3、1菊花的組織培養(yǎng)(給力的課件)(編輯修改稿)
2025-02-07 23:27 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 裂素 ＝ 有利于根的分化 有利于芽的分化，抑制根的分化 促進愈傷組織生長 ?激素的使用順序、使用量及比例影響植物細胞的發(fā)育方向： 思考：以下培養(yǎng)基出現(xiàn)的現(xiàn)象反應了什么問題？ 生長素 / 細胞分裂素 高 利于根的形成 適中 利于愈傷組織的形成 供參考的配方 ?誘導菊花愈傷組織： ?在 MS培養(yǎng)基中加入 BA和 NAA，質(zhì)量濃度均為 ／Ｌ ?２、誘導菊花從芽 ： ?在 MS培養(yǎng)基中加入 BA和 NAA，質(zhì)量濃度分別為 23mg／Ｌ和 — ／Ｌ ?誘導菊花生根： ?在 MS培養(yǎng)基各成分用量減半，并添加入 NAA或 IAA，質(zhì)量濃度均為 ／Ｌ 4．溫度、光照、 pH的影響 光照： 菊花每日用日光燈照射 12h。 溫度： 大多數(shù)植物組織培養(yǎng)控制在 23～ 27℃ , 低于 15℃ 時植物組織會表現(xiàn)生長停止 , 高于 35℃ 時對植物生長不利。 菊花的組織培養(yǎng)控制在 18～ 22℃ 。 pH： 不同植物對培養(yǎng)基最適 pH的要求不 同，大多數(shù)控制在 5～ 。 菊花的組織培養(yǎng)控制在 。 制備 MS固體培養(yǎng)基 外植體消毒 接種 培 養(yǎng) 栽 培 四、實驗操作 移 栽 沖洗 — 酒精 — 無菌水沖洗 —氯化汞 — 無菌水沖洗至少三次之上 配制各種母液 配制培養(yǎng)基 滅菌 （一）制備 MS固體培養(yǎng)基 MS培養(yǎng)基包括 20多種營養(yǎng)成分，實驗室一般使用 4℃保存配制好的 培養(yǎng)基 母液 來制備 配制各種母液 ①無機物中大量元素濃縮 10倍，微量元素濃縮 100倍，常溫保存 ②激素類、維生素類以及用量較小的有機物一般可按 1mg/ml的質(zhì)量濃度 單獨 配制成母液 ③用母液配制培養(yǎng)基時，需要根據(jù)各種母液的濃縮倍數(shù)，計算用量 配制培養(yǎng)基 分裝到錐形瓶中，每瓶分裝 50ml或 100ml ① 配制培養(yǎng)液 ② 調(diào) PH ③ 培養(yǎng)基的分裝 由于菊花的莖段的組織培養(yǎng)比較容易，因此不必添加植物激素 滅菌 分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進行高壓蒸汽滅菌 選材： 菊花莖段，取生長旺盛的嫩枝 （二）外植體消毒 消毒 ①流水沖洗 菊花莖段用流水沖洗后可少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷洗后在 流水 下沖洗 20min左右 ② 酒精處理 用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入 體積分數(shù)為 70％的酒精 中搖動 2－ 3次，持續(xù) 6－ 7s，立即將外植體取出，在 無菌水 中清洗 ③消毒液處理 取出后用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入 質(zhì)量分數(shù)為 ％的氯化汞溶液 中 1－ 2min，取出后在 無菌水 中至少清洗 3次，漂凈消毒液 （三）接種 污染的主要來源是空氣中的 細菌和孢子 ，接種室消毒是至關重要的。用 70％的酒精 噴霧使空氣消毒， 酒精或新潔爾滅搽洗工作臺并用紫外線照射 20分鐘 。 接種室消毒 無菌操作要求 操作要在 酒精燈火焰旁 完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼燒滅菌，接種后立即蓋好瓶蓋。 材料的切取和接種 將消過毒的菊花莖段在 無菌培養(yǎng)皿 中切成～ 1cm的小段，用 鑷子 夾取菊花莖段接種。 接種注意事項 ①每接種一塊外植體前，鑷子需放入體積分數(shù)為 70％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種
法律信息相關推薦
鄂ICP備17016276號-1