基因工程原理第七章(編輯修改稿)
2025-10-08 20:48 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 的，可用于任何細(xì)胞。這些標(biāo)記通常是細(xì)菌的抗藥基因，因此陽性細(xì)胞可以在適當(dāng)?shù)乃幬餄舛鹊呐囵B(yǎng)基上進行篩選。 擴增選擇標(biāo)記 ? 當(dāng)動物細(xì)胞暴露在某種藥物的有毒濃度中，少數(shù)個別細(xì)胞由于自發(fā)的、擴增性的抗藥突變而存活，這樣的DNA上的擴增性標(biāo)記，稱為擴增選擇標(biāo)記 ? 出現(xiàn)擴增選擇性標(biāo)記的細(xì)胞栽種群中是隨機出現(xiàn)的，可進行高濃度抗藥性的篩選 ? 側(cè)翼 DNA序列可隨標(biāo)記基因一起擴增 氨基蝶呤 DHFR 葉酸 擴增選擇標(biāo)記 ? 擴增選擇標(biāo)記也?？捎糜趦?nèi)源或顯性選擇標(biāo)記，但常常用于擴增選擇的藥物不同 擴增選擇標(biāo)記常用于外源基因的高效表達 復(fù)制子載體：帶有病毒復(fù)制子的載體 ? 病毒基因組具有在宿主細(xì)胞內(nèi)獨立復(fù)制的能力 ? 可能造成溶解性感染，使宿主細(xì)胞裂解，如SV40，由于宿主細(xì)胞的裂解，實現(xiàn)的是一種高水平瞬時表達 ? 可能造成潛伏性感染，從而并不影響宿主細(xì)胞生長，實現(xiàn)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染，如 EBV和 PBV，其中 EBV載體相對于 PBV載體復(fù)制更加穩(wěn)定 SV40（猴多瘤病毒 DNA） 病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)載體 ? 外源 DNA分子包入病毒粒子 (通過連接或同源重組的方式插入病毒載體），后者吸附到細(xì)胞表面從而進入細(xì)胞 ? 效率很高，而且具有高效復(fù)制與高水平表達基因的潛能 ? 不僅可用于培養(yǎng)細(xì)胞，也可用于活體細(xì)胞 ? 腺病毒、桿狀病毒、牛痘病毒、 Lentivirus等 可復(fù)制病毒載體與復(fù)制缺陷型病毒載體 ? 當(dāng)轉(zhuǎn)移基因插入到基因組中或它所替換的基因?qū)τ谠谒拗骷?xì)胞中的感染周期不是必需時，載體可以獨立的增殖，稱為可復(fù)制的或不依賴輔助病毒載體。 ? 當(dāng)轉(zhuǎn)入基因替換了病毒的必需基因時，這樣的載體則
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