血紅蛋白的提取和分離-學(xué)案(編輯修改稿)
2024-11-17 22:17 本頁面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 加樣前：打開流出口，使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到與凝膠面_____，關(guān)閉出口②加樣：用吸管小心地將1 mL透析后的樣品加到色譜柱的_____，注意不要破壞凝膠面③加樣后：打開下端出口，使樣品滲入_______內(nèi)↓(4)洗脫:_____下端出口,加入磷酸緩沖液,連接______________,_____下端出口,進(jìn)行洗脫——純度鑒定:判斷純化的蛋白質(zhì)是否達(dá)到要求,需要進(jìn)行___________的鑒定。鑒定方法中,使用最多的是________________________。三、操作提示:_________、離心速度與_________十分重要。洗滌次數(shù)過少,無法除去_____蛋白。離心速度過高和時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使白細(xì)胞等一同沉淀,達(dá)不到分離的效果。:商品凝膠使用前需直接放在_______中膨脹,可以將加入洗脫液的濕凝膠用沸水浴加熱,加速膨脹。:在裝填凝膠柱時(shí),不得有氣泡存在。氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的_________,降低_________。:如果紅色區(qū)帶__________________,說明色譜柱制作成功。【預(yù)習(xí)小測(cè)】,無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,移動(dòng)速度較慢?！? )?！? )。 ( ),應(yīng)快速高速離心?！? ),提純時(shí)雜蛋白較少?！? )?！? ),說明色譜柱制作成功?！? )?！? )【合作探究】主題1 蛋白質(zhì)的分離原理及方法： 結(jié)合上圖，說出凝膠色譜法分離不同物質(zhì)的依據(jù)并填表比較蛋白質(zhì)的運(yùn)動(dòng)情況。(1)依據(jù)：___________________。(2)蛋白質(zhì)在凝膠中的運(yùn)動(dòng)情況：相對(duì)分子質(zhì)量區(qū)別相對(duì)分子質(zhì)量大相對(duì)分子質(zhì)量小運(yùn)動(dòng)方式垂直向____運(yùn)動(dòng)無規(guī)則的_____運(yùn)動(dòng)運(yùn)動(dòng)速度____
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