高二生物血紅蛋白的提取和分離(編輯修改稿)
2024-12-16 06:09 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 液中蛋白質(zhì)的洗脫次序 ， 降低分離效果 。 4．蛋白質(zhì)的分離：如果紅色區(qū)帶 __________地移動，說明色譜柱制作成功。 沸水浴 均勻一致 核心要點(diǎn)突破 解讀實(shí)驗(yàn)原理 1． 蛋白質(zhì)分子在凝膠中的運(yùn)動情況分析 相對分子質(zhì)量大 相對分子質(zhì)量小 直徑大小 大于凝膠顆?？障吨?徑 小于凝膠顆?？障吨?徑 運(yùn)動方式 垂直向下運(yùn)動 無規(guī)則的擴(kuò)散運(yùn)動 運(yùn)動速度 較快 較慢 運(yùn)動路程 較短 較長 洗脫次序 先從凝膠柱中洗脫出 來 后從凝柱中洗脫出來 瓊脂糖凝膠電泳 聚丙烯酰胺凝膠電泳 由于瓊脂糖本身不帶電荷，各種分子在電場中遷移速率決定于所帶電荷性質(zhì)的差異及分子的大小、形狀不同 在凝膠中加入 SDS，使蛋白質(zhì)解聚成單鏈，與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì) — SDS復(fù)合物，使其遷移速率完全取決于分子的大小 (2020年聊城高二檢測 )有關(guān)凝膠色譜法和電泳法的說法正確的是 ( ) A． 它們都是分離蛋白質(zhì)的重要方法 B． 它們的原理相同 C． 使用凝膠色譜法需要使用緩沖溶液而電泳不需要 D． 以上說法都正確 【嘗試解答】 __A__ 例 1 【 解析 】 凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的一種有效方法；電泳法是利用待測樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異和分子本身的大小 、 形狀不同 ， 使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度 ， 從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離 。 這兩種方法都用到緩沖溶液 ， 以調(diào)節(jié)溶液的酸堿度 。 【 誤區(qū)警示 】 不同的蛋白質(zhì)在凝膠色譜中有三種運(yùn)動情況： (1)分子很小 ， 可進(jìn)入凝膠全部內(nèi)孔隙； (2)分子很大 ， 完全不能進(jìn)入凝膠的任何內(nèi)孔隙； (3)分子大小適中，能進(jìn)入凝膠內(nèi)孔隙中孔徑大小相應(yīng)部分。 跟蹤訓(xùn)練 下列各項(xiàng)中 ， 一般不影響凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的分離度的是 ( ) A． 層析柱的高度 B． 層析柱的直徑 C． 緩沖溶液 D． 樣品的分布 解析： 選 B。分離度取決于柱高，為分離不同組分，凝膠柱必須有適宜的高度，分離度與柱高的平方根相關(guān)。樣品的分布也影響分離度，緩沖溶液的 pH影響蛋白質(zhì)所帶的電荷，因此也影響分離度。只有層析柱的直徑一般不會影響分離度。 血紅蛋白的提取和分離 蛋白質(zhì)的提取和分離一般分四步：樣品處理→ 粗分離 → 純化 → 純度鑒定 。 1．樣品處理 血液????????? 液體成分? 血漿約 5 5 % ?????? 水分固體物質(zhì)????? 血漿蛋 白無機(jī)鹽磷脂葡萄糖等有形成分? 約 45% ?????? 白細(xì)胞血小板
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