滬科版生物第二冊(cè)第三節(jié)基因工程與轉(zhuǎn)基因生物之二(編輯修改稿)
2024-12-23 19:21 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 限制酶切割質(zhì)粒 ，使其出現(xiàn)一個(gè)切口 ，露出 黏性末端 。 2）用 同一種 限制酶 切斷目的基因 ，使其產(chǎn)生 相同 的 黏性末端 。 3）將切下的目的基因片段 插入質(zhì)粒 的切口處，再加入適量 DNA連接酶 ，形成了一個(gè) 重組 DNA分子 （重組質(zhì)粒） 目的基因與運(yùn)載體的結(jié)合過(guò)程，實(shí)際上是不同來(lái)源的 基因重組的過(guò)程 。 用與提取目的基因相同的限制酶切割質(zhì)粒使之出現(xiàn)一個(gè)切口，將目的基因插入切口處，讓目的基因的黏性末端與切口上的黏性末端互補(bǔ)配對(duì)后，在連接酶的作用下連接形成重組 DNA分子。 目的基因與運(yùn)載體結(jié)合 ? 常用的受體細(xì)胞： 有大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞等。 ? 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的原理 借鑒 細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞 的途徑。 ? 步驟三：目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 導(dǎo)入 擴(kuò)增 常用的受體細(xì)胞：菌類和動(dòng)植物細(xì)胞 可以分泌人胰島素 的細(xì)菌 導(dǎo)入過(guò)程：運(yùn)載體為質(zhì)粒，受體細(xì)胞為細(xì)菌 受體細(xì)胞：細(xì)菌 細(xì)胞壁的通透性增大 重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞 目的基因隨受體細(xì)胞的繁殖而復(fù)制 氯化鈣 大量的目的基因 ? 步驟四：目的基因的檢測(cè)和表達(dá) 四環(huán)素 抗性基因 青霉素抗性基因 檢測(cè)：通過(guò)檢測(cè) 標(biāo)記基因 的有無(wú)，來(lái)判斷 目的基因是否導(dǎo)入 檢測(cè)方法：將受體細(xì)胞放在含有青霉素或四環(huán)素的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，若存活，則導(dǎo)入成功；若死亡，則重組質(zhì)粒沒(méi)有導(dǎo)入受體細(xì)胞． 不能，受體細(xì)胞 必須表現(xiàn)出特定的性狀 ，才能說(shuō)明目的基因完成了 表達(dá) 。 ? 受體細(xì)胞攝入 DNA分子后就說(shuō)明目的基因完成了表達(dá)嗎？ 表達(dá) ：通過(guò)特定性狀的產(chǎn)生與否來(lái)確定目的基因是否表達(dá) 若不能表達(dá)，要對(duì)抗蟲(chóng)基因再進(jìn)行 修飾 。 怎樣檢驗(yàn)抗蟲(chóng)基因在棉細(xì)胞內(nèi)是否表達(dá)呢？ 沒(méi)有抗蟲(chóng)基因 的棉植株 有抗蟲(chóng)基因的棉植株 棉鈴蟲(chóng) 蟲(chóng)沒(méi)有死 蟲(chóng)被殺死 沒(méi)有表達(dá) 目的基因表達(dá) 1） 以下說(shuō)法正確的是 （ ） A、 所有的限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列 B、 質(zhì)粒是基因工程中唯一的運(yùn)載體 C、 運(yùn)載體必須具備的條件之一是：具有多個(gè)限制酶切點(diǎn) ， 以便與外源基因連接 D、 基因控制的性狀都能在后代表現(xiàn)出來(lái) C 練習(xí) 2） 不屬于質(zhì)粒被選為基因運(yùn)載體的理由是 A、 能復(fù)制
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