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正文內(nèi)容

微生物實(shí)驗(yàn)室sop文件(編輯修改稿)

2024-10-21 00:12 本頁(yè)面
 

【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 境中;結(jié)核培養(yǎng)置于37OC培養(yǎng)箱培養(yǎng),每星期檢查兩次有否可疑菌落生長(zhǎng)。收到的普通血培養(yǎng)瓶(如AER)應(yīng)進(jìn)行瓶?jī)?nèi)氣壓平衡處理,厭氧培養(yǎng)瓶直接放入培養(yǎng)箱中。 對(duì)新到崗的實(shí)習(xí)或進(jìn)修人員應(yīng)認(rèn)真交代本崗位的一切事宜并且認(rèn)真作好帶教工作。 厭氧培養(yǎng)應(yīng)接種血平皿或厭氧平皿置于厭氧袋中培養(yǎng),同時(shí)接種BMP進(jìn)行普通培養(yǎng)。 標(biāo)本培養(yǎng)處理后幫助2班將需要的各種標(biāo)本收集并滅菌處理。 負(fù)責(zé)配制培養(yǎng)基,并做好記錄。 崗位2班(負(fù)責(zé)菌株鑒定與藥敏的分析、涂片檢查標(biāo)本的報(bào)告、室內(nèi)質(zhì)控等)。、冰箱的工作溫度是否在設(shè)定的范圍內(nèi),并做好記錄;檢查各種培養(yǎng)基及試劑的庫(kù)存量,做好需配制的培養(yǎng)基或需領(lǐng)出的試劑的記錄工作,對(duì)需購(gòu)買(mǎi)的試劑、平板、培養(yǎng)基、染色液等應(yīng)及時(shí)記錄并告訴室組長(zhǎng),以便及時(shí)計(jì)劃報(bào)主任批準(zhǔn)。 做好室內(nèi)常用實(shí)驗(yàn)試劑如觸酶、凝固酶、氧化酶或蛋白胨水的質(zhì)量控制,并做好記錄。 負(fù)責(zé)處理上日接種標(biāo)本的菌種鑒定與藥敏試驗(yàn),觀察血液增菌培養(yǎng)瓶,如發(fā)現(xiàn)有細(xì)菌生長(zhǎng),應(yīng)按三級(jí)報(bào)告制度處理。觀察培養(yǎng)平板,分析、挑取可疑菌落涂片革蘭染色,能上機(jī)的做好觸酶、凝固酶、氧化酶或接種蛋白胨水等相應(yīng)的檢查后上機(jī),還不能上機(jī)或手工試驗(yàn)的則選用相應(yīng)的平板分純。用于鑒定或藥敏試驗(yàn)的菌落應(yīng)選取培養(yǎng)1824小時(shí)的純菌落進(jìn)行試驗(yàn)。 對(duì)一些不適合用儀器檢測(cè)的細(xì)菌,改用手工簽定或用標(biāo)準(zhǔn)的KB法進(jìn)行藥敏。碰到異常的耐藥模式,如碰到耐萬(wàn)古霉素的葡萄球菌、糞腸球菌,耐泰能的大腸埃希菌、克雷伯菌屬、腸桿菌屬等報(bào)告時(shí)一定要慎重。遇到可疑多重耐藥菌株時(shí),加做特殊的藥敏紙片幫助鑒定。,物體表面菌落計(jì)數(shù)標(biāo)本應(yīng)于收到標(biāo)本后2小時(shí)內(nèi)處理,消毒液標(biāo)本應(yīng)于4小時(shí)內(nèi)處理。處理方法按控感監(jiān)控標(biāo)本處理與報(bào)告進(jìn)行。:① 抗酸染色嚴(yán)格按照操作規(guī)程,胸腹水、尿液、腦脊液等標(biāo)本應(yīng)在5000轉(zhuǎn)/分高速離心10分鐘后,取沉淀涂厚片,自然干燥后固定,按要求染色后鏡檢。② G雙球菌涂片,應(yīng)用滾動(dòng)式涂片法從波片一端涂向另一端,反復(fù)幾次,火焰固定后進(jìn)行革蘭氏染色。③ 腦脊液隱球菌涂片,應(yīng)快速離心后倒去上清液,沉淀涂片、加相應(yīng)的優(yōu)質(zhì)墨汁混勻后鏡檢。 對(duì)新到崗的實(shí)習(xí)或進(jìn)修人員應(yīng)認(rèn)真交代本崗位的一切事宜并且認(rèn)真作好帶教工作。:崗位職責(zé)分開(kāi)是相對(duì)的,同事間需要互相協(xié)作,互相幫助,共同完成當(dāng)天的工作。如遇到三個(gè)人上班,則其中一個(gè)做好室內(nèi)日常記錄的檢查完善和控制感染標(biāo)本的處理工作。如遇一個(gè)人上班,則擔(dān)負(fù)1崗位班、2崗位班的所有工作。2普通培養(yǎng)陰性操作程序仔細(xì)查對(duì)標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗(yàn)單是否正確,標(biāo)本質(zhì)量是否合格,若收檢標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確,標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗(yàn),否則查找原因并在有關(guān)記錄本上記錄。標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告:1)拭子、分泌物標(biāo)本 標(biāo)本涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線,再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第248小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時(shí)未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。2)尿液標(biāo)本 取5ml尿液,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘,取離心沉淀物,接種環(huán)取樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線,再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第248小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時(shí)未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。3)引流液 標(biāo)本3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘,取離心沉淀物,接種環(huán)取樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線,再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第248小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時(shí)未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。4)痰液或咽拭子標(biāo)本 無(wú)菌接種環(huán)可疑處采樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線,再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第248小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時(shí)未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。5)糞便或肛拭子等腸道標(biāo)本 以無(wú)菌接種環(huán)桃取可疑處標(biāo)本涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線,再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第248小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時(shí)未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。6)留置針頭、小導(dǎo)管等標(biāo)本 標(biāo)本置無(wú)菌管中,加入增菌液2ml,35℃溫箱培養(yǎng)48小時(shí)觀察培養(yǎng)液有無(wú)混濁,采樣涂于普通血平板、麥康凱平板成原始線,再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第248小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至72小時(shí)未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出普通致病細(xì)菌。2真菌培養(yǎng)陰性操作程序仔細(xì)查對(duì)標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗(yàn)單是否正確,標(biāo)本質(zhì)量是否合格,若收檢標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確,標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗(yàn),否則查找原因并在有關(guān)記錄本上記錄。標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告:1)拭子、分泌物標(biāo)本 標(biāo)本涂于TTC沙保羅平板成原始線,再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。2)尿液標(biāo)本 取5ml尿液,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘,取離心沉淀物,接種環(huán)取樣涂于TTC沙保羅平板成原始線,再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。3)引流液 標(biāo)本3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘,取離心沉淀物,接種環(huán)取樣涂于TTC沙保羅平板成原始線,再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。4)痰液或咽拭子標(biāo)本 無(wú)菌接種環(huán)可疑處采樣涂于TTC沙保羅平板成原始線,再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。5)糞便或肛拭子等腸道標(biāo)本 以無(wú)菌接種環(huán)桃取可疑處標(biāo)本涂于TTC沙保羅平板成原始線,再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。6)留置針頭、小導(dǎo)管等標(biāo)本 標(biāo)本置無(wú)菌管中,加入增菌液2ml,35℃溫箱培養(yǎng)48小時(shí)觀察培養(yǎng)液有無(wú)混濁,采樣涂于TTC沙保羅平板成原始線,再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置25℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時(shí)觀察平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至第4天未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出真菌。2苛養(yǎng)菌培養(yǎng)陰性操作程序仔細(xì)查對(duì)標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗(yàn)單是否正確,標(biāo)本質(zhì)量是否合格,若收檢標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確,標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗(yàn),否則查找原因并在有關(guān)記錄本上記錄。標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告:1)拭子、分泌物標(biāo)本 標(biāo)本涂于普通血瓊脂平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始線,再以無(wú)菌接種環(huán)畫(huà)線分離后置C02缸,35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。2)尿液標(biāo)本 取5ml尿液,3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘,取離心沉淀物,接種環(huán)取樣涂于普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始線,再畫(huà)線分離后置C02缸,35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。3)引流液 標(biāo)本3000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘,取離心沉淀物,接種環(huán)取樣畫(huà)線分離接種普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板,置C02缸,35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。4)痰液或咽拭子標(biāo)本 無(wú)菌接種環(huán)可疑處采樣涂于普通血平板、巧克力(含V、X因子)平板原始線,再畫(huà)線分離后置C02缸,35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出肺炎球菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。5)糞便或肛拭子等腸道標(biāo)本 以無(wú)菌接種環(huán)桃取可疑處標(biāo)本涂于血平板、布氏血平板成原始線,再分離畫(huà)線后置于C02缸,放入35℃溫箱培養(yǎng)。另取約1g標(biāo)本接種堿性蛋白胨水中,35℃溫箱培養(yǎng)2472小時(shí),再轉(zhuǎn)種高鹽平板、中國(guó)蘭平板、山梨醇麥康凱平板。培養(yǎng)第2472小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出弧菌、螺桿菌等細(xì)菌。6)留置針頭、小導(dǎo)管等標(biāo)本 標(biāo)本置無(wú)菌管中,加入增菌液2ml,35℃溫箱培養(yǎng)48小時(shí)觀察培養(yǎng)液有無(wú)混濁,采樣轉(zhuǎn)種血平板、巧克力(含V、X因子)平板成原始線,再畫(huà)線分離后置于C02缸,35℃溫箱培養(yǎng)。培養(yǎng)第2472小時(shí)觀察各平板上有否出現(xiàn)可疑菌落,若繼續(xù)培養(yǎng)至第5天未見(jiàn)可疑菌落,則報(bào)告未培養(yǎng)出奈瑟氏菌、嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌。2抗酸培養(yǎng)陰性操作程序仔細(xì)查對(duì)標(biāo)本標(biāo)簽與檢驗(yàn)單是否正確,標(biāo)本質(zhì)量是否合格,若收檢標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確,標(biāo)本質(zhì)量合格則進(jìn)行接收檢驗(yàn),否則查找原因并在有關(guān)記錄本上記錄。標(biāo)本處理、檢驗(yàn)與結(jié)果報(bào)告: 液性引流標(biāo)本(如腹水、尿液、CSF等)直接離心留沉淀物,雜菌污染標(biāo)本(如大便、痰等)取樣置無(wú)菌管,加入1N NaOH1ml作用30分鐘,再加入1N HCl1ml中和,3000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘,取沉淀物100μl量接種羅氏培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。每星期觀察一至兩次培養(yǎng)基斜面,結(jié)果連續(xù)觀察七個(gè)星期以上未發(fā)現(xiàn)有可疑菌落生長(zhǎng),報(bào)告未培養(yǎng)出分枝桿菌。2支原體培養(yǎng)檢驗(yàn)操作程序一、接收標(biāo)本:標(biāo)本與檢驗(yàn)單查對(duì)正確,標(biāo)本質(zhì)量合格。二、標(biāo)本處理:接種Uu、Mh培養(yǎng)藥敏一體試劑盒:操作前將所需試劑取出置室溫30分鐘。A排第一孔加入培養(yǎng)液100μL作為陰性對(duì)照;將標(biāo)本拭子直接放入培養(yǎng)液中充分振蕩并在瓶壁擠干拭子,若為男性尿液取離心沉淀物150μL或陽(yáng)性標(biāo)本取50μL于培養(yǎng)液中混勻。將混有標(biāo)本的培養(yǎng)液各100μL加入A排余下及B排各孔中;各孔加礦物油覆蓋,置于37℃溫箱培養(yǎng)。第248小時(shí)分別觀察記錄結(jié)果。結(jié)果判斷原理:培養(yǎng)基含有相應(yīng)支原體生長(zhǎng)所需的蛋白質(zhì)、馬血清、生長(zhǎng)因子、底物及酚紅指示劑,當(dāng)有支原體生長(zhǎng)時(shí),底物被分解,使PH值升高,培養(yǎng)基由橙黃色變成紅色,且清亮為陽(yáng)性。培養(yǎng)基不變色為陰性。B1孔陽(yáng)性為解脲支原體陽(yáng)性;B2孔陽(yáng)性為人型支原體陽(yáng)性。藥敏孔A排為高濃度,B排為低濃度,變紅則耐藥,不變紅示敏感而不生長(zhǎng)。當(dāng)高濃度與低濃度兩孔均不生長(zhǎng)(不變色)為該藥敏感;高濃度不變色低濃度變紅為該藥物中介;高濃度與低濃度均變紅為該藥物耐藥。結(jié)果一:第24 小時(shí)B1孔由橙黃色變成紅色示解脲支原體陽(yáng)性,藥敏看結(jié)果判斷;第24小時(shí)、48小時(shí)觀察B2孔均不變色,示無(wú)人型支原體生長(zhǎng)或濃度極低,報(bào)告培養(yǎng)出解脲支原體,未培養(yǎng)出人型支原體。結(jié)果二:第24 小時(shí)B1孔不變色示解脲支原體陰性;第48小時(shí)觀察B2孔由橙黃色變成紅色示人型支原體陽(yáng)性,藥敏看結(jié)果判斷。報(bào)告未培養(yǎng)出解脲支原體,培養(yǎng)出人型支原體附藥敏結(jié)果。結(jié)果三:第24 小時(shí)B1孔由橙黃色變成紅色示解脲支原體陽(yáng)性,藥敏看結(jié)果判斷;第48小時(shí)觀察B2孔由橙黃色變成紅色示人型支原體陽(yáng)性,藥敏看結(jié)果判斷,報(bào)告培養(yǎng)出解脲支原體與人型支原體附藥敏結(jié)果。結(jié)果四:陽(yáng)性對(duì)照孔由橙黃色變成紅色示支原體陽(yáng)性,藥敏看結(jié)果判斷;第24小時(shí)、48小時(shí)觀察B1孔、B2孔均不變色,示無(wú)解脲、人型支原體生長(zhǎng)或濃度極低,報(bào)告培養(yǎng)出非解脲、人型支原體或囑病人重留標(biāo)本復(fù)查。結(jié)果五:第248小時(shí)觀察B1孔、B2孔均不變色,示無(wú)支原體生長(zhǎng)或濃度極低,報(bào)告未培養(yǎng)出解脲及人型支原體。第二篇:檢驗(yàn)科SOP文件蕪湖市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科管理文件檢驗(yàn)科工作制度檢驗(yàn)科值班制度血庫(kù)工作制度臨床室工作制度生化室工作制度細(xì)菌室工作制度門(mén)診化驗(yàn)室工作制度質(zhì)量控制工作制度檢驗(yàn)科及實(shí)驗(yàn)室消毒隔離制度腸道化驗(yàn)室工作制度1檢驗(yàn)報(bào)告單書(shū)寫(xiě)登記制度1實(shí)習(xí)生帶教計(jì)劃1年輕醫(yī)生培養(yǎng)計(jì)劃1儀器設(shè)備管理制度1醫(yī)療安全防范制度1醫(yī)患溝通制度1門(mén)診檢驗(yàn)科服務(wù)公約1輸血科預(yù)防感染制度1輸血科工作質(zhì)量管理制度 輸血科報(bào)告登記制度2輸血反應(yīng)及處理方法制度2臨床用血安全管理制度 <一> 科主任職責(zé) <二> 主管檢驗(yàn)師職責(zé) <三> 檢驗(yàn)師職責(zé) <四> 檢驗(yàn)士職責(zé)檢驗(yàn)科工作制度檢驗(yàn)科應(yīng)積極配合臨床各科的診療活動(dòng),進(jìn)行本專(zhuān)業(yè)的檢驗(yàn)工作。要認(rèn)真制定各工作室:臨床、門(mén)診、生化、血液、細(xì)菌等室的工作制度。嚴(yán)格按照規(guī)章制度和操作要求,認(rèn)真地進(jìn)行本室的檢測(cè)工作。各病區(qū)檢驗(yàn)標(biāo)本及化驗(yàn)單,應(yīng)于每日早晨8:00前送交檢驗(yàn)科(急診除外)一般檢驗(yàn)當(dāng)日下午下班前發(fā)出報(bào)告。門(mén)診常規(guī)隨到隨做隨報(bào)。急診檢驗(yàn)申請(qǐng)單要注明“急”字、優(yōu)先檢驗(yàn),凡送、收、發(fā)的檢驗(yàn)標(biāo)本及申請(qǐng)單都要嚴(yán)格核對(duì)姓名、床號(hào)、名稱(chēng)、號(hào)碼等。不符合規(guī)定退回重新留取。檢驗(yàn)單要遂次填寫(xiě)明確,必須由操作者簽全名方可有效,如遇檢驗(yàn)結(jié)果可疑時(shí),應(yīng)立即與臨床科聯(lián)系復(fù)查。遇有檢驗(yàn)?zāi)康捻?xiàng)目之外的陽(yáng)性結(jié)果要主動(dòng)報(bào)告。認(rèn)真做好檢驗(yàn)結(jié)果的登記工作和報(bào)告單發(fā)出前的消毒審核工作。使用劇毒、腐蝕、易燃、易爆試劑
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