的激活JNK的MAP3K是MEKK1 ? 目前已克隆的4種稱為MEKK1~4 ? 在蛋白C末端(m242。 duān)具有同源的激酶域，而它們的N末端(m242。 duān)幾乎無同源性,第八十一頁，共一百二十三頁。,? MEKK1和4與G蛋白(d224。nb225。i)Cdc42和Rac相互作用 ? MEKK1還可結合Ras ? MEKKs 也調節(jié)其他細胞信號轉導途徑 MEKK1~3激活ERK通路 MEKK3~4激活p38通路,第八十二頁，共一