【文章內(nèi)容簡介】 個 A,即第 10號鼠調(diào)入 B組 ,調(diào)整后各組鼠的編號如下 : 組別 : 鼠的編號 ? A組 : 1 5 9 11 ? B組 : 2 7 8 10 ? C組 : 3 4 6 12 ? 對于將動物隨機分為四組或更多組，原理基本一致 。 例 :設有 A、 B、 C、 D、 E、 F代表的 6只家兔 ,試用完全隨機法將其每只分為一組。 分組方法 :從隨機數(shù)字表上用鉛筆任指一點 ,若為第 11行第 8列的 32,則從 32向左抄用 6個數(shù)字 ,然后分別以 1除之。凡除不盡的 ,即將余數(shù)寫下；除盡的 ,寫余數(shù)時即將其除數(shù)寫下。如下 : 隨機數(shù) 32 59 55 48 51 81 除 數(shù) : 6 5 4 3 2 1 余 數(shù) : 2 4 3 3 1 1 隨機排列 : B E D F A C 上列第一個隨機數(shù)字余數(shù)為 2,意即將六個字母中列在第二位的字母 B寫在該數(shù)下 ,第二個數(shù)字的余數(shù)為 4,即在剩下的五個字母列在第四位的 E寫在該數(shù)字下面 ,余此類推。六個字母相應號代表的兔隨機排列結(jié)果見上表最后一行。 第三節(jié) 影響動物實驗效果的 動物個體因素與遺傳因素 ? 藥物毒性研究表明，如以人體反應為衡量標準比較動物實驗結(jié)果與臨床試驗結(jié)果，可出現(xiàn) 真陽性、真陰性、假陽性、假陰性 四種情況。前兩者表示動物實驗結(jié)果與人體試驗結(jié)果基本一致，即動物毒性試驗有實用價值。但這種相似屬定性的，在定量上則肯定存在差異。后兩者顯示藥物反應的種屬差異，即實驗動物出現(xiàn)的毒性反應在人體不出現(xiàn)（假陽性），或?qū)嶒瀯游镂闯霈F(xiàn)的毒性反應卻在人體出現(xiàn)（假陰性）。其中假陰性的危害最大，要特別注意。如沙利度胺（反應停）在大鼠不引起畸胎，對人則有較強的致畸胎作用，其動物毒性試驗為假陰性。 ? 實驗動物種屬、品系及個體差異對動物實驗結(jié)果的重復性和均一性有重要影響。 一、種屬 ? 實驗動物種屬是影響動物實驗結(jié)果的重要因素。比較毒理學研究表明，不同種屬的實驗動物在代謝轉(zhuǎn)化、 DNA損傷的誘導與修復等方面存在差異，這種差異與其進化程度相一致。由于不同種屬的實驗動物間解剖、生理、遺傳和代謝過程均有差別，故對藥物的毒性反應可有量或質(zhì)的不同。 易感性：不同種屬 LA對同一實驗因素的易感性不同。如在研究醋酸棉酚對雄性動物生殖功能的影響時，發(fā)現(xiàn)小鼠很不敏感，大鼠和地鼠則很敏感。 2．藥物代謝動力學 在不同種屬動物身上做的實驗結(jié)果有較大差異，主要由于其藥物代謝動力學不同，藥效就不同。吸收過程差異：如大鼠吸收碘較家兔和豚鼠快，藥效也有差別。排泄過程差異：如大鼠體內(nèi)的巴比妥在 3天內(nèi)可排出 90%以上，而雞在 7天內(nèi)僅排出 33%，因而巴比妥對雞的毒性比對大鼠要大得多。 不同種屬動物對藥物的反應也有差異。如嚙齒類實驗動物和家兔對催吐藥不產(chǎn)生嘔吐反應，在犬、貓和人則易產(chǎn)生嘔吐。苯胺及其衍生物對犬、貓和豚鼠能引起與人相似的病理變化，產(chǎn)生變性血紅蛋白；對家兔則不易產(chǎn)生變性血紅蛋白，而小鼠則完全不產(chǎn)生。 4．生理學差異 不同種屬動物的基礎代謝率相差很大，以單位體重的基礎代謝率而言，小動物比大動物要高。因此，一般地說，動物越小，其所需的單位體重的藥物劑量就越大。 5．遺傳差異 有學者認為：動物實驗中的差異 25%歸于遺傳差異，75%則歸于環(huán)境影響。如 Gunn鼠先天缺乏膽紅素 — 葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶，易發(fā)生黃疸； D綿羊的紅細胞缺少葡萄糖 6磷酸脫氫酶（ G6PD），易發(fā)生溶血。 二、品種與品系 ?不同品系、品種之間存在基因多態(tài)性，具有不同等位基因或不同基因型。其對動物實驗所給予的外來刺激所表達的反應是不同的，使用不當也會影響動物實驗的結(jié)果。 ?近交系實驗動物由于其基因型、表現(xiàn)型相同，故對刺激的反應性一致，實驗結(jié)果的重復性、可比性極好；封閉群動物由于遺傳組成具有很高的雜合性，個體間反應性具有差異，故個體間重復性和一致性沒有近交系動物好。 ? 不同品系實驗動物遺傳上的差異，造成其形態(tài)與功能的差異，并導致對同一刺激產(chǎn)生不同的反應。 有人觀察不同品系雄性小鼠暴露于相同濃度氯仿中 ,DBA/2品系死亡率為 75%,DBA/1為 51%, C3H為 32%, BALB/c為 10%. 不同品系實驗動物對微生物感染的抵抗力也不同 .如小鼠對細菌感染的抵抗力就存在品系差異 . 同種動物不同器官也存在反應差異 . 。 三、年齡與體重 ? 實驗動物的解剖生理特征和機體反應性隨年齡而有明顯變化 ,往往幼年動物較成年敏感。敏感性從大到小順序為幼年＞老年＞成年。 ? 對毒物反應的年齡差異可能與解毒酶活性有關。就人類而言，胎兒因缺乏這些解毒酶，故對毒物很敏感；新生兒出生后 8周解毒酶才達到成人水平。實驗動物也一樣，大鼠葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)換酶約在出生后30天才達到成年大鼠水平。兔出生 4周后，肝臟解毒酶活性才與成年兔接近。 ? 實驗動物一生對藥物的毒性反應水平，是隨年齡變化的動態(tài)過程。 ? 如八甲磷在體內(nèi)須經(jīng)羥化才具有毒性，以 35mg/kg劑量給初生大鼠灌胃不引起死亡，但相同劑量給成年大鼠灌胃則全部死亡。老年實驗動物對毒物的耐受性提高，可能是排泄及生物轉(zhuǎn)化能力降低的緣故。 ? 實驗動物體重與年齡一般呈正比關系，因而同批實驗的動物年齡應盡可能一致，體重應大致相近，一般相差不超過 10%。 四、性別 ? 一般而言，雌性實驗動物對藥物的敏感性高于雄性，但隨受試物不同而異。 ? 一般認為，動物對激素的依存性，是其藥物毒性反應性別差異的主要原因。研究表明雄性激素能促進細胞色素 P450的活力，藥物在雄性實驗動物體內(nèi)易于代謝，因此雌性大鼠對藥物較雄性敏感。 因此，在藥品安全性評價研究中，通常選擇實驗動物應雌雄各半。若發(fā)現(xiàn)有明顯的性別差異時則應分別測定不同性別實驗動物的 LD50值。 五、生理及功能狀態(tài) ? 實驗動物在處于特殊的生理狀態(tài)如懷孕、哺乳時，其體重及某些生理生化指標將有所不同。因此，一般實驗研究不宜采用懷孕、哺乳的實驗動物。但為了闡明藥物對妊娠及產(chǎn)前胎兒的影響時，就必須選用這類實驗動物。妊娠和哺乳期大鼠和小鼠最適合進行這類實驗 。 ? 實驗動物由于所處的功能狀態(tài)不同，對藥物的反應也常常受到影響。如動物在體溫升高的情況下對解熱藥比較敏感，而體溫不高時則不敏感；血壓高時對降壓藥比較敏感，而在血壓低時對降壓藥敏感性就差，反而可能對升壓藥比較敏感。 六、健康狀況 ? 一般來說，有病動物對藥物的耐受性比健康動物要小，故有病動物比較容易中毒死亡?；疾』驙I養(yǎng)不良的家兔不易復制成動脈粥樣硬化模型，維生素 C缺乏的豚鼠對麻醉藥很敏感。 ? 動物潛在性感染對實驗結(jié)果的影響也很大，如觀察肝功能在實驗前后變化時，必須要排除實驗用的家兔是否患有球蟲病，不然家兔的肝臟上已有很多球蟲囊，肝功能必然發(fā)生變化，所測結(jié)果波動很大。 ? 因此，動物實驗一定要選用健康動物，最好選擇 SPF級實驗動物，不宜采用不健康或患病的實驗動物，否則就會影響實驗結(jié)果。為確保實驗動物健康，要做好實驗前檢疫。實驗前通常要觀察 714天，發(fā)現(xiàn)不健康動物應予以剔除。 第四節(jié) 影響動物實驗效果的生物因素 ? 生物因素涉及同種動物因素和異種生物因素等。同種動物因素包括社會地位、勢力范圍和飼養(yǎng)密度等，異種生物因素主要是指微生物與寄生蟲及人等因素。 一、 同種動物因素 ? 實驗動物存在為社會地位和勢力范圍的相互爭斗。動物的爭斗和社會地位可影響內(nèi)分泌系統(tǒng)的功能。 ? 實驗動物要有一定的活動面積和空間。密度大使動物活動受到限制，同時由于排泄物大量增加，使溫度、濕度、有害氣體的濃度增加，動物患傳染病的機會增大，內(nèi)分