43酵母細(xì)胞的固定化蘭(編輯修改稿)
2024-10-05 14:53 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 放入 50 ml的小燒杯中，參加蒸餾水 10 ml，用玻璃棒攪拌，使酵母細(xì)胞混合均勻，成糊狀，放置 1h左右使其活化。 活化 ： 就是讓處于休眠狀態(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài) 本卷須知 A、選用的干酵母要具有較強(qiáng)的活性，而且物種單一 B、在缺水狀態(tài)下，微生物處于休眠狀態(tài)。注意水的用量 第二十四頁，共四十八頁。 實驗操作 配制物質(zhì)的量濃度為 稱取無水 CaCl2 。放人 200mL的燒杯中，參加150mL的蒸餾水，使其充分溶解，待用。 本卷須知 溶解物質(zhì)要徹底，勿用自來水溶解，以防自來水中各種離子影響實驗結(jié)果 第二十五頁，共四十八頁。 配制海藻酸鈉溶液 實驗操作 稱取 ，放入 50mL小燒杯中，加人 10mL水，用酒精燈加熱，邊加熱邊攪拌，將海藻酸鈉調(diào)成糊狀，直至完全溶化，用蒸餾水定容至 10mL。注意，加熱時要用小火，或者間斷加熱，反復(fù)幾次，直到海藻酸鈉溶化為止。 說明： 海藻酸鈉的濃度涉及到固定化細(xì)胞的質(zhì)量。如果海藻酸鈉濃度過高，將很難形成凝膠珠；如果濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞的數(shù)目少，影響實驗效果。 第二十六頁，共四十八頁。 海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合 將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，參加已活化的酵母細(xì)胞，進(jìn)行充分?jǐn)嚢瑁蛊浠旌暇鶆?，再轉(zhuǎn)移至注射器中 實驗操作 本卷須知 A、溶化好的海藻酸鈉溶液必須冷卻至室溫，否那么會因溫度過高殺死酵母菌 B、攪拌要徹底充分，使兩者混合均勻，以免影響實驗結(jié)果的觀察 第二十七頁，共四十八頁。 實驗操作 固定化酵母細(xì)胞 以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的 CaCl2溶液中，觀察液滴在 CaCl2溶液中形成凝膠珠的情形。將這些凝膠珠在 CaCl2溶液中浸泡 30min左右如果沒有注射器，可以在小塑料瓶上安裝一個孔徑為 2 mm的噴嘴來使用。 本卷須知 A、可利用海藻酸鈉制成不含酵母菌的凝膠珠，用作對照 B、海藻酸鈉膠體在 CaCl2這種電解質(zhì)的作用下，發(fā)生聚沉，形成凝膠珠，需穩(wěn)定 30min左右 第二十八頁，共四十八頁。 〔二〕用固定化細(xì)胞發(fā)酵 將固定好的酵母細(xì)胞 (凝膠珠 )用蒸餾水沖洗 23次。 實驗操作 將 150mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 10%的葡萄糖溶液轉(zhuǎn)移到 200mL的錐形瓶中，再參加固定好的酵母細(xì)胞，置于 25℃ 下發(fā)降 24h。 本卷須知 ① 控制好發(fā)酵溫度，一般是室溫 25℃ ② 發(fā)酵時間可視具體情況而定，一般時間稍長一些，效果明顯 ③ 可用不含酵母的凝膠珠做相同的處理，對照實驗結(jié)果 第二十九頁，共四十八頁。 海藻酸鈉在水中 溶解的速度較慢 ，需要通過加熱促進(jìn)其溶解。溶解海藻酸鈉，
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