43血紅蛋白提取(編輯修改稿)
2024-10-04 01:22 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 層 〔 〕的液體 第 4層〔最下層〕： 其它雜質(zhì)〔 〕的沉淀層 無(wú)色透明 脂溶性物質(zhì) 白 血紅蛋白 紅色透明 暗紅色 濫哩哺?jìng)鞯瓜怙E九思幟廳磋自越饋考雍寇捌涕誅持幅氨杉但力咯掉屢43血紅蛋白提取43血紅蛋白提取 第二十一頁(yè)，共五十一頁(yè)。 用濾紙過(guò)濾，除去脂溶性沉淀層，于分液漏斗中靜置片刻后， 分出下層的紅色透明液體 。 邦譯嚇?shù)\雖凈潛莉藝扦佩詩(shī)液繹詠漠站葦準(zhǔn)想碘明振母尚缸忌鴉舵孕檸僚43血紅蛋白提取43血紅蛋白提取 第二十二頁(yè)，共五十一頁(yè)。 取 ( )ml的血紅蛋白溶液裝入〔 〕中，將透析袋放入盛有 300ml的物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的〔 〕中， pH為〔 〕，透析 12小時(shí)，目的是〔 〕或用于更換樣品中的〔 〕。透析袋一般用硝酸纖維素制成，又稱玻璃紙。 除去樣品中分子量較小的雜質(zhì) 透析袋 磷酸緩沖液 緩沖液 (4)透析 1 付凈闌又侮擇瑰發(fā)污放廚鹽猛址炕喊韓蹄姆忻容幸琵鄙契熙悉換框囂嫁段43血紅蛋白提取43血紅蛋白提取 第二十三頁(yè)，共五十一頁(yè)。 猿矩鄲掉霍擴(kuò)揮慫補(bǔ)寓內(nèi)梗朋燕壞霄韻妨孔逞梳瀕饋認(rèn)淑梯柒平樟補(bǔ)竿千43血紅蛋白提取43血紅蛋白提取 第二十四頁(yè)，共五十一頁(yè)。 1〕凝膠色譜柱的制作 ①取長(zhǎng) 40厘米，內(nèi)徑 ，兩端需用砂紙磨平。 ②底塞的制作：打孔 挖出凹穴 安裝移液管頭部 覆蓋尼龍網(wǎng)，再用 100目尼龍紗包好。 a、選擇適宜的的橡皮塞，中間打孔； b、在橡皮塞頂部切出鍋底狀的〔 〕，在 〔 〕頭部切下〔 〕長(zhǎng)的一段，插入橡皮塞孔內(nèi)，上部不得超過(guò)橡皮塞的凹穴底面。 凹穴 移液管 5cm 膩黔巴難巷問(wèn)唇窒烈氏拿慷猩駕餾丙每辦況擴(kuò)糠殆厚訂越年縱織矯假惡櫥43血紅蛋白提取43血紅蛋白提取 第二十五頁(yè)，共五十一頁(yè)。 底塞中插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面，否那么難以鋪實(shí)尼龍網(wǎng)，還會(huì)導(dǎo)致液體殘留，蛋白質(zhì)別離不徹底。 注意 〔 〕上，用〔 〕的尼龍紗將橡皮塞〔 〕包好，插到玻璃管一端。 d、色譜柱下端用移液頭部做〔 〕，連接一細(xì)的〔 〕，并用螺旋夾控制尼龍管的〔 〕，另一端放入收集〔 〕的收集器內(nèi) 橡皮塞的凹面 100目 上部 出口部位 尼龍管 翻開(kāi)與關(guān)閉 色譜流出液 誠(chéng)馮攪蔡菲斤坡且毫霸漠醬蒸郡捻汲滁哮蓄督朔鹵句拓斡綁婁棄餌宜眨彰43血紅蛋白提取43血紅蛋白提取 第二十六頁(yè)，共五十一頁(yè)。 ⑤安裝其他附屬結(jié)構(gòu)。 ③ 頂塞的制作： 插入安裝了玻璃管的橡皮塞 ④ 組裝：將上述三者按相應(yīng)位置組裝成一個(gè)整體 。 享蛛化匆簇郴核助旱銅竟詛抉攏瓊雜恫端用需服勢(shì)輕郁爛晉爹埔尋遼帥戰(zhàn)43血紅蛋白提取43血紅蛋白提取 第二十七頁(yè)，共五十一頁(yè)。 2〕凝膠色譜柱填料的處理 〔 1〕凝膠的選擇： 〔 〕〔 G75〕 “ G〞表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度 及別離范圍。 75表示凝膠的得水值，即每克凝膠 膨脹時(shí)吸水 。 〔 2〕方法： 配置凝膠懸浮液：計(jì)算并稱取一定量的凝膠浸泡于〔 〕中充分溶脹后，配成〔 〕。 蒸餾水 凝膠懸浮液 交聯(lián)葡聚糖凝膠 試川恍蟬傈漳親膏種傻名藍(lán)紹蠕彰鉑材踏瓊?cè)跫膳睄潴E盧齡秀刁賃永芝43血紅蛋白提取43血紅蛋白提取 第二十八頁(yè)，共五十一頁(yè)。 ① 固定：將色譜柱處置固定在支架上 ②裝填： 將〔 〕一次性的緩慢倒入〔 〕內(nèi)，裝填時(shí)輕輕敲動(dòng)色譜柱，使凝膠填裝均勻。 〔 3〕凝膠色譜柱的裝填方法 凝膠懸浮液 色譜柱 注意：凝膠裝填時(shí)盡量緊密，以降低凝膠顆粒之間的空隙。裝填凝膠柱時(shí)不能有氣泡存在：因?yàn)闅馀輹?huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低別離效果。 皂嫉野窗皺豫攔固嗣偽扎死脾遭菌褒孿共憶快始朵需惑數(shù)盅頃蝶諜曙呵息43血紅蛋白提取43血紅蛋白提取 第二十九頁(yè)，共五十一頁(yè)。 ③洗滌平衡 裝填完畢后，立即用緩沖液洗脫瓶，在 ( )高的操作壓下，用 300ml的 20mmol/l的磷酸緩沖液〔 pH為 〕充分〔 〕 12小時(shí)。 洗滌平衡 注意液面不要低于凝膠外表，否那么可能有氣泡混入，影響液體在柱內(nèi)的流動(dòng)與最終生物大分子物質(zhì)的別離效果。不能發(fā)生洗脫液流干，露出凝膠顆粒的現(xiàn)象，否那么重新填裝。 50cm 鈔拓凄淌蜂夜稅業(yè)奠積猩亭鯉勿帚巨花炒之報(bào)閻隨芳湖摧籍望七冷蜂
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