獸醫(yī)現(xiàn)代監(jiān)測(cè)診斷技術(shù)(終稿)(編輯修改稿)
2025-03-10 16:33 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 抗體、放射性標(biāo)記抗體等 特點(diǎn)： 敏感、快速（ ELISA 只需要 1~2小時(shí)）。 ? 補(bǔ)體參與的反應(yīng) (補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、免疫粘附血凝試驗(yàn)等 )。 ? 中和試驗(yàn) (病毒中和試驗(yàn)和毒素中和試驗(yàn) ) 特點(diǎn)： 時(shí)間長(zhǎng)，約需要 18小時(shí)才能獲得結(jié)果。 ? 免疫轉(zhuǎn)印技術(shù) 。 正向間接血凝診斷技術(shù) ? 特點(diǎn)： 正向間接血凝為一種微量的定量反應(yīng)試驗(yàn)，其應(yīng)用廣泛，其無(wú)需昂貴的設(shè)備，操作簡(jiǎn)單，并且有快速、敏感、特異性。 ? 操作要點(diǎn)及注意事項(xiàng)： A. 試驗(yàn)準(zhǔn)備： 采集 3只以上未免疫雞全血混合制紅細(xì)胞懸液； 選用孔底應(yīng)光潔透明無(wú)可見(jiàn)沉淀附著物的反應(yīng)板 (一次性的最好 )； 待檢血清要新鮮，未腐敗、溶血，無(wú)懸浮物。 B. 操作過(guò)程： 盡可能的保證樣品被全部加入反應(yīng)孔；每次滴加抗原前應(yīng)充分搖勻，從稀釋度高的孔開(kāi)始加起，并避免滴頭和孔內(nèi)的液體直接接觸；避免稀釋時(shí)孔內(nèi)產(chǎn)生氣泡，直接影響結(jié)果判定。 C. 結(jié)果判定： 正確識(shí)別“ ++”的凝集現(xiàn)象。 待檢樣品 2 待檢樣品 1 陽(yáng)性對(duì)照 陰性對(duì)照 正向間接血凝反應(yīng)原理圖 間接血凝抑制反應(yīng)原理示意圖 紅細(xì)胞 間接血凝反應(yīng)原理示意圖 抗體 致敏紅細(xì)胞 聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ ELISA） ? 具有 靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速、簡(jiǎn)便、重復(fù)性好、安全、適合大批量標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè) 的特點(diǎn)。 ? 是當(dāng)前應(yīng)用最廣、發(fā)展最快的一項(xiàng)新技術(shù)，目前該方法已被廣泛用于多種細(xì)菌和病毒等疾病的診斷。 ? 其基本過(guò)程是將抗原 (或抗體 )吸附于固相載體，在載體上進(jìn)行免疫酶反應(yīng)，底物顯色后用分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀判定結(jié)果。 其可分為以下幾種方法： 原理及 分類 常用的直接法 ELISA（測(cè)抗體） 分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù) ? 用于動(dòng)物疫病特異性快速診斷和病原基因變異與進(jìn)化分析，及時(shí)準(zhǔn)確掌握動(dòng)物疫病分子流行病學(xué)動(dòng)態(tài)，為疫病防治提供基因理論分析依據(jù)。 ? 核酸探針技術(shù)、基因序列分析 比如基因芯片試劑盒。 ? 聚合酶鏈反應(yīng)（ PCR）（ 應(yīng)用最廣） 1. 疫病的早期診斷和不完整病原的檢測(cè) 2. 快速、準(zhǔn)確、安全的檢測(cè)病原體 3. 在病原體分類和鑒別中的應(yīng)用 PCR儀 基因芯片儀 ?聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（ PCR) 是以 DNA變性、復(fù)制的某些特性為原理設(shè)計(jì)的。通過(guò)PCR技術(shù)獲取病原微生物的特異 DNA片段，從而為疾病診斷提供重要依據(jù)。 特點(diǎn)：快速； 敏感； 步驟較多。 PCR反應(yīng)原理圖 反轉(zhuǎn)錄 PCR技術(shù) ? 即 RTPCR技術(shù)。用于檢測(cè) RNA病毒。 首先提取總 RNA，然后加入引物在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成 cDNA，加熱變性成為單鏈 cDNA后，加入與之互補(bǔ)的另一引物，進(jìn)行 PCR反應(yīng)。 ? 分為一步法和兩步法兩種 RT RTPCR反應(yīng)原理圖 多重 PCR技術(shù) (MultiPCR） ? 它是一種特殊的 PCR形式，其最突出的特點(diǎn)是一次 PCR反應(yīng)．在同一反應(yīng)體系中同時(shí)加入多對(duì)不同 PCR引物和相應(yīng)的模板，可同時(shí)檢測(cè)、鑒別出多種病原體， 在臨床混合感染的鑒別診斷上具有其獨(dú)特優(yōu)勢(shì)和很高的實(shí)用價(jià)值 。 病原學(xué)檢測(cè)技術(shù) ? ? 是病毒性疫病檢測(cè)、診斷、流行病學(xué)調(diào)查和未知新病毒進(jìn)行分類鑒定的重要方法之一。如，此法稱為檢測(cè)口蹄疫的黃金標(biāo)準(zhǔn)。但是對(duì)實(shí)驗(yàn)室能力要求較高，且耗時(shí)長(zhǎng)。 寄生蟲(chóng)病診
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