tunel染色檢測(cè)細(xì)胞凋亡(編輯修改稿)
2024-10-06 02:09 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 ml％二氨基聯(lián)苯（DAB）溶液：DAB 5mg；PBS 10ml，, 臨用前過(guò)濾后，%。％甲基綠（）：；。100％丁醇，100％、95％、90％、80％和70％乙醇，二甲苯，10％中性甲醛溶液，乙酸，松香水等。過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗地高辛抗體（ONCOR）（二）實(shí)驗(yàn)步驟標(biāo)本預(yù)處理：（1）石蠟包埋的組織切片預(yù)處理：將組織切片置于染色缸中，用二甲苯洗兩次，每次5min。用無(wú)水乙醇洗兩次，每次3min。用95％和75％乙醇各洗一次，每次3min。用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液（20ug／ml），于室溫水解15min，去除組織蛋白。用蒸餾水洗4次，每次2min，然后按下述步驟2進(jìn)行操作。（2）冰凍組織切片預(yù)處理：將冰凍組織切片置10％中性甲醛中，于室溫固定10min后，去除多余液體。用PBS洗兩次，每次5min。置乙醇：乙酸（2：1）的溶液中，于20℃處理5min，去除多余液體。用PBS洗兩次，每次5min，然后按下述步驟2進(jìn)行操作。（3）培養(yǎng)的或從組織分離的細(xì)胞的預(yù)處理：將約 5 107個(gè)/ml細(xì)胞于 4％中性甲醛室溫中固定 10min。在載玻片上滴加 50～100μl細(xì)胞懸液并使之干燥。用PBS洗兩次，每次5min，然后按下述步驟2進(jìn)行操作。色缸中加入含2％過(guò)氧化氫的PBS，于室溫反應(yīng)5min。用PBS洗兩次，每次5min。用濾紙小心吸去載玻片上組織周圍的多余液體，立即在切
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