生化藥品生產(chǎn)技術(shù)1(編輯修改稿)
2025-03-07 23:57 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 防止某些生理活性物質(zhì)的活性基團及酶的活性中心受到破壞。 巰基 ，極易被氧化，故提取時，常添加某些還原劑如半胱氨酸， ?－巰基乙醇。 對易受重金屬影響的，可添加 EDTA等螯合劑。 3/9/2023 42 （ 3） 抑制水解酶的作用：抑制劑、熱等。 （ 4）其它保護措施：冷、熱、酸、堿 3/9/2023 43 １、溫度 提取溫度 ↑溶解度 ↑ 。 溫度 ↑ 物料的粘度 ↓，有利于分 子擴散和機械攪拌。 對不耐熱的生物活性物質(zhì)的提取，一般在 0~10℃ 進行提取。 （三）影響提取的因素 3/9/2023 44 ２、酸堿度 多數(shù)生化物質(zhì)在中性條件下較穩(wěn)定， pH值一般應控制在 4～ 9范圍內(nèi)， 避免目的物的等電點 。 抑制有害酶類的水解破壞作用，防止降解，提高收率。 3/9/2023 45 鹽溶作用：鹽離子作用于生物大分子表面，增加了表面電荷，使之極性增加，水合作用增強，促使其形成穩(wěn)定的雙電層，此現(xiàn)象為鹽溶作用。 鹽析作用：指溶液中加入無機鹽類而使某種物質(zhì)溶解度降低而析出的過程 ３、鹽濃度 3/9/2023 46 （四）提取方法 １、 用酸、堿、鹽水溶液提取 3/9/2023 47 ２、表面活性劑提取 表面活性劑分子兼有親水與疏水基團，分布于油水界面時，有分散、乳化和增溶作用。表面活性劑分陰離子型、陽離子型與非離子型。離子型表面活性劑作用強，但是易引起蛋白質(zhì)等生物大分子的變性，非離子表面活性劑變性作用小，適合于用水、鹽系統(tǒng)無法提取的蛋白質(zhì)或酶的提取。 3/9/2023 48 溶劑提取法 相似相溶定律 ⑴ 固－液提取 ３、有機溶劑提取 3/9/2023 49 常用溶劑（按親水性增加排列如下）： ? 環(huán)己烷 ～石油醚 →苯 →乙醚 →氯仿 →乙酸乙酯 →正丁醇 →丙酮 →乙醇 →甲醇 →水。 ● 極性最大的有機溶劑：甲醇 ● 極性最小的有機溶劑：環(huán)己烷 ● 溶解范圍最廣的有機溶劑：乙醇 3/9/2023 50 選擇的溶劑 被提取成分 石油醚 脫脂（脂類、色素、萜類等） 苯、乙醚、氯仿、乙酸乙酯 甾類、萜和揮發(fā)油、生物堿、各種苷元 正丁醇 苷 乙醇、甲醇 蛋白、多糖以外的各類成分 水 苷、生物堿鹽、鞣質(zhì)、氨基酸、蛋白、糖 溶劑選擇與被提取成分對照表 3/9/2023 51 溶劑選擇的原則 ①目標成分易溶，雜質(zhì)成分難溶； ②惰性，不與目標成分反應，即使發(fā)生反應也應該屬于可逆性的； ③經(jīng)濟、安全、后續(xù)操作容易進行。 溶解度 化學性質(zhì)穩(wěn)定 安全、價廉 3/9/2023 52 ⑵液－液萃取 液－液萃取是利用溶質(zhì)在兩個互不混溶的溶劑中溶解度的差異，將溶質(zhì)從一個溶劑相向另一個溶劑相轉(zhuǎn)移的操作。 3/9/2023 53 殘留量計算公式 Xn=X0 ｋ ｍ ｎ ｋｍ＋ｖ Ｘ ０ ： 目的物總量（ｇ） Ｋ ：分配系數(shù)，ｋ大， Xn大 Ｖ ：溶劑體積（ｍｌ），ｖ大， Xn小， ｖ＝２－５倍 ｍ ：生物材料重量（ｇ） ｎ ：提取次數(shù)，ｎ大， Xn小，ｎ＝２－３次 3/9/2023 54 （一）鹽析濃縮：硫酸銨沉淀蛋白質(zhì) （二）有機溶劑沉淀濃縮 在生物大分子的水溶液中，逐漸加入乙醇，丙酮等有機溶劑，可以使生化物質(zhì)的溶解度明顯降低，從溶液中沉淀出來 。 四、 生物活性物質(zhì)的濃縮與干燥 3/9/2023 55 （三）用葡聚糖凝膠（ Sephadex）濃縮 （四）用聚乙二醇透析濃縮 （五）超濾濃縮 （六）真空減壓濃縮與薄膜濃縮 真空減壓濃縮在藥物生產(chǎn)中使用較為普遍，具有生產(chǎn)規(guī)模較大，蒸發(fā)溫度較低，蒸發(fā)速度較快等優(yōu)點。 薄膜濃縮器的加速蒸發(fā)的原理是增加汽化表面積。 3/9/2023 56 3/9/2023 57 （七）干燥的目的： 提高藥物或藥劑的穩(wěn)定性，以利于保存和運輸； 達到規(guī)格標準； 便于進一步處理。 （八）干燥方法：減壓干燥、 噴霧干燥、 冷凍干燥等。 3/9/2023 58 3/9/2023 59 冷凍干燥機 3/9/2023 60 １、生物制藥中分離制備方法的特點 （ 1）生物材料組成非常復雜。一種生物材料常含成千上萬成分，各種化合物的形狀、大小、分子量和理化性質(zhì)都各不相同。 沒有固定操作方法 。 五、 生化物質(zhì)的分離純化方法 3/9/2023 61 （ 2）有些化合物在生物材料中含量極微，只達萬分之一，甚至百萬分之一。因此， 分離操作步驟多，不易獲得高收率。 3/9/2023 62 （ 3）生物活性物質(zhì)離開生物體后，易變性，破壞，分離進程必須十分小心的保護這些化合物的 生理活性 。 3/9/2023 63 （ 4）生物制藥的分離方法幾乎都在溶液中進行，各種參數(shù)（溫度， pH，離子強度）對溶液中各種組分的綜合影響常常無法固定，以致許多實驗設計 理論性不強 。 3/9/2023 64 （ 5）為了保護目的物的生理活性及結(jié)構(gòu)上的完整性，生物制藥中的分離方法多采用溫和的 逐級分離 方法。親和層析分離具有分離的專一性，高效性。 3/9/2023 65 （ 6）生物產(chǎn)品最后 均一性 的證明與化學純度的概念不完全相同，因生物分子對環(huán)境反應十分敏感，結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系比較復雜。 3/9/2023 66 ２、 基本原理 （ 1）根據(jù)分子形狀和大小不同進行分離： 如 差速離心 與超離心、 膜分離 （透析，電滲析）與超濾， 凝膠過濾 法。 3/9/2023 67 （ 2）根據(jù)分子電離性質(zhì)的差異性進行分離。如 離子交換 法，電泳法，等電聚焦法。
教學課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1