第04講分析化學(xué)中的質(zhì)量保證與質(zhì)量控制(編輯修改稿)
2025-01-27 16:58 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 準(zhǔn)方法規(guī)定的步驟，將被測(cè)物轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩芤骸Ｖ苽浜玫臉?biāo)準(zhǔn)系列和空白，在方法選定的波長(zhǎng)下，測(cè)定吸光度。以被測(cè)物濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制校準(zhǔn)曲線。 注意問(wèn)題： [1]對(duì)標(biāo)準(zhǔn)系列，溶液以純?nèi)軇閰⒈冗M(jìn)行測(cè)量后，應(yīng)先作空白校正，然后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 [2]標(biāo)準(zhǔn)溶液一般可直接測(cè)定，但如試樣的預(yù)處理較復(fù)雜致使污染或損失不可忽略時(shí)，應(yīng)和試樣同樣處理后再測(cè)定 (2)校準(zhǔn)曲線的檢驗(yàn) [3]校準(zhǔn)曲線的斜率常隨環(huán)境溫度、試劑批號(hào)和貯存時(shí)間等實(shí)驗(yàn)條件的改變而變動(dòng)。因此，在測(cè)定試樣的同時(shí)，繪制校準(zhǔn)曲線最為理想，否則應(yīng)在測(cè)定試樣的同時(shí)，平行測(cè)定零濃度和中等濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液各兩份，取均值相減后與原校準(zhǔn)曲線上的相應(yīng)點(diǎn)核對(duì)，其相對(duì)差值根據(jù)方法精密度不得大于 5%～ 10%，否則應(yīng)重新繪制校準(zhǔn)曲線。 [1]線性檢驗(yàn) 即檢驗(yàn)校準(zhǔn)曲線的精密度。對(duì)于以 4～ 6個(gè)濃度單位所獲得的測(cè)量信號(hào)值繪制的校準(zhǔn)曲線，分光光度法一般要求其相關(guān)系數(shù) | r | ≥，否則應(yīng)找出原因并加以糾正，重新繪制合格的校準(zhǔn)曲線。 [2]截距檢驗(yàn) 即檢驗(yàn)校準(zhǔn)曲線的準(zhǔn)確度，在線性檢驗(yàn)合格的基礎(chǔ)上，對(duì)其進(jìn)行線性回歸，得出回歸方程 y= a+bx ，然后將所得截距 a與 0作 t檢驗(yàn)，當(dāng)取 95%置信水平，經(jīng)檢驗(yàn)無(wú)顯著性差異時(shí)， a可做 0處理，方程簡(jiǎn)化為 y= bx，移項(xiàng)得 x=y/b。在線性范圍內(nèi)，可代替查閱校準(zhǔn)曲線，直接將樣品測(cè)量信號(hào)值經(jīng)空白校正后，計(jì)算出試樣濃度。當(dāng)a與 0有顯著性差異時(shí)，表示校準(zhǔn)曲線的回歸方程計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確度不高，應(yīng)找出原因予以校正后，重新繪制校準(zhǔn)曲線并經(jīng)線性檢驗(yàn)合格。在計(jì)算回歸方程，經(jīng)截距檢驗(yàn)合格后投入使用。 回歸方程如不經(jīng)上述檢驗(yàn)和處理，就直接投入使用，必將給測(cè)定結(jié)果引入差值相當(dāng)于 a的系統(tǒng)誤差。 [3]斜率檢驗(yàn) 即檢驗(yàn)分析方法的靈敏度，方法靈敏度是隨實(shí)驗(yàn)條件的變化而改變的。在完全相同的分析條件下，僅由于操作中的隨機(jī)誤差導(dǎo)致的斜率變化不應(yīng)超出一定的允許范圍，此范圍因分析方法的精度不同而異。例如：一般而言，分子吸收分光光度法要求其相對(duì)差值小于 5%，而原子吸收分光光度法則要求其相對(duì)差值小于 10%等等。 被測(cè)物轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩芤旱姆磻?yīng)稱為顯色反應(yīng)或發(fā)色反應(yīng)。顯色反應(yīng)的介質(zhì) pH條件、顯色劑用量、顯色反應(yīng)的時(shí)間和溫度、為消除共存物干擾而加入的掩蔽劑、甚至加試劑的順序，都要按照方法步驟的要求執(zhí)行。有時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)系列雖然不像實(shí)際試樣那樣組成復(fù)雜，但仍要求與試樣進(jìn)行同樣的處理步驟，以便控制校準(zhǔn)曲線上的數(shù)據(jù)點(diǎn)的空白、回收率等因素。 (3)校準(zhǔn)曲線的控制 [1]顯色條件的控制 [2]參比溶液的選擇 建立校準(zhǔn)曲線時(shí)，測(cè)量吸光度的參比溶液通常有有兩種選擇方式： 第一種方法用純?nèi)軇┳鲄⒈?，兩個(gè)比色皿都放溶劑時(shí)，“樣品比色皿” 的吸光度測(cè)定值為比色皿成對(duì)性校正值，此后所有樣品吸光度測(cè)定值都須扣除此值，進(jìn)行校正。然后，以純?nèi)軇閰⒈?，測(cè)定空白及標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度，繪制校準(zhǔn)曲線。 第二種方法直接用空白為參比。當(dāng)兩個(gè)比色皿都放空白時(shí)，測(cè)定比色皿成對(duì)性校正值，然后測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度，繪制校準(zhǔn)曲線。 補(bǔ)充說(shuō)明： 兩種方法得到的兩條校準(zhǔn)曲線應(yīng)互相平行。第一種方法可測(cè)定空白的水平，后一種方法不能測(cè)定空白，理論上校準(zhǔn)曲線通過(guò)原點(diǎn)。若空白為零，兩條校準(zhǔn)曲線應(yīng)重合。無(wú)論用什么作參比，實(shí)樣測(cè)定時(shí)應(yīng)該使用與建立校準(zhǔn)曲線相同的比色皿和同樣的參比。 [3]比色皿的成對(duì)性校正 比色皿的成對(duì)性校正對(duì)于使用已久的比色皿是必要的，尤其是測(cè)量吸光度很小的樣品時(shí)，校正可保證測(cè)量值的可靠性和重復(fù)性。 (1)加標(biāo)回收率的分類 加標(biāo)回收率分為空白加標(biāo)回收率和樣品加標(biāo)回收率兩種。 空白加標(biāo)回收率 ：在沒有被測(cè)物質(zhì)的空白樣品基質(zhì)中加入定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，按樣品的處理步驟分析，得到的結(jié)果與理論值的比值即為空白加標(biāo)回收率。 樣品加標(biāo)回收率 ：相同的樣品取兩分，其中一份加入定量的待測(cè)成分標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)；兩份同時(shí)按相同的分析步驟分析，加標(biāo)的一份所得的結(jié)果減去未加標(biāo)一份所得的結(jié)果，其差值同加入標(biāo)準(zhǔn)的理論值之比即為樣品加標(biāo)回收率。 (2)測(cè)定加標(biāo)回收率在分析質(zhì)量保證中的作用 加標(biāo)回收率的測(cè)定可以反映分析結(jié)果的準(zhǔn)確度。當(dāng)按照平行加標(biāo)進(jìn)行回收率的測(cè)定時(shí)，所得結(jié)果既可以反映分析結(jié)果的準(zhǔn)確度，也可以判斷其精密度。是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)經(jīng)常用以 自控的一種質(zhì)量控制技術(shù) 。 (3) 加標(biāo)回收率的理論計(jì)算公式 加標(biāo)回收率計(jì)算的理論公式： 加標(biāo)回收率 = %100??加標(biāo)量 試樣測(cè)定值加標(biāo)試樣測(cè)定值(4)加標(biāo)回收率理論公式的使用條件與不足 [1]理論公式使用的前提條件 加標(biāo)回收率的定義是：“在測(cè)定樣品的同時(shí)，于同一樣品的子樣中加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定， 將其測(cè)定結(jié)果扣除樣品的測(cè)定值，以計(jì)算回收率?！币虼?，使用理論公式時(shí)應(yīng)當(dāng)滿足以下 3個(gè)條件： ① 同一樣品的子樣取樣體積必須相等 ②各類子樣的測(cè)定過(guò)程必須按相同的操作步驟進(jìn)行 ③加標(biāo)物的形態(tài)應(yīng)該和待測(cè)物的形態(tài)相同 [2]理論公式使用的約束條件 測(cè)定加標(biāo)回收率時(shí)要求加標(biāo)量不能過(guò)大，一般為待測(cè)物含量的～ 倍 , 且加標(biāo)后的總含量不應(yīng)超過(guò)方法的測(cè)定上限的 90%。 加標(biāo)物的濃度宜較高，加標(biāo)物的體積應(yīng)很小，一般以不超過(guò)原始試樣體積的 1%為好。 [3]理論公式的不足 ①公式中“加標(biāo)量”一詞的定義均未準(zhǔn)確給定，使其含義不是十分明確。從公式的分子上分析，加標(biāo)量應(yīng)為濃度單位；從公式的分母上理解，應(yīng)為加入一定體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液中所含標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量值，為質(zhì)量單位。 ②若公式中的加標(biāo)量為濃度單位，此時(shí)的加標(biāo)量并不是指標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，而應(yīng)該是加標(biāo)體積所含標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的量值除以試樣體積 (或除以試樣體積與加標(biāo)體積之和 )所得的濃度值。 這里存在著濃度換算，而在理論公式中并沒有明確予以表現(xiàn)出來(lái)。 (5)加標(biāo)回收率計(jì)算方法及數(shù)學(xué)表達(dá)式 [1]以濃度值計(jì)算加標(biāo)回收率公式 %100312 ???cccP式中： P 為加標(biāo)回收率 c1 為試樣濃度，即試樣測(cè)定值， c1 =m1/V1 c2 為加標(biāo)試樣濃度，即加標(biāo)試樣測(cè)定值， c2 =m2/V2 c3 為加標(biāo)量， c3 =c0 V0/V2 m1為試樣中的物質(zhì)含量 m2 為加標(biāo)試樣中的物質(zhì)含量 V1 為試樣體積 V2 為加標(biāo)后試樣體積， V2 = V1 + V0 V0 為加標(biāo)體積 c0 為加標(biāo)用標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度 在加標(biāo)體積不影響分析結(jié)果的情況下，即 V2=V1，此時(shí)
規(guī)章制度相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1