免疫沉淀類實驗-實驗一水質(zhì)的微生物檢測(編輯修改稿)
2025-01-18 22:46 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 玻片； ? 打孔： 待瓊脂板凝固后，用直徑 3mm的打孔器打孔，每孔之間的距離約 4～ 5mm，根據(jù)需要，可打成呈梅花狀、三角狀的孔； ? 加樣： 用可調(diào)微量加樣器根據(jù)需要在不同孔內(nèi)加入待檢血清和抗人血清 10mL； ? 擴(kuò)散： 將瓊脂糖凝膠板放濕盒中，置 37℃ 溫箱中 24h后，取出觀察結(jié)果。 二、雙向瓊脂擴(kuò)散試驗 ? 注意事項： ? 加樣量一定要精確，并且不同逸出孔外，否則結(jié)果不好觀察； ? 制板時，玻片要清潔，邊緣要整齊，加瓊脂糖時要避免產(chǎn)生氣泡； ? 打孔時注意避免產(chǎn)生裂縫或?qū)傊c玻片脫離。 二、雙向瓊脂擴(kuò)散試驗 結(jié)果觀察： 沉淀線的位置、數(shù)目與形狀等。 圖 4 抗原特異性與沉淀線形狀的關(guān)系 a、 b：抗體 A、 A’、 B：抗原 A、 B完全不同 A、 A’部分相同 三、對流免疫電泳 建立在雙向瓊脂擴(kuò)散試驗的基礎(chǔ)上，通過電流，使蛋白質(zhì)抗原、抗體在電場中作定向加速度雙擴(kuò)散，從而加速沉淀的形成。 ? 實驗原理 ： ? 在一定的離子強度、 ，大多數(shù)抗原解離帶負(fù)電，在電場中向陽極移動，而抗體大部分是 IgG，其等電點與環(huán)境中
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