金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)講義(編輯修改稿)
2025-03-02 01:41 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 ? 增菌培養(yǎng)：吸取 5mL上述樣品勻液，接種于 50mL %氯化鈉肉湯或 10%胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基內(nèi)，36℃ 177。 1℃ 培養(yǎng) 18h～ 24h。金黃色葡萄球菌在 %氯化鈉肉湯中呈混濁生長(zhǎng)，污染嚴(yán)重時(shí)在 10%胰酪胨大豆肉湯內(nèi)呈混濁生長(zhǎng)。 ? 將上述培養(yǎng)物，分別劃線接種到 BairdParker平板和血平板，血平板 36℃ 177。 1℃ 培養(yǎng) 18h～ 24h。 BairdParker平板 36℃ 177。 1℃ 培養(yǎng) 18h～ 24h或 45h～ 48h。 分離培養(yǎng)基 ? BairdParker瓊脂：培養(yǎng)基中含有 卵黃亞碲酸鉀 ，能抑制大多數(shù)細(xì)菌的繁殖，并能促進(jìn)金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)使其產(chǎn)生黑色和暈圈。培養(yǎng)基中的丙酮酸鈉和甘氨酸也能促進(jìn)金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)。 ? 金黃色葡萄球菌的菌落形態(tài)：圓形、光滑凸起、濕潤(rùn)，直徑約 2~3mm，顏色呈灰色到黑色，邊緣為淡色，周圍為一混濁帶，在其外層有一透明圈。用接種針接觸菌落似有奶油樹膠的硬度，偶而可見無混濁帶和透明圈的非典型菌落。 ? 長(zhǎng)期保存的冷凍或干燥食品中所分離的菌落比典型菌落所產(chǎn)生的黑色較淡些，外觀可能粗糙并干燥。 分離培養(yǎng)基 ?血瓊脂：是一種基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含有 5%的脫纖維血 (羊血或兔血 )。用于觀察金黃色葡萄球菌的溶血現(xiàn)象。金黃色葡萄球菌在血瓊脂平板上呈 β 溶血。 ?金黃色葡萄球菌的菌落形態(tài)：呈金黃色，有時(shí)也呈白色，大而突起，圓形、不透明、表面光滑，周圍有透明的 β 溶血環(huán)。 革蘭氏染色 血漿凝固酶試驗(yàn) ? 試驗(yàn)原理：致病性的金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的血漿凝固酶，使血漿中纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w蛋白，附著于細(xì)菌表面 ，產(chǎn)生凝固。 ? 金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生兩種凝固酶：一種是與細(xì)胞壁結(jié)合的凝固酶，為結(jié)合凝固酶；另一種是菌細(xì)胞釋放于培養(yǎng)基中，為游離凝固酶。二者的抗原性不同。 血漿凝固酶試驗(yàn) ? 挑取 Baird－ Parker平板或血平板上可疑菌落 1個(gè)或以上，分別接種到 5mL BHI和營(yíng)養(yǎng)瓊脂小斜面，36℃ 177。 1℃ 培養(yǎng) 18 h～ 24 h。 ? 取新鮮配置兔血漿 ，放入小試管中，再加入可疑菌落的 BHI培養(yǎng)物 ～ ，振蕩搖勻，置36℃ 17
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