新人教版生物選修1課題3血紅蛋白的提取和分離之一(編輯修改稿)
2024-12-24 11:33 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 ）體積，再加 40％體積的（ ）（ 溶解細(xì)胞膜 ） ，置于（ ）上充分?jǐn)嚢?0分鐘（加速細(xì)胞破裂） , 細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白 . (3)分離血紅蛋白溶液：將攪拌好混合液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，以 2020r/min的速度離心 10 min ，試管中的溶液分為 4層 : 原血液 甲苯 磁力攪拌器 蒸餾水 第 1層（最上層）： （ ）甲苯層 第 2層（中上層）： （ ） 的沉淀層， （ ）色薄層固體 第 3層（中下層）： （ ） 的水溶液層 （ ）的液體 第 4層（最下層）： 其它雜質(zhì)（ ）的沉淀層 無色透明 脂溶性物質(zhì) 白 血紅蛋白 紅色透明 暗紅色 用濾紙過濾，除去脂溶性沉淀層，于分液漏斗中靜置片刻后， 分出下層的紅色透明液體 。 取 ( )ml的血紅蛋白溶液裝入（ ）中，將透析袋放入盛有 300ml的物質(zhì)的量濃度為 20mmol/L的（ ）中，pH為（ ），透析 12小時，目的是（ ）或用于更換樣品中的（ ）。透析袋一般用 硝酸纖維素 制成，又稱玻璃紙。 除去樣品中分子量較小的雜質(zhì) 透析袋 磷酸緩沖液 緩沖液 (4)透析 1 1）凝膠色譜柱的制作 ① 取長 40厘米，內(nèi)徑 管，兩端需用砂紙磨平。 ② 底塞的制作： 打孔 挖出凹穴 安裝移液管頭部 覆蓋尼龍網(wǎng) ，再用 100目尼龍紗包好。 a、選擇合適的的橡皮塞，中間打孔； b、在橡皮塞頂部切出鍋底狀的（ ），在 （ ）頭部切下（ ）長的一段，插入橡皮塞孔內(nèi)，上部不得超過橡皮塞的凹穴底面。 凹穴 移液管 5cm 底塞中插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面，否則難以鋪實尼龍網(wǎng)，還會導(dǎo)致液體殘留，蛋白質(zhì)分離不徹底。 （ ）上，用（ ）的尼龍紗將橡皮塞（ ）包好，插到玻璃管一端。 d、色譜柱下端用移液頭部做（ ），連接一細(xì)的（ ），并用螺旋夾控制尼龍管的（ ），另一端放入收集（ ）的收集器內(nèi) 橡皮塞的凹面 100目 上部 出口部位 尼龍管 打開與關(guān)閉 色譜流出液 ⑤ 安裝其他附屬結(jié)構(gòu)。 ③ 頂塞的制作： 插入安裝了玻璃管的橡皮塞 ④ 組裝：將上述三者按相應(yīng)位置組裝成一個整體 。 2）凝膠色譜柱填料的處理 （ 1）凝膠的選擇： （ ）（ G75） “ G”表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度 及分離范圍。 75表示凝膠的得水值，即每克凝膠 膨脹時吸水 。 （ 2）方法： 配置凝膠懸浮液：計算并稱取一定量的凝膠浸泡于（ ）中充分溶脹后，配成（ ）。 蒸餾水 凝膠懸浮液 交聯(lián)葡聚糖凝膠① 固定：將色譜柱處置固定在支架上 ② 裝填： 將（
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