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正文內(nèi)容

微生物營養(yǎng)和培養(yǎng)基(編輯修改稿)

2025-01-14 19:38 本頁面
 

【文章內(nèi)容簡介】 得能量(硫桿菌屬,硫微螺菌屬) H2S + 1/2 O2 →S +H 2O + Kcal S + 1 1/2 O2+H2O → H 2SO4+ Kcal 3. 鐵細(xì)菌: 氧化 Fe2+為 Fe3+獲取能量并同化 CO2 2Fe2++1/2O2+2H+ → 2Fe3++H2O+ Kcal 4. 氫細(xì)菌: 具有氫化酶,從氫的氧化獲取能 量,同化 CO2 H2+ 1/2 O2 → H2O + Kcal 硝化細(xì)菌 鐵細(xì)菌 多數(shù)微生物屬于化能異養(yǎng)型 , 其生長所需要 能量和碳源通常來自同一種有機物 。 根據(jù)化能異養(yǎng)型微生物利用有機物的特性 , 又可以將其分為下列兩種類型: 腐生型微生物: 利用無生命活性的有機物作為生長的碳源 。 寄生型微生物: 寄生在生活的細(xì)胞內(nèi) , 從寄生體內(nèi)獲得生長所需要的營養(yǎng)物質(zhì) 。 存在于寄生與腐生之間的中間過渡類型微生物 , 稱為兼性腐生型 或 兼性寄生型 。 四、化能異養(yǎng)型微生物 肺炎鏈球菌 幽門螺旋菌 第四節(jié) 微生物吸收營養(yǎng)物質(zhì)的方式 ? 單純擴散 ? 促進(jìn)擴散 ? 主動運輸 ? 基團移位 單純擴散 (simple diffusion or passive diffusion) 被輸送的物質(zhì),靠細(xì)胞內(nèi)外濃度為動力,以透析或擴散的形式從高濃度區(qū)向低濃度區(qū)的擴散。 單純擴散 (simple diffusion or passive diffusion) 特點: ① 擴散 是 非特異性的營養(yǎng)物質(zhì)吸收方式 :如營養(yǎng)物質(zhì)通過細(xì)胞膜中的含水小孔 , 由高濃度的胞外環(huán)境向低濃度的胞內(nèi)擴散; ② 在擴散過程中營養(yǎng)物質(zhì)的結(jié)構(gòu)不發(fā)生變化 :即既不與膜上的分子發(fā)生反應(yīng) , 本身的分子結(jié)構(gòu)也不發(fā)生變化; ③ 物質(zhì)運輸?shù)乃俾瘦^慢: 速率與胞內(nèi)外營養(yǎng)物質(zhì)的濃度差有關(guān) ,即隨細(xì)胞膜內(nèi)外該物質(zhì)濃度差的降低而減小 , 直到胞內(nèi)外物質(zhì)濃度相同; ④ 不需要載體參與; 擴散是一個不需要代謝能的運輸方式 , 因此, 物質(zhì)不能進(jìn)行逆濃度運輸 。 ⑤ 可運送的養(yǎng)料有限: 限于水 、 溶于水的氣體 , 及分子量小 , 脂溶性 、 極性小的營養(yǎng)物質(zhì) 。 ?smosis flows towards high salt concentrations 單純擴散模式圖 細(xì)胞膜外 細(xì)胞膜內(nèi) 細(xì)胞膜 三 營 養(yǎng)物在運送過程中,通過與細(xì)胞膜上特異載體蛋白(也稱作透過酶permease) 的可逆性結(jié)合來加快其傳遞速度,但不消耗能量的一類擴散性運送方式。 (facilitated diffusion/transport) (facilitated diffusion) 特點: 在促進(jìn)擴散過程中 ? 營養(yǎng)物質(zhì)本身在 分子結(jié)構(gòu)上也不會發(fā)生變化 ? 不消耗代謝能量 ,故不能進(jìn)行逆濃度運輸 ? 運輸?shù)乃俾视砂麅?nèi)外該物質(zhì)的 濃度差 決定 ?需要細(xì)胞膜上的 載體蛋白(透過酶) 參與物質(zhì) 運輸 ?被運輸?shù)奈镔|(zhì)與載體蛋白有高度的 特異性 ?養(yǎng)料濃度過高時 , 與載體蛋白出現(xiàn) 飽和效應(yīng) 促進(jìn)擴散的運輸方式多見于真核微生物中,例如通常在厭氧生活的酵母菌中,某些物質(zhì)的吸收和代謝產(chǎn)物的分泌是通過這種方式完成的。 Embeded protein: Proteins that act as carriers are too large to move across the membrane. They are transmembrane proteins. They cycle between two conformations in which a solute binding site is accessible on one side of the membrane or the other. 促進(jìn)擴散模式圖 細(xì)胞膜 細(xì)胞膜外 細(xì)胞膜內(nèi) 恢復(fù)原構(gòu)象 移位 再循環(huán) 結(jié)合 構(gòu)象改變 or active ansport (Active transport) 在代謝能的推動下,通過膜上特殊載體蛋白構(gòu)象的變化,逆養(yǎng)料濃度梯度吸收營養(yǎng)物質(zhì)的過程。 主動運輸 (Active transport) 特點: 物質(zhì)在主動運輸?shù)倪^程中 ? 需要消耗 代謝能 ? 可以進(jìn)行 逆濃度 運輸?shù)倪\輸方式 ? 需要 載體蛋白 參與 ? 對被運輸?shù)奈镔|(zhì)有高度的 立體專一性 ? 被運輸?shù)奈镔|(zhì)在轉(zhuǎn)移的過程中 不發(fā)生任何化學(xué)變化 不同的微生物在主動運輸過程中所需的能量的來源不同,好氧微生物中直接來自呼吸能,厭氧微生物主要來自化學(xué)能,光合微生物中則主要來自光能 。 主動運輸是微生物吸收營養(yǎng)物質(zhì)的主要方式。 Comparison of passive and active transport. 主動運輸模式圖 細(xì)胞膜 細(xì)胞膜外 細(xì)胞膜內(nèi) 恢復(fù)原構(gòu)象 移位 再循環(huán) 結(jié)合 構(gòu)象改變 ADP+Pi ATP Na+K+ATP酶系統(tǒng) Na+K+ATPase是 存在于原生質(zhì)膜上的一種重要離子通道蛋白 功能: 利用 ATP能量將 Na+由細(xì)胞內(nèi) “ 泵 ” 出胞外,并將 K+“ 泵 ” 入胞內(nèi)。該酶由大小兩個亞基組成( MW: 12萬, ) 作用步驟 : 1. ATP酶 (E)在細(xì)胞內(nèi)側(cè)與 3個 Na+結(jié)合,同時消耗能量; 2. 磷酸化 ATP酶 (E+)構(gòu)象變化將 Na+排除胞外,并與 2個K+結(jié)合; 3. K+激發(fā) E+脫磷酸化恢復(fù)為 E,同時將 K+運入細(xì)胞。 基因轉(zhuǎn)位是一種特殊的主動運輸,與普通的主動運輸相比,營養(yǎng)物質(zhì)在運輸?shù)倪^程中發(fā)生了 化學(xué)變化 (糖在運輸?shù)倪^程中發(fā)生了磷酸化)。其余特點與主動運輸相同。 基因轉(zhuǎn)位主要存在于厭氧和兼性厭氧型細(xì)菌中,也主要是用于單(或雙)糖與糖的衍生物,以及核苷與脂肪散的運輸 。 (Group translocation) 在酶 Ⅰ 的作用下 HPr被激活 在酶 Ⅱ 的作用下 PHPr將磷酸轉(zhuǎn)移給糖 運送機制 :是依靠磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng) ,即磷酸烯醇式丙酮酸 己糖磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng) . 運送步驟 : (HPr)的激活 細(xì)胞內(nèi)高能化合物磷酸烯醇式丙酮酸( PEP) 的磷酸基團把 HPr激活。 酶 Ⅰ PEP+HPr 丙酮酸 +PHPr HPr是一種低分子量的可溶性蛋白,結(jié)合在細(xì)胞膜上,具有高能磷酸載體的作用。 糖被磷酸化后運入膜內(nèi) 膜外環(huán)境中的糖先與外膜表面的酶 Ⅱ 結(jié)合,再被轉(zhuǎn)運到內(nèi)膜表面。這時,糖被 PHPr上的磷酸激活,并通過酶 Ⅱ 的作用將 糖 磷酸 釋放到細(xì)胞內(nèi)。 酶 Ⅱ PHPr+糖 糖 P +HPr 酶 Ⅱ 是一種結(jié)合于細(xì)胞膜上的蛋白,它對底物具有特異性選擇作用,因此細(xì)胞膜上可誘導(dǎo)出一系列與底物分子相應(yīng)的酶 Ⅱ 。 基團移位模式圖 細(xì)胞膜外 細(xì)胞膜內(nèi) S S S S 細(xì)胞膜 Enz2c Enz2b Enz2c Enz2a S S HPr P ~ P HPr ~ Enz1+ PEP 丙酮酸 四種運輸營養(yǎng)物質(zhì)方式的比較 比較項目 單純擴散 促進(jìn)擴散 主動運輸 基團轉(zhuǎn)位 特異載體蛋白 運輸速度 物質(zhì)運輸方向 胞內(nèi)外濃度 運輸分子 能量消耗 運輸后物質(zhì)的結(jié)構(gòu) 載體飽和效應(yīng) 與溶質(zhì)類似物 運送抑制劑 運送對象舉例 無 慢 由濃至稀 相等 無特異性 不需要 不變 無 無競爭性 無 H2O、 COO甘油、乙醇、鹽類 有 快 由濃至稀 相等 特異性 不需要 不變 有 有競爭性 有 SO4PO4糖 有 快 由稀至濃 胞內(nèi)濃度高 特異性 需要 不變 有 有競爭性 有 氨基酸、乳糖等糖類, Na+、Ca2+等無機粒子 有 快 由稀至濃 胞內(nèi)濃度高 特異性 需要 改變 有 有競爭性 有 葡萄糖、果糖、甘露糖、嘌呤、核苷、脂肪酸 ? 原生動物吸收營養(yǎng)物質(zhì)的方式,有 胞吞 和 胞飲 兩種類型 Special Cases 1. Endocytosis 2. Exocytosis 第五節(jié) 培養(yǎng)基 培養(yǎng)基 (medium):是人工配制的適合于不同微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。它是進(jìn)行科學(xué)研究,發(fā)酵生產(chǎn)微生物制品等的基礎(chǔ) 。 第五節(jié) 培養(yǎng)基 (medium) 定義: 應(yīng)科研或生產(chǎn)的需要,由人工配制的、適合于不同微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物用的營養(yǎng)基質(zhì)(混合養(yǎng)料)。 特點: 任何培養(yǎng)基都應(yīng)具備微生物所需要的六大營養(yǎng)要素,且應(yīng)比例適當(dāng)。所以一旦配成必須立即滅菌。 用途: 促使微生物生長;積累代謝產(chǎn)物;分離微生物菌種;鑒定微生物種類;微生物細(xì)胞計數(shù);菌種保藏;制備微生物制品 一、選用和設(shè)計培養(yǎng)基的原則和方法 (一)培養(yǎng)基組分應(yīng)適合微生物的營養(yǎng)特點 (目的明確) (二)營養(yǎng)物的濃度與比例應(yīng)恰當(dāng)(營養(yǎng)協(xié)調(diào)) (三)物理化學(xué)條件適宜(理化適宜) (四)根據(jù)培養(yǎng)目的選擇原料及其來源 (經(jīng)濟節(jié)約) (一)培養(yǎng)基組分應(yīng)適合微生物的營養(yǎng)特點 即根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。 不同 營養(yǎng)類型 的微生物,其對營養(yǎng)物的需求差異很大。如 自養(yǎng)型 微生物的培養(yǎng)基完全可以(或應(yīng)該)由簡單的無機物質(zhì)組成。異養(yǎng)做生物的培養(yǎng)基至少需要含有一種有機物質(zhì),但有機物的種類需適應(yīng)所培養(yǎng)菌的特點。 按微生物的主要 類群 來說 , 它們所需要的培養(yǎng)基成分也不同: 細(xì)菌: 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 LB (LuriaBertani) 放線菌: 高氏一號培養(yǎng)基 真菌: 查氏合成培養(yǎng)基 PDA (PotatoDextroseAgar)
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