凝膠層析分離血紅蛋白與魚精蛋白(編輯修改稿)
2025-06-22 03:38 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 層析柱的溫度。 相關(guān)的概念（一）： 分配系數(shù)：當(dāng)一種溶質(zhì)分布在兩個(gè)互不相溶的溶劑中時(shí)，它在固定相和流動相兩相內(nèi)的濃度之比是個(gè)常數(shù)，稱為分配系數(shù) (Kd)。分配系數(shù)是層析中分離純化物質(zhì)的主要依據(jù) Kd=Cs/Cm 其中 Cs: 固定相中的濃度， Cm: 流動相中的濃度 分配層析技術(shù) 相關(guān)的概念（二）： ? 遷移率：在一定條件下，在相同的時(shí)間內(nèi)某一組分在固定相移動的距離與流動相本身移動的距離之比值。常用 Rf來表示。 ? 物質(zhì)在一定溶劑中的分配系數(shù)是一定的， Rf值也是恒定的，因此可以根據(jù) Rf值來鑒定被分離的物質(zhì)。 Rf = 色斑中心至原點(diǎn)中心的距離 溶劑前緣至原點(diǎn)中心的距離 親和層析法 ? 親和層析（ Affinity Chromatography）是利用生物分子間專一性親和力而進(jìn)行分離的一種層析技術(shù)。 ? 如我們熟悉的：抗原和抗體；酶和底物或輔酶或抑制劑；激素和受體； RNA和其互補(bǔ)的 DNA等。親和層析的分離原理簡單的說就是通過將具有親和力的兩個(gè)分子中一個(gè)固定在不溶性基質(zhì)上，利用分子間親和力的特異性和可逆性，對另一個(gè)分子進(jìn)行分離純化。 ? 親和層析可用于純化生物大分子、稀釋液的濃縮、不穩(wěn)定蛋白質(zhì)的貯藏、從純化的分子中出去殘余的污染物、用免疫吸附劑吸附純化對此尚無互補(bǔ)配體的生物大分子，分離核酸是親和層析應(yīng)用的重要方面。 ? 親和層析純化過程簡單、迅速，且分離效率高。對分離含量極少又不穩(wěn)定的活性物質(zhì)尤為有效。缺點(diǎn)是針對某一分離對象，制備專一的配基和尋求層析的穩(wěn)定條件限制了其使用。 親和層析示意圖 離子交換層析 ? 離子交換層析是依據(jù)各種離子或離子化合物與離子交換劑的結(jié)合力不同而進(jìn)行分離純化。 ? 離子交換層析的固定相是離子交換劑，它是由一類不溶于水的惰性高分子聚合物基質(zhì)通過一定的化學(xué)反應(yīng)共價(jià)結(jié)合上某種電荷基團(tuán)形成的。 ? 離子交換劑包括交換樹脂和交換纖維素兩種。 ? 離子交換劑可以分為三部分：高分子聚合物基質(zhì)、電荷基團(tuán)和平衡離子。電荷基團(tuán)與高分
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