臨床微生物質(zhì)量控制培訓(xùn)(編輯修改稿)
2025-01-31 17:33 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 本細(xì)菌培養(yǎng)u 應(yīng)在用藥前或停藥 5天后留取標(biāo)本 , 并使尿液在膀胱內(nèi)停留 6～ 8h以上。u 盡量避免或減少尿道口正常菌群干擾。 u 清潔中段尿、導(dǎo)尿?qū)Ч苣颉⒔?jīng)恥骨上皮膚穿刺采集膀胱內(nèi)尿液，送檢標(biāo)本以晨起第一次尿液為佳u 尿量不宜太多，試管塞子與尿液不應(yīng)直接接觸 u 留取導(dǎo)尿管尿要排空導(dǎo)尿管內(nèi)陳舊尿液，倘留置尿管超過(guò)三天應(yīng)避免采用。u 標(biāo)本采集后立即送檢，不能立即送檢者，可暫存 4℃ 冰箱，但保存不超過(guò) 8h糞便標(biāo)本的培養(yǎng)u 應(yīng)在發(fā)病早期并且盡量在用抗生素治療前采集，稀便不少于 1ml，固體便不少于 1克，無(wú)便患者可用直腸拭子采集標(biāo)本。u 要挑取含膿、黏液、血等病理改變或水樣糞便送檢。直腸拭子采樣量要足夠，拭子上肉眼應(yīng)可見糞便。 u 注意事項(xiàng)：⑴ 雖然糞便標(biāo)本本身含很多細(xì)菌但也要用無(wú)菌容器。⑵ 厭氧細(xì)菌（難辯梭菌）培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)盡量減少與空氣接觸。⑶ 注意挑取膿血便或粘液便做培養(yǎng)⑷ 要進(jìn)行分區(qū)劃線。如圖所示。分泌物的培養(yǎng)1. 對(duì)開放性病灶的采集：如眼結(jié)膜膿性分泌物、扁桃體、外耳道、手術(shù)后切口、導(dǎo)管治療感染、瘺管內(nèi)膿液、生殖道分泌物等均屬于開放性病灶。應(yīng)先用滅菌生理鹽水沖洗表面污染菌，去除舊的分泌物，用滅菌拭子采集病灶深部的分泌物，也可取感染部位下的組織送檢。2. 閉鎖性膿腫：如淋巴膿腫、肺膿腫、肝膿腫、腹腔膿腫、盆腔膿腫等，對(duì)封閉的膿腫常采用穿刺或引流的的方法采樣，應(yīng)在用藥前采集，應(yīng)注意膿液的氣味、性狀、顏色注意厭氧菌存在的可能。不能及時(shí)送檢應(yīng)應(yīng)用輸送培養(yǎng)基。膿液標(biāo)本 要盡量避免病灶表面細(xì)菌污染。開放性膿腫，采樣前無(wú)菌鹽水沖洗傷口，拭去表面污染膿液，挑取病灶深部膿液；封閉性膿液，嚴(yán)格病灶皮膚或黏膜表面的消毒后用無(wú)菌干燥注射器穿刺抽取，置無(wú)菌試管內(nèi)送檢，或切開排膿時(shí)用無(wú)菌拭子采集深部膿液。厭氧菌和傷口標(biāo)本167。 厭氧菌標(biāo)本? 隔絕空氣 氧對(duì)厭氧菌有毒性作用?液狀標(biāo)本應(yīng)用注射器抽取密封送檢?分泌物標(biāo)本最好床邊采集床邊接種；另置厭氧環(huán)境送檢（輸送培養(yǎng)基）167。 傷口標(biāo)本?在傷口切開排膿時(shí)留取標(biāo)本?不能在傷口消毒清洗后留取標(biāo)本?盡量采集傷口深部的膿汁送檢腦脊液標(biāo)本167。 直接涂片：革蘭染色、抗酸染色、印度墨汁染色167。 無(wú)菌采集技術(shù)：避免標(biāo)本污染及患者被感染167。 病毒培養(yǎng)標(biāo)本：置 4 ℃ 保存167。 分枝桿菌培養(yǎng)標(biāo)本： 2mL以上，置 4 ℃ 保存167。 細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本置 35 ℃ 保存216。 種類和環(huán)節(jié)多（細(xì)菌鑒定、藥敏、培養(yǎng)基、生化管、儀器、稀釋液）216。 涉及知識(shí)面廣216。 復(fù)雜性高216。 需要強(qiáng)烈的責(zé)任感四、微生物試驗(yàn)分析中質(zhì)量控制四、微生物試驗(yàn)分析中質(zhì)量控制常規(guī)試驗(yàn)的質(zhì)量控制 天天做（質(zhì)控菌株）167。 觸酶試驗(yàn)： 3％ H2O2每三天更換一次167。 血漿凝固酶試驗(yàn)：人血漿或商品乳膠試劑167。 氧化酶試驗(yàn)： 1％鹽酸四甲基對(duì)苯胺水溶液浸泡厚濾紙，室溫吹干壓成小紙片，置含干燥劑容器－ 20℃ 保存，或買商品制劑167。 β －內(nèi)酰胺酶：頭孢硝噻吩 (Nitrocefin)為底物，適于測(cè)試嗜血桿菌、淋球菌、卡他莫拉菌、腸球菌167。 革蘭染色：革蘭陽(yáng)性菌染成紫色；革蘭陰性菌染成紅色；另涂片厚度、染色和脫色時(shí)間、染料沉渣等也影響染色質(zhì)量培養(yǎng)基的質(zhì)量控制u 一般性狀： ① 外觀： 透明、清亮、無(wú)混濁、無(wú)沉淀，顏色符合要求，表面濕潤(rùn)但無(wú)水汽、平整、光潔無(wú)凹坑和氣泡。整塊平板厚薄均勻。 ② 厚度 ： 一般厚度在 3mm，但 MH平板厚度 ≥ 4mm。斜面的長(zhǎng)度 ≤ 試管長(zhǎng)度的 2/3。 ③ pH是細(xì)菌生長(zhǎng)的重要條件之一，合格培養(yǎng)基的 pH應(yīng)在規(guī)定值上下 。u 無(wú)菌試驗(yàn)： 新制備或新買的培養(yǎng)基在使用前要隨機(jī)抽取一定數(shù)量的樣品作無(wú)菌試驗(yàn)。 購(gòu)買的培養(yǎng)基要有質(zhì)量保證如合格證明等文件；若無(wú)質(zhì)量保證需檢測(cè)相應(yīng)的性能。培養(yǎng)基的質(zhì)量控制u 細(xì)菌生長(zhǎng)試驗(yàn)： 所有的培養(yǎng)基在使用前還必須做細(xì)菌生長(zhǎng)試驗(yàn)以測(cè)定培養(yǎng)基性能是否符合要求。標(biāo)準(zhǔn)菌株分 2種：一種是已知的可在某種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)并產(chǎn)生典型生物學(xué)性狀的，對(duì)培養(yǎng)基中的某種物質(zhì)產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng)的菌株；另一種是用已知的不能在某種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)或?qū)ε囵B(yǎng)基中的某種物質(zhì)產(chǎn)生陰性生化反應(yīng)的菌株。如血瓊脂平板：乙型溶血性鏈球菌生長(zhǎng)， β 溶血；甲型鏈球菌， a溶血；巧克力瓊脂平板：流感嗜血桿菌生長(zhǎng)良好；中國(guó)藍(lán)瓊脂平板和 SS瓊脂平板：革蘭陰性菌生長(zhǎng)，革蘭陽(yáng)性菌不生長(zhǎng)。試劑質(zhì)控 臨床微生物實(shí)驗(yàn)室常用的試劑包括染色液、診斷血清以及各種生化反應(yīng)試劑等。染色液及染色方法質(zhì)量控制： 購(gòu)買的或配置的染色液，每次需做好相關(guān)的記錄，如操作者和開瓶日期等；還要進(jìn)行染色步驟質(zhì)控，如革蘭染色在一張玻片上同時(shí)涂有金葡菌和大腸桿菌，以保證染色性判斷準(zhǔn)確無(wú)誤。常用生化試劑的質(zhì)控： 隨著細(xì)菌鑒定儀和快速微量生化鑒定板條的普及，臨床微生物檢驗(yàn)常用的生化試劑種類日趨減少，應(yīng)注意在用試劑在貯存時(shí)的避光、冷藏等要求，保證試劑的穩(wěn)定性。不要使用過(guò)期的試劑。診斷血清的質(zhì)控： 診斷血清是一種重要的細(xì)菌鑒定試劑，應(yīng)從有資質(zhì)的生產(chǎn)單位購(gòu)買。驗(yàn)收時(shí)必須看清生產(chǎn)批號(hào)、血清效價(jià)、透明度與色澤。試驗(yàn)中應(yīng)注意無(wú)菌操作，避免細(xì)菌污染。要經(jīng)常檢查貯存在 4℃ 冰箱中的各種血清，若發(fā)現(xiàn)混濁，出現(xiàn)絮狀，應(yīng)停止使用。為保證血清凝集反應(yīng)結(jié)果準(zhǔn)確，應(yīng)每 3個(gè)月對(duì)血清進(jìn)行一次質(zhì)控。不要使用過(guò)期的血清。 紙片藥敏試驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)控167。 基礎(chǔ)質(zhì)控：連續(xù)做 30天，如失控超過(guò) 3次還需繼續(xù)，如失控低于 3次可改為每周 1次167。 糾控：每周質(zhì)控中發(fā)生失控應(yīng)糾控，方法：連續(xù) 5天，每天 1次，每次重復(fù) 5個(gè)紙片，如找到明確失控原因，可立即改為每周 1次，否者繼續(xù)167。 4℃ 冰箱保存一周的用量167。 藥物敏感試驗(yàn)是臨床微生物檢驗(yàn)的重要步驟之一，其結(jié)果正確與否涉及治療效果的好壞。儀器的質(zhì)量控制167。 按儀器說(shuō)明規(guī)定用標(biāo)準(zhǔn)菌株定期對(duì)不同批號(hào)的試劑進(jìn)行質(zhì)控167。 對(duì)冰箱、二氧化碳孵箱、普通孵箱、水浴箱等基本設(shè)備的每日溫度、氣體濃度的監(jiān)控記錄；顯微鏡、細(xì)菌鑒定儀等儀器的使用、保養(yǎng)、維修記錄。以保障實(shí)驗(yàn)室各種設(shè)備、儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。 167。 對(duì)儀器進(jìn)行性能驗(yàn)證，若有兩臺(tái)以上的儀器則要進(jìn)行儀器比對(duì)細(xì)菌鑒定的基本步驟1. 標(biāo)本的分離培養(yǎng)（這關(guān)系到
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